| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-17页 |
| ·中华倒刺鲃的研究概况 | 第10-11页 |
| ·胰蛋白酶的研究概况 | 第11-17页 |
| ·胰蛋白酶简介 | 第11页 |
| ·胰蛋白酶的酶学研究 | 第11-12页 |
| ·胰蛋白酶基因的研究 | 第12-14页 |
| ·胰蛋白酶抑制因子 | 第14页 |
| ·胰蛋白酶的应用研究 | 第14-17页 |
| 第2章 引言 | 第17-18页 |
| 第3章 材料和方法 | 第18-27页 |
| ·动物材料、载体和菌种 | 第18页 |
| ·动物材料 | 第18页 |
| ·菌种及质粒 | 第18页 |
| ·试剂和试剂盒 | 第18-19页 |
| ·主要分子生物学试剂 | 第18页 |
| ·试剂盒 | 第18页 |
| ·溶液的配制 | 第18-19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·总RNA的提取 | 第19页 |
| ·引物设计 | 第19-20页 |
| ·RACE原理和程序 | 第20-25页 |
| ·TaKaRa 3'-Full RACE Core Set的原理 | 第20-21页 |
| ·TaKaRa 5'-Full RACE Core Set的原理 | 第21页 |
| ·mRNA的反转录反应 | 第21-23页 |
| ·扩增胰蛋白酶基因的3’末端 | 第23-24页 |
| ·扩增胰蛋白酶基因的中间片段 | 第24页 |
| ·扩增胰蛋白酶基因的5’末端 | 第24-25页 |
| ·目的片段克隆与测序 | 第25-27页 |
| ·凝胶电泳 | 第25页 |
| ·目的片段的回收 | 第25页 |
| ·目的片段与pMD18-T载体的连接 | 第25-26页 |
| ·质粒DNA转化大肠杆菌 | 第26页 |
| ·转化子的蓝白斑筛选 | 第26页 |
| ·转化子的菌液PCR扩增鉴定 | 第26页 |
| ·测序与生物信息分析 | 第26-27页 |
| 第4章 结果与分析 | 第27-34页 |
| ·中华倒刺鲃胰腺总RNA的提取 | 第27页 |
| ·胰蛋白酶基因的克隆 | 第27-29页 |
| ·胰蛋白酶cDNA 3’末端的扩增与克隆 | 第27-28页 |
| ·胰蛋白酶cDNA中间片段的扩增与克隆 | 第28页 |
| ·胰蛋白酶cDNA 5’末端的扩增与克隆 | 第28-29页 |
| ·蛋白酶基因的cDNA序列分析 | 第29-30页 |
| ·胰蛋白酶基因推导蛋白的分析 | 第30-34页 |
| ·胰蛋白酶基因推导蛋白的基本参数 | 第30页 |
| ·胰蛋白酶基因推导氨基酸序列同源性分析 | 第30-32页 |
| ·胰蛋白酶基因推导的氨基酸的聚类分析 | 第32-33页 |
| ·胰蛋白酶的二级结构预测 | 第33-34页 |
| 第5章 讨论 | 第34-36页 |
| ·关于总RNA的提取 | 第34页 |
| ·利用RACE法克隆基因的分析 | 第34-35页 |
| ·引物设计 | 第34-35页 |
| ·PCR条件的优化 | 第35页 |
| ·胰蛋白酶cDNA及推导氨基酸的分析 | 第35-36页 |
| 第6章 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 硕士学习期间发表论文以及参加课题一览表 | 第44页 |