摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第一章 前言 | 第10-28页 |
·功能性核酸 | 第10-12页 |
·SELEX 技术 | 第10-11页 |
·功能性核酸 | 第11-12页 |
·脱氧核酶的研究现状 | 第12-20页 |
·脱氧核酶(DNAzyme)的结构、种类及催化原理 | 第13-15页 |
·DNAzyme 的催化特性及其影响因素 | 第15-16页 |
·设计合成脱氧核酶的原则 | 第16页 |
·脱氧核酶的应用 | 第16-20页 |
·在生物学方面的应用 | 第17页 |
·在医学方面的应用 | 第17-20页 |
·核酸的拓扑结构与功能 | 第20-25页 |
·DNA 结构 | 第20-21页 |
·DNA 的拓扑结构 | 第21-22页 |
·单链 DNA 拓扑结构 | 第22-24页 |
·DNA 拓扑结构的研究现状 | 第24-25页 |
·研究利用拓扑结构变化来对功能性核酸 8-17DNAzyme 进行调控的目的、意义及实验构想 | 第25-28页 |
·背景目的及意义 | 第25-26页 |
·实验构想 | 第26-28页 |
第二章 DNAzyme 的环化 | 第28-45页 |
·引言 | 第28-29页 |
·DNAzyme 环化原理 | 第29-30页 |
·试剂及仪器 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-39页 |
·核酸序列的优化 | 第31-33页 |
·35 nt 长的 DNAzyme 序列及接头序列的优化 | 第31-33页 |
·37 nt 长的 DNAzyme 序列及接头序列的优化 | 第33页 |
·对于 DNAzyme 环化温度温度的优化 | 第33-35页 |
·温度优化(1) | 第33-34页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第34-35页 |
·温度优化(2) | 第35页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第35页 |
·DNAzyme 链与使之环化的短链比例的优化 | 第35-37页 |
·DZ1-n/n-lig≥ 1:1 时的 DNAzyme 的环化 | 第36页 |
·DZ1-n/n-lig≤ 1:1 时的 DNAzyme 的环化 | 第36-37页 |
·在较高浓度下制备环状 DNA | 第37-39页 |
·Dz1-n 至 10μM 时短链 DNA 的成环 | 第37-38页 |
·Dz1-n 浓缩至 15μM 和 20μM 时短链 DNA 的成环 | 第38-39页 |
·实验结果与讨论 | 第39-45页 |
·环化序列优化结果 | 第39-41页 |
·温度的优化结果 | 第41-42页 |
·DNAzyme 链与短链成环序列比例的优化 | 第42-43页 |
·高浓度环状 DNAzyme 的环化 | 第43-45页 |
·本章小结 | 第45页 |
第三章 环化对 DNAzyme 活性的影响 | 第45-58页 |
·引言 | 第45-46页 |
·研究环化对 DNAzyme 环化的影响实验构想 | 第46-48页 |
·试剂及仪器 | 第48-49页 |
·DNAzyme 的环化闭合及环化活性实验方法 | 第49-53页 |
·DNAzyme 的环化闭合 | 第49-50页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第50-52页 |
·研究环化对 DNAzyme 活性影响的实验方法 | 第52-53页 |
·DNAzyme 环化闭合及环化活性实验结果及讨论 | 第53-57页 |
·脱氧核酶 Dz1-n 的闭合环化 | 第53-54页 |
·Dz1-n2T 和 Dz1-n4T 的环化闭合 | 第54-55页 |
·脱氧核酶 Dz1-n2T 的环化闭合 | 第54-55页 |
·脱氧核酶 Dz1-n4T 的闭合环化 | 第55页 |
·环化对 DNAzyme 活性影响实验结果 | 第55-57页 |
·本章小结 | 第57-58页 |
第四章 8-17 DNAzyme 活性控制模型的建立 | 第58-70页 |
·引言 | 第58页 |
·建立模型的设想 | 第58-60页 |
·本章所用试剂及仪器 | 第60-61页 |
·Dz1-Cir 环化闭合及活性控制的方法 | 第61-65页 |
·Dz1-Cir 环化条件优化实验 | 第61页 |
·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第61-62页 |
·Dz1-Cir 环化及提取纯化 | 第62-64页 |
·利用限制性内切酶 EcoR I 控制 DNAzyme 活性 | 第64-65页 |
·实验结果 | 第65-69页 |
·DNAzyme 环化闭合实验条件优化结果 | 第65-67页 |
·Dz1-Cir 环化实验结果 | 第67-68页 |
·8-17 DNAzyme 活性控制实验结果 | 第68-69页 |
·本章小结 | 第69-70页 |
第五章 结论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
附录 | 第76页 |