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功能性核酸8-17 DNAzyme的活性调控

摘要第1-6页
Abstract第6-10页
第一章 前言第10-28页
   ·功能性核酸第10-12页
     ·SELEX 技术第10-11页
     ·功能性核酸第11-12页
   ·脱氧核酶的研究现状第12-20页
     ·脱氧核酶(DNAzyme)的结构、种类及催化原理第13-15页
     ·DNAzyme 的催化特性及其影响因素第15-16页
     ·设计合成脱氧核酶的原则第16页
     ·脱氧核酶的应用第16-20页
       ·在生物学方面的应用第17页
       ·在医学方面的应用第17-20页
   ·核酸的拓扑结构与功能第20-25页
     ·DNA 结构第20-21页
     ·DNA 的拓扑结构第21-22页
     ·单链 DNA 拓扑结构第22-24页
     ·DNA 拓扑结构的研究现状第24-25页
   ·研究利用拓扑结构变化来对功能性核酸 8-17DNAzyme 进行调控的目的、意义及实验构想第25-28页
     ·背景目的及意义第25-26页
     ·实验构想第26-28页
第二章 DNAzyme 的环化第28-45页
   ·引言第28-29页
   ·DNAzyme 环化原理第29-30页
   ·试剂及仪器第30-31页
   ·实验方法第31-39页
     ·核酸序列的优化第31-33页
       ·35 nt 长的 DNAzyme 序列及接头序列的优化第31-33页
       ·37 nt 长的 DNAzyme 序列及接头序列的优化第33页
     ·对于 DNAzyme 环化温度温度的优化第33-35页
       ·温度优化(1)第33-34页
       ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第34-35页
       ·温度优化(2)第35页
       ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第35页
     ·DNAzyme 链与使之环化的短链比例的优化第35-37页
       ·DZ1-n/n-lig≥ 1:1 时的 DNAzyme 的环化第36页
       ·DZ1-n/n-lig≤ 1:1 时的 DNAzyme 的环化第36-37页
     ·在较高浓度下制备环状 DNA第37-39页
       ·Dz1-n 至 10μM 时短链 DNA 的成环第37-38页
       ·Dz1-n 浓缩至 15μM 和 20μM 时短链 DNA 的成环第38-39页
   ·实验结果与讨论第39-45页
     ·环化序列优化结果第39-41页
     ·温度的优化结果第41-42页
     ·DNAzyme 链与短链成环序列比例的优化第42-43页
     ·高浓度环状 DNAzyme 的环化第43-45页
   ·本章小结第45页
第三章 环化对 DNAzyme 活性的影响第45-58页
   ·引言第45-46页
   ·研究环化对 DNAzyme 环化的影响实验构想第46-48页
   ·试剂及仪器第48-49页
   ·DNAzyme 的环化闭合及环化活性实验方法第49-53页
     ·DNAzyme 的环化闭合第49-50页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第50-52页
     ·研究环化对 DNAzyme 活性影响的实验方法第52-53页
   ·DNAzyme 环化闭合及环化活性实验结果及讨论第53-57页
     ·脱氧核酶 Dz1-n 的闭合环化第53-54页
     ·Dz1-n2T 和 Dz1-n4T 的环化闭合第54-55页
       ·脱氧核酶 Dz1-n2T 的环化闭合第54-55页
       ·脱氧核酶 Dz1-n4T 的闭合环化第55页
     ·环化对 DNAzyme 活性影响实验结果第55-57页
   ·本章小结第57-58页
第四章 8-17 DNAzyme 活性控制模型的建立第58-70页
   ·引言第58页
   ·建立模型的设想第58-60页
   ·本章所用试剂及仪器第60-61页
   ·Dz1-Cir 环化闭合及活性控制的方法第61-65页
     ·Dz1-Cir 环化条件优化实验第61页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测第61-62页
     ·Dz1-Cir 环化及提取纯化第62-64页
     ·利用限制性内切酶 EcoR I 控制 DNAzyme 活性第64-65页
   ·实验结果第65-69页
     ·DNAzyme 环化闭合实验条件优化结果第65-67页
     ·Dz1-Cir 环化实验结果第67-68页
     ·8-17 DNAzyme 活性控制实验结果第68-69页
   ·本章小结第69-70页
第五章 结论第70-72页
参考文献第72-75页
致谢第75-76页
附录第76页

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