| 中文摘要 | 第4-8页 |
| abstract | 第8-11页 |
| 序言 | 第16-22页 |
| 1.1 课题背景、研究目的及意义 | 第16-17页 |
| 1.2 论文的主要研究内容 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-22页 |
| 第一部分 MAGE-A9在卵巢癌中的表达及临床意义 | 第22-40页 |
| 一、材料与方法 | 第22-29页 |
| 1 主要材料 | 第22-24页 |
| 1.1 标本收集 | 第22页 |
| 1.2 临床资料 | 第22-23页 |
| 1.3 主要试剂 | 第23-24页 |
| 1.4 主要仪器 | 第24页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第24-29页 |
| 2.1 组织芯片的制作 | 第24-25页 |
| 2.2 免疫组织化学染色（ENVISION两步法）： | 第25-26页 |
| 2.3 对照设置 | 第26页 |
| 2.4 结果判断 | 第26页 |
| 2.5 一步法定量逆转录聚合酶链反应（ONE-STEP QPCR ANALYSIS） | 第26-29页 |
| 2.5.1 引物设计资料 | 第26页 |
| 2.5.2 一步法定量逆转录聚合酶链反应实验步骤 | 第26-29页 |
| 2.5.2.1 组织总RNA抽提 | 第26-27页 |
| 2.5.2.2 RNA浓度测定 | 第27页 |
| 2.5.2.3 逆转录PCR | 第27-28页 |
| 2.5.2.4 实时荧光定量PCR检测 | 第28-29页 |
| 2.6 统计学方法 | 第29页 |
| 二、实验结果 | 第29-33页 |
| 1. MAGE-A9基因在卵巢癌组织中的表达 | 第29-30页 |
| 2. MAGE-A9蛋白在卵巢癌组织中的表达 | 第30-31页 |
| 3. MAGE-A9的表达与卵巢癌临床病理参数的关系 | 第31-32页 |
| 4. MAGE-A9的表达与卵巢癌预后的关联性 | 第32-33页 |
| 三、讨论 | 第33-37页 |
| 四、结论 | 第37页 |
| 参考文献 | 第37-40页 |
| 第二部分 MAGE-A9基因表达对卵巢癌细胞生物学行为的影响及对化疗耐药机制探讨 | 第40-76页 |
| 一、材料与方法 | 第40-54页 |
| 1 主要材料 | 第40-41页 |
| 1.1 细胞株 | 第40页 |
| 1.2 主要试剂 | 第40页 |
| 1.3 主要仪器 | 第40-41页 |
| 2 实验方法与步骤 | 第41-54页 |
| 2.1 细胞培养 | 第41-42页 |
| 2.1.1 细胞复苏 | 第41页 |
| 2.1.2 细胞传代培养 | 第41-42页 |
| 2.1.3 细胞冻存 | 第42页 |
| 2.1.4 HO-8910，A2780，SK-OV3和IOSE80细胞的培养 | 第42页 |
| 2.2 载体构建 | 第42-45页 |
| 2.2.1 MAGE-A9 SHRNA载体构建 | 第42-43页 |
| 2.2.2 MAGE-A9过表达载体构建 | 第43-45页 |
| 2.3 RT-PCR检测MAGE-A9基因的MRNA水平 | 第45-48页 |
| 2.3.1 MAGE-A9引物设计 | 第45页 |
| 2.3.2 提取细胞总RNA | 第45-46页 |
| 2.3.3 RT-PCR检测 | 第46-47页 |
| 2.3.4 RT-PCR筛选MAGE-A9最佳干扰RNAI靶点 | 第47-48页 |
| 2.4 免疫印迹检测 | 第48-50页 |
| 2.4.1 检测各细胞株MAGE-A9基因蛋白水平 | 第48-49页 |
| 2.4.2 检测各转染组MAGE-A9蛋白水平 | 第49页 |
| 2.4.3 检测凋亡相关蛋白、自噬相关蛋白和EMT相关蛋白的表达 | 第49-50页 |
| 2.5 MTT筛选化疗药物顺铂的使用浓度 | 第50-51页 |
| 2.6 CCK8检测细胞增殖能力 | 第51-52页 |
| 2.6.1 检测干扰MAGE-A9后HO-8910 增殖能力改变 | 第51-52页 |
| 2.6.2 检测MAGE-A9过表达后A2780增殖能力改变 | 第52页 |
| 2.7 TRANSWELL检测细胞侵袭能力 | 第52-53页 |
| 2.8 划痕实验检测细胞迁移能力 | 第53页 |
| 2.9 统计学方法 | 第53-54页 |
| 二、实验结果 | 第54-68页 |
| 1 SHRNA干扰MAGE-A9的研究结果 | 第54-62页 |
| 1.1 MAGE-A9的MRNA和蛋白在不同卵巢细胞株中的表达 | 第54-55页 |
| 1.2 筛选最佳MAGE-A9干扰靶点 | 第55页 |
| 1.3 MTT筛选化疗药物顺铂的耐受浓度 | 第55-56页 |
| 1.4 CCK8检测MAGE-A9表达变化对HO-8910 细胞增殖能力的影响 | 第56-57页 |
| 1.5 TRANSWELL检测HO-8910 细胞侵袭能力 | 第57-58页 |
| 1.6 划痕实验检测HO-8910 细胞迁移能力 | 第58-59页 |
| 1.7 免疫印迹检测细胞增殖、凋亡和迁移相关蛋白的表达变化 | 第59-62页 |
| 2 过表达MAGE-A9可促进卵巢细胞的耐药、增殖和侵袭 | 第62-68页 |
| 2.1 筛选MAGE-A9低表达细胞株 | 第62-63页 |
| 2.2 MTT筛选化疗药物顺铂的使用浓度 | 第63页 |
| 2.3 CCK8检测过表达MAGE-A9对A2780细胞对顺铂耐药能力的影响 | 第63-64页 |
| 2.4 TRANSWELL检测过表达MAGE-A9对A2780细胞侵袭能力的影响 | 第64-65页 |
| 2.5 划痕实验检测A2780细胞迁移能力 | 第65-66页 |
| 2.6 免疫印迹检测相关凋亡和周期蛋白的表达 | 第66-68页 |
| 三、讨论 | 第68-72页 |
| 四、结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 综述 肿瘤特异性抗原MAGE-A9在肿瘤中的研究进展 | 第76-96页 |
| 参考文献 | 第87-96页 |
| 英文缩写词表 | 第96-98页 |
| 附录：常规溶液配制 | 第98-101页 |
| 攻读博士学位期间公开发表的论文与参加的项目 | 第101-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
