| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-16页 |
| 前言 | 第16-23页 |
| 1 缺氧诱导因子与肿瘤的发生 | 第16-19页 |
| ·肿瘤缺氧 | 第16页 |
| ·HIF1α与肿瘤细胞周期和凋亡 | 第16-17页 |
| ·HIF1α与肿瘤转移 | 第17-18页 |
| ·HIF1α与肿瘤血管新生 | 第18页 |
| ·HIF1α的研究对于肿瘤治疗的意义 | 第18-19页 |
| 2 岩藻聚糖硫酸酯的结构和生物活性 | 第19-22页 |
| ·褐藻岩藻聚糖硫酸酯结构和生物活性的研究进展 | 第19-21页 |
| ·抗凝血活性 | 第20页 |
| ·抗肿瘤活性 | 第20-21页 |
| ·降血糖降血脂活性 | 第21页 |
| ·海参岩藻聚糖硫酸酯结构和生物活性的研究进展 | 第21-22页 |
| 3 立题依据，研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 第一章 海参岩藻聚糖硫酸酯体外抗肿瘤活性的筛选 | 第23-32页 |
| 1 实验材料 | 第23-24页 |
| ·海参 | 第23页 |
| ·试剂 | 第23页 |
| ·细胞株 | 第23-24页 |
| ·仪器 | 第24页 |
| 2 实验方法 | 第24-26页 |
| ·海参岩藻聚糖硫酸酯的提取和制备 | 第24-25页 |
| ·海参粗多糖的提取 | 第24页 |
| ·不同分子量海地瓜岩藻聚糖硫酸酯低聚糖的制备 | 第24-25页 |
| ·美国肉参岩藻聚糖硫酸酯的提取和分离纯化 | 第25页 |
| ·不同分子量海地瓜 SCFUC 低聚糖和美国肉参 SCFUC 体外抗肿瘤活性的筛选 | 第25-26页 |
| ·统计学分析 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-31页 |
| ·不同分子量海地瓜 SCFUC 低聚糖对不同肿瘤细胞株增殖活性的影响 | 第26-30页 |
| ·美国肉参 SCFUC 对不同肿瘤细胞株增殖活性的影响 | 第30-31页 |
| 4 小结 | 第31-32页 |
| 第二章 海参岩藻聚糖硫酸酯对缺氧条件下人胃癌 HGC27 细胞生长的影响 | 第32-60页 |
| 第一节 CoCl_2诱导化学性缺氧模型的建立 | 第32-36页 |
| 1 材料和方法 | 第32-34页 |
| ·实验材料 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32-33页 |
| ·仪器 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| ·CoCl2对 HGC27 细胞增殖的影响 | 第33页 |
| ·CoCl2对 HIF1α mRNA 表达的影响 | 第33-34页 |
| ·统计学分析 | 第34页 |
| 2 结果 | 第34-36页 |
| ·CoCl2对 HGC27 细胞增殖活性的影响 | 第34-35页 |
| ·化学缺氧条件的确定 | 第35-36页 |
| 3 小结 | 第36页 |
| 第二节 SCFUC 对缺氧条件下 HGC27 细胞生长的影响 | 第36-40页 |
| 1 材料和方法 | 第36-37页 |
| ·实验材料 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| ·仪器 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-37页 |
| ·对缺氧条件下 HGC27 细胞增殖活性的影响 | 第37页 |
| ·对缺氧条件下 HGC27 细胞培养上清中 LDH 释放量的影响 | 第37页 |
| ·对缺氧条件下 HGC27 细胞一般形态的影响 | 第37页 |
| 2 结果 | 第37-39页 |
| ·SCFUC 抑制缺氧条件下 HGC27 细胞的增殖活性 | 第37-38页 |
| ·对缺氧条件下 HGC27 细胞中 LDH 释放量的影响 | 第38-39页 |
| ·对缺氧条件下 HGC27 细胞一般形态的影响 | 第39页 |
| 3 小结 | 第39-40页 |
| 第三节 SCFUC 对缺氧条件下 HGC27 细胞凋亡及其作用机制的影响 | 第40-53页 |
| 1 材料和方法 | 第40-45页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·仪器 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| ·AO/EB 染色法检测 SCFUC 对缺氧诱导的 HGC27 细胞凋亡形态的影响 | 第41页 |
| ·TUNEL 法检测 SCFUC 对缺氧条件下 HGC27 细胞凋亡率的影响 | 第41-42页 |
| ·RTPCR 法检测 SCFUC 对缺氧条件下 HGC27 细胞中 HIF1α及其介导的凋亡相关基因 mRNA 表达的影响 | 第42-43页 |
| ·Western blotting 法检测缺氧条件下 HGC27 细胞中 HIF1α及其介导的线粒体凋亡通路相关蛋白表达的影响 | 第43-44页 |
| ·统计学分析 | 第44-45页 |
| 2 结果 | 第45-51页 |
| ·对缺氧条件下 HGC27 细胞凋亡形态的影响 | 第45页 |
| ·对缺氧条件下 HGC27 细胞凋亡率的影响 | 第45-46页 |
| ·对缺氧诱导的 HGC27 细胞中 HIF1α及其介导的线粒体凋亡通路相关基因表达的影响 | 第46-49页 |
| ·对缺氧诱导的 HGC27 细胞中凋亡相关蛋白表达的影响 | 第49-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 4 小结 | 第52-53页 |
| 第四节 SCFUC 对缺氧条件下 HGC27 细胞周期的影响 | 第53-60页 |
| 1 材料和方法 | 第53-55页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·试剂 | 第53页 |
| ·仪器 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| ·RTPCR 法检测 HGC27 细胞周期调控基因 CyclinB1 和 Cdc2 mRNA表达的影响 | 第54页 |
| ·RTRCR 法检测 HGC27 细胞周期检查点相关基因 mRNA 表达的影响 | 第54-55页 |
| ·统计学分析 | 第55页 |
| 2 结果 | 第55-58页 |
| ·SCFUC 对缺氧条件下 HGC27 细胞周期调控相关基因 mRNA 表达的影响 | 第55-57页 |
| ·SCFUC 对缺氧条件下 HGC27 细胞周期检查点相关基因 mRNA 表达的影响 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-59页 |
| 4 小结 | 第59-60页 |
| 第三章 海参岩藻聚糖硫酸酯抑制缺氧条件下肿瘤细胞转移和血管新生及其作用机制的研究 | 第60-78页 |
| 第一节 海参岩藻聚糖硫酸酯抑制缺氧条件下肿瘤转移及其作用机制的研究 | 第60-71页 |
| 1 材料和方法 | 第60-64页 |
| ·实验材料 | 第60页 |
| ·试剂 | 第60-61页 |
| ·仪器 | 第61页 |
| ·方法 | 第61-64页 |
| ·对肿瘤细胞迁移能力的影响 | 第61页 |
| ·对缺氧条件下 HGC27 细胞侵袭能力的影响 | 第61-62页 |
| ·对缺氧条件下 HGC27 细胞粘附能力的影响 | 第62页 |
| ·RTPCR 法检测 SCFUC 对缺氧条件下 HGC27 细胞转移相关基因表达的影响 | 第62-63页 |
| ·Western blotting 检测 SCFUC 对缺氧条件下 HGC27 细胞转移相关蛋白表达的影响 | 第63-64页 |
| ·统计学分析 | 第64页 |
| 2 结果 | 第64-68页 |
| ·SCFUC 对肿瘤细胞粘附能力的影响 | 第64页 |
| ·SCFUC 对 HGC27 细胞迁移能力的影响 | 第64-65页 |
| ·SCFUC 对 HGC27 细胞侵袭能力的影响 | 第65-66页 |
| ·SCFUC 对缺氧条件下 HGC27 细胞转移相关基因表达的影响 | 第66-68页 |
| ·SCFUC 对缺氧条件下 HGC27 细胞转移相关蛋白表达的影响 | 第68页 |
| 3 讨论 | 第68-70页 |
| 4 小结 | 第70-71页 |
| 第二节 海参岩藻聚糖硫酸酯抑制血管新生作用的研究 | 第71-78页 |
| 1 材料和方法 | 第71-73页 |
| ·材料 | 第71页 |
| ·试剂 | 第71页 |
| ·仪器 | 第71页 |
| ·方法 | 第71-73页 |
| ·统计学分析 | 第73页 |
| 2 结果 | 第73-76页 |
| ·SCFUC 抑制缺氧条件下 HUVEC 细胞增殖的活性 | 第73-74页 |
| ·SCFUC 抑制缺氧条件下 HUVEC 细胞体外小管的形成 | 第74页 |
| ·对鸡胚尿囊膜血管生长的影响 | 第74-75页 |
| ·对缺氧条件下 HGC27 细胞 VEGF mRNA 表达的影响 | 第75-76页 |
| ·SCFUC 抑制缺氧条件下 HGC27 细胞 VEGF 蛋白的表达 | 第76页 |
| 3 讨论 | 第76-77页 |
| 4 小结 | 第77-78页 |
| 第四章 海参岩藻聚糖硫酸酯体内抑制肿瘤生长和转移作用及其机制的研究 | 第78-86页 |
| 1 材料与方法 | 第78-81页 |
| ·实验材料 | 第78页 |
| ·药品和试剂 | 第78-79页 |
| ·主要仪器 | 第79页 |
| ·实验方法 | 第79-80页 |
| ·Lewis 肺癌细胞在小鼠体内传代 | 第79页 |
| ·动物模型的复制和实验 | 第79页 |
| ·肿瘤抑制率的测定 | 第79页 |
| ·Lewis 肺癌自发肺转移抑制率 | 第79页 |
| ·RTPCR 法测定肿瘤组织中转移相关基因 mRNA 的表达 | 第79-80页 |
| ·Western blotting 法检测肿瘤组织中转移相关蛋白的表达 | 第80页 |
| ·数据分析 | 第80-81页 |
| 2 结果 | 第81-84页 |
| ·SCFUC 对小鼠抑瘤率的影响 | 第81页 |
| ·SCFUC 对荷瘤小鼠肺转移的影响 | 第81-82页 |
| ·SCFUC 对转移相关基因 mRNA 表达的影响 | 第82-83页 |
| ·SCFUC 抑制转移和血管新生相关蛋白的表达 | 第83-84页 |
| 3 讨论 | 第84-85页 |
| 4 小结 | 第85-86页 |
| 结论 | 第86-87页 |
| 本论文的特色及创新之处 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 发表的学术论文 | 第98页 |
