| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 一.产磷酸甘油氧化酶菌种的筛选及鉴定 | 第13-30页 |
| 引言 | 第13页 |
| 1 实验材料 | 第13-20页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第13页 |
| ·菌种 | 第13-14页 |
| ·培养基 | 第14-16页 |
| ·基本培养基 | 第14页 |
| ·分类鉴定培养基 | 第14-16页 |
| ·实验所需溶液 | 第16-20页 |
| ·酶活测定所需溶液 | 第16-18页 |
| ·分类鉴定用溶液 | 第18-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-25页 |
| ·菌体培养 | 第20页 |
| ·酵母的培养 | 第20页 |
| ·细菌的培养 | 第20页 |
| ·粗酶提取方法 | 第20页 |
| ·酶活力测定和活性单位的定义 | 第20-21页 |
| ·酶活力测定 | 第20-21页 |
| ·酶活力单位的定义 | 第21页 |
| ·酶活计算公式 | 第21页 |
| ·生物量的测定 | 第21页 |
| ·菌株的筛选 | 第21-22页 |
| ·初筛 | 第21页 |
| ·复筛 | 第21-22页 |
| ·菌株的分类鉴定 | 第22-25页 |
| ·细胞形态观察 | 第22页 |
| ·细胞形态 | 第22页 |
| ·革兰氏染色 | 第22-23页 |
| ·芽孢染色 | 第23页 |
| ·菌株生理生化特征 | 第23-25页 |
| 3 结果与分析 | 第25-28页 |
| ·产磷酸甘油氧化酶菌种的筛选 | 第25-26页 |
| ·产磷酸甘油氧化酶菌种的初筛 | 第25页 |
| ·产磷酸甘油氧化酶菌种的复筛 | 第25-26页 |
| ·菌株鉴定结果 | 第26-28页 |
| ·形态特征 | 第26-27页 |
| ·生理生化特征 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-29页 |
| 参考文献 | 第29-30页 |
| 二 菌株形成条件的优化及扩大化培养 | 第30-43页 |
| 引言 | 第30页 |
| 1 材料 | 第30-31页 |
| ·菌种 | 第30页 |
| ·培养基 | 第30-31页 |
| ·斜面诱导培养基 | 第30-31页 |
| ·种子培养基 | 第31页 |
| ·基础发酵培养基 | 第31页 |
| ·优化培养基 | 第31页 |
| ·主要仪器和试剂 | 第31页 |
| 2 实验方法 | 第31-34页 |
| ·菌株培养方法 | 第31-32页 |
| ·粗酶提取方法 | 第32页 |
| ·酶活力测定 | 第32页 |
| ·培养基组份的确定 | 第32-33页 |
| ·底物及其类似物对产酶的影响 | 第32页 |
| ·碳源对产酶的影响 | 第32页 |
| ·氮源的对产酶的影响 | 第32页 |
| ·金属离子对产酶的影响 | 第32页 |
| ·正交法确定发酵培养基的配比 | 第32-33页 |
| ·发酵条件的优化 | 第33-34页 |
| ·发酵温度对产酶的影响 | 第33页 |
| ·发酵液初始pH对产酶的影响 | 第33页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第33页 |
| ·通气量对产酶的影响 | 第33页 |
| ·摇床转速对产酶的影响 | 第33-34页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第34页 |
| ·扩大化培养的条件优化 | 第34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-40页 |
| ·培养基组分的确定 | 第34-36页 |
| ·底物及其类似物对产酶的影响 | 第34-35页 |
| ·碳源和氮源对产酶的影响 | 第35页 |
| ·金属离子对产酶的影响 | 第35页 |
| ·优化培养基的确定 | 第35-36页 |
| ·发酵条件的研究 | 第36-39页 |
| ·pH对产酶的影响 | 第36-37页 |
| ·通气量对产酶的影响 | 第37页 |
| ·接种量对产酶的影响 | 第37-38页 |
| ·旋转摇速对产酶的影响 | 第38页 |
| ·温度对产酶的影响 | 第38-39页 |
| ·培养时间对产酶的影响 | 第39页 |
| ·扩大化培养 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-43页 |
| 三 酶的分离纯化 | 第43-56页 |
| 引言 | 第43页 |
| 1 实验材料 | 第43-46页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·仪器 | 第43-44页 |
| ·实验所需溶液的配制 | 第44-46页 |
| ·SDS-PAGE电泳中溶液的配制 | 第44-46页 |
| ·蛋白质浓度测定中所需溶液 | 第46页 |
| 2 实验方法 | 第46-50页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第46-47页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
| ·测定目的蛋白浓度 | 第47页 |
| ·硫酸铵分级沉淀预实验 | 第47-48页 |
| ·硫酸铵粗级分离 | 第48页 |
| ·脱盐 | 第48页 |
| ·离子交换层析中的条件确定 | 第48-49页 |
| ·Phenyl-Sepharosc CL-4B疏水层析 | 第49页 |
| ·Chelating Sepharose F·F亲和层析 | 第49页 |
| ·Sephacryl S-200HR凝胶层析 | 第49-50页 |
| ·酶的纯度及分子量测定 | 第50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-54页 |
| ·分离纯化结果 | 第50-54页 |
| ·硫酸铵沉淀结果 | 第50-51页 |
| ·离子交换层析结果 | 第51页 |
| ·疏水层析结果 | 第51-52页 |
| ·Chelating Sepharose F·F亲和层析结果 | 第52-53页 |
| ·Sephacryl S-200HR凝胶层析结果 | 第53-54页 |
| ·酶的鉴定及分子量的测定 | 第54页 |
| 4 讨论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-56页 |
| 四 磷酸甘油氧化酶的酶学性质 | 第56-68页 |
| 引言 | 第56页 |
| 1 实验材料 | 第56-57页 |
| ·磷酸甘油氧化酶 | 第56页 |
| ·缓冲溶液的配制 | 第56-57页 |
| 2 实验方法 | 第57-61页 |
| ·酶的最适pH | 第57-58页 |
| ·酶的pH稳定性 | 第58-59页 |
| ·酶的最适反应温度 | 第59-60页 |
| ·酶的热稳定性 | 第60页 |
| ·酶的米氏常数Km的测定 | 第60-61页 |
| ·部分金属离子对酶活性的影响 | 第61页 |
| ·不同温度存放对磷酸甘油氧化酶活性的影响 | 第61页 |
| 3 结果与分析 | 第61-65页 |
| ·酶作用的最适pH | 第61-62页 |
| ·酶作用的酸碱稳定性 | 第62-63页 |
| ·酶作用的最适温度 | 第63页 |
| ·酶的热稳定性 | 第63-64页 |
| ·酶的米氏常数Km的测定 | 第64页 |
| ·部分金属离子对酶活性的影响 | 第64页 |
| ·保存方式对酶活性的影响 | 第64-65页 |
| 4 讨论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
| 五 结论与建议 | 第68-71页 |
| 综述 | 第71-84页 |
| 参考文献 | 第80-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 发表文章目录 | 第85-87页 |
