| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1.前言 | 第12-26页 |
| ·研究的目的与意义 | 第12页 |
| ·国内外研究动态和趋势 | 第12-26页 |
| ·结球甘蓝的发育特性 | 第12-13页 |
| ·植物开花调控的遗传途径 | 第13-17页 |
| ·PHD锌指蛋白与FLC在植物开花中的关键作用 | 第17-18页 |
| ·反义RNA技术 | 第18-21页 |
| ·十字花科植物的外源基因直接转化技术 | 第21-22页 |
| ·基于PCR技术的植物基因分离方法 | 第22-26页 |
| 2.材料与方法 | 第26-40页 |
| ·试验材料 | 第26-28页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·菌株及T/A克隆载体 | 第26页 |
| ·酶及生化试剂 | 第26页 |
| ·主要试验仪器 | 第26-27页 |
| ·药品配制 | 第27-28页 |
| ·试验方法 | 第28-40页 |
| ·甘蓝春化过程中生长锥的观察 | 第28页 |
| ·甘蓝春化相关基因BoVIN3的克隆 | 第28-32页 |
| ·BoVIN3基因及其编码蛋白的生物信息学分析 | 第32-33页 |
| ·半定量RT-PCR研究BoVIN3基因的表达特性 | 第33-34页 |
| ·半定量RT-PCR研究FLC基因的表达特性 | 第34页 |
| ·BoVIN3-1基因植物反义表达载体的构建 | 第34-37页 |
| ·花蕾微量注射法获得转反义BoVIN3-1基因甘蓝植株 | 第37页 |
| ·转化植株的分子检测及其春化时间的观察 | 第37-40页 |
| 3.结果与分析 | 第40-79页 |
| ·甘蓝不同生长状态对低温感应的影响 | 第40-41页 |
| ·甘蓝BoVIN3基因的克隆 | 第41-45页 |
| ·甘蓝BoVIN3基因DNA的克隆 | 第41-44页 |
| ·甘蓝BoVIN3基因cDNA的克隆 | 第44-45页 |
| ·甘蓝BoVIN3基因及其编码蛋白的生物信息学分析 | 第45-61页 |
| ·甘蓝BoVIN3氨基酸序列分析 | 第45-50页 |
| ·甘蓝BoVIN3氨基酸序列比对及进化树分析 | 第50-52页 |
| ·甘蓝BoVIN3蛋白保守结构域预测 | 第52-53页 |
| ·甘蓝BoVIN3基因蛋白分析 | 第53-61页 |
| ·半定量RT-PCR分析BoVIN3基因表达特性 | 第61-66页 |
| ·低温处理下BoVIN3基因在甘蓝各组织中的表达特性 | 第62-64页 |
| ·不同浓度GA_3处理下BoVIN3基因在甘蓝茎尖中的表达特性 | 第64-66页 |
| ·不同浓度KT处理下BoVIN3基因在甘蓝茎尖中的表达特性 | 第66页 |
| ·半定量RT-PCR分析FLC基因表达特性 | 第66-67页 |
| ·反义表达载体pBI35S-BoVIN3-1的构建及转化甘蓝的研究 | 第67-73页 |
| ·反义BoVIN3-1基因片段的获得 | 第67-68页 |
| ·CaMV35S组成型启动子表达载体的构建 | 第68-71页 |
| ·pBI35S-BoVIN3-1质粒直接转化农杆菌 | 第71-72页 |
| ·最适卡那霉素筛选浓度的确定 | 第72-73页 |
| ·转化植株的筛选 | 第73页 |
| ·转化植株的分子检测及其春化时间观察 | 第73-79页 |
| ·转化植株的PCR检测 | 第73-75页 |
| ·转化植株的RT-PCR检测 | 第75-77页 |
| ·转化植株的春化时间观察 | 第77-79页 |
| 4.讨论 | 第79-83页 |
| ·甘蓝春化相关基因BoVIN3的获得及生物信息学分析 | 第79-80页 |
| ·甘蓝BoVIN3的表达与春化的关系 | 第80-81页 |
| ·反义BoVIN3-1基因片段对春化的抑制作用 | 第81页 |
| ·反义表达载体pBI35S-BoVIN3-1对甘蓝转化的研究 | 第81-82页 |
| ·本试验待完善之处及下一步工作计划 | 第82-83页 |
| 5.结论 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-95页 |
| 附录 | 第95-98页 |
| 附图：甘蓝生长锥分化图片 | 第95-97页 |
| 缩略词表 | 第97-98页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文 | 第98页 |
