中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-29页 |
·生长素在植物生长发育中的研究进展 | 第12-17页 |
·PIN 做为生长素的输出载体参与了植物生长发育过程 | 第17-22页 |
·PIN 参与了胚胎形成过程 | 第17-18页 |
·PIN 参与了胚后期根和芽的发育 | 第18页 |
·PIN 参与了根的生长发育过程 | 第18-19页 |
·PIN 参与了茎的发育过程 | 第19-20页 |
·PIN 参与了维管组织的发育过程 | 第20-21页 |
·PIN 参与了植物的向性运动 | 第21-22页 |
·根瘤形成过程 | 第22页 |
·激素对根瘤发育的调节 | 第22-24页 |
·生长素变化与共生过程之间相互作用 | 第24-27页 |
·响应生长素的变化 | 第25页 |
·根瘤的形成依赖宿于主植物的生长素的运输 | 第25-26页 |
·在根瘤起始过程中生长素输入载体和输出载体是如何被调节的 | 第26-27页 |
·生长素的输出载体 PIN 与共生结瘤之间的关系 | 第27页 |
·本实验的目的意义 | 第27-29页 |
2 材料与方法 | 第29-40页 |
·材料与方法 | 第29-31页 |
·植物材料 | 第29-30页 |
·百脉根种植和生长条件 | 第29页 |
·百脉根种子的灭菌处理 | 第29-30页 |
·培养基及营养液(配方见附录): | 第30页 |
·酶与各种生化试剂 | 第30页 |
·引物 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-40页 |
·百脉根植物基因组的提取与纯化 | 第31页 |
·百脉根植物基因组的提取 | 第31页 |
·百脉根植物基因组的纯化 | 第31页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | 第31-33页 |
·载体构建 | 第33-35页 |
·PCR 扩增 | 第33页 |
·连接反应 | 第33-34页 |
·酶切和回收 | 第34页 |
·百脉根超表达 PIN1 表达载体的构建 | 第34-35页 |
·启动子驱动 GUS 报告基因表达载体的构建 | 第35页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第35页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35页 |
·大肠杆菌细胞的转化 | 第35页 |
·大肠杆菌中质粒的提取 | 第35-36页 |
·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第36页 |
·发根农杆菌感受态细胞的制备 | 第36页 |
·百脉根根瘤菌接种 | 第36页 |
·百脉根固氮酶活的测定 | 第36-37页 |
·发根农杆菌介导的百脉根发根根系转化 | 第37页 |
·GUS 检测 | 第37-38页 |
·百脉根生长素及生长素极性运输抑制剂的处理 | 第38页 |
·百脉根 RNA 的提取纯化与反转录 | 第38-40页 |
·TRIZOL 法提取百脉根 RNA | 第38页 |
·百脉根 RNA 的纯化 | 第38页 |
·百脉根 RNA 中基因组 DNA 的去除 | 第38-39页 |
·百脉根 RNA 的反转录 | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-55页 |
·百脉根中 PIN1 基因的克隆 | 第40-41页 |
·百脉根总 RNA 的提取与反转录 | 第40页 |
·PIN1 基因的克隆 | 第40-41页 |
·百脉根中 PIN1 基因的 cDNA 序列及编码的氨基酸信息 | 第41-42页 |
·PIN1 基因的 cDNA 全长序列及编码的氨基酸信息 | 第41页 |
·百脉根中 PIN1 基因与其它植物中同源基因的亲缘关系比对 | 第41-42页 |
·百脉根中 PIN1 启动子的扩增 | 第42页 |
·百脉根总 DNA 的提取以及 PIN1 启动子的克隆 | 第42页 |
·百脉根杂合子的鉴定 | 第42-43页 |
·uml 突变体的结瘤表型分析 | 第43-47页 |
·uml 突变体的筛选 | 第43-44页 |
·uml 突变体的共生结瘤表型分析 | 第44-46页 |
·uml 突变体接种植株固氮酶活力的测定 | 第46-47页 |
·uml 中 PIN1 时空表达模式的分析 | 第47-49页 |
·PIN1 启动子在百脉根中根系中空间表达模式 | 第47-48页 |
·不同接种时间根系和根瘤中 PIN1 的表达 | 第48-49页 |
·生长素以及生长素极性运输抑制剂对 uml 结瘤的影响 | 第49-51页 |
·过表达 PIN1 能够使突变体 uml 恢复结瘤表型 | 第51-53页 |
·含有 PIN1 过表达载体的转化 | 第52-53页 |
·在根瘤形成过程中生长素分布的变化 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-59页 |
5 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-73页 |
致谢 | 第73页 |