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发根农杆菌介导的菘蓝(Isatis indigotica Fort.)遗传转化及植株再生体系的建立

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-13页
第一部分 文献综述第13-21页
 1 菘蓝的生物学研究进展第13-17页
   ·菘蓝的形态特征第13页
   ·菘蓝的化学成分第13-14页
   ·药理活性第14-16页
     ·抗菌作用第14页
     ·抗病毒作用第14-15页
     ·对内毒素的作用第15页
     ·对免疫系统的作用第15页
     ·抗癌作用第15页
     ·单胺氧化酶抑制作用第15-16页
     ·其他药理作用第16页
   ·两种倍性水平菘蓝的生药学比较第16-17页
     ·形态学比较第16页
     ·化学成分及含量比较第16页
     ·药理活性作用比较第16-17页
 2 发根农杆菌介导的植物遗传转化研究进展第17-18页
   ·Ri质粒的基因结构第17-18页
   ·Ri T-DNA对植物的转化机制第18页
   ·转化方法第18页
     ·活体接种法第18页
     ·外植体共感染接种法第18页
     ·原生质体共培养转化法第18页
 3 本研究的目的、意义第18-21页
第二部分 Ri T-DNA对菘蓝毛状根转化体系的建立及优化第21-34页
 1 材料和方法第21-24页
   ·实验材料第21页
     ·植物材料第21页
     ·细菌菌株第21页
     ·培养基第21页
   ·研究方法第21-24页
     ·菘蓝毛状根的诱导第21-22页
       ·无菌苗的获得第21页
       ·发根农杆菌菌种的保存与活化第21-22页
       ·抗生素抑菌浓度的确定第22页
       ·选择压的确定第22页
       ·发根农杆菌对菘蓝毛状根的诱导第22页
     ·转化根的Kan~r筛选第22页
     ·转化根的PCR鉴定第22-24页
       ·细菌质粒DNA的提取第22-23页
       ·植物DNA的提取第23页
       ·引物的设计第23-24页
       ·PCR扩增条件第24页
     ·毛状根优良无性系的建立第24页
     ·两种倍性菘蓝毛状根的比较第24页
 2 结果与讨论第24-34页
   ·抗生素抑菌浓度的确定第24-25页
   ·选择压的确定第25-26页
   ·四倍体菘蓝子叶自然生根的检测第26-27页
   ·毛状根诱导及形态学特征第27页
   ·各因素对毛状根诱导的影响第27-30页
     ·光照对毛状根诱导的影响第27-29页
     ·激素对毛状根诱导的影响第29页
     ·菌株类型对毛状根诱导的影响第29-30页
   ·转化根的Kan~r筛选第30页
   ·转化根的PCR鉴定第30-32页
   ·毛状根优良无性系的建立第32-33页
   ·两种倍性菘蓝毛状根的比较第33-34页
第三部分 毛状根植株再生体系的建立及优化第34-50页
 1 材料与方法第34-35页
   ·实验材料第34页
   ·研究方法第34-35页
     ·毛状根不定芽再生植株体系的建立第34页
     ·毛状根愈伤组织再生植株体系的建立第34页
       ·毛状根愈伤组织的诱导第34页
       ·愈伤组织不定芽的诱导第34页
     ·毛状根体细胞胚再生植株体系的建立第34-35页
     ·再生植株的土壤移栽第35页
 2 结果与讨论第35-50页
   ·毛状根不定芽再生植株体系的建立第35-36页
   ·毛状根愈伤组织再生植株体系的建立第36-41页
     ·激素对毛状根愈伤组织诱导的影响第36-38页
     ·激素对愈伤组织不定芽分化的影响第38-40页
     ·各因素对不定芽生根的影响第40-41页
   ·毛状根体细胞胚再生植株体系的建立第41-48页
     ·毛状根体细胞胚诱导的观察第42-43页
     ·各因素对体细胞胚诱导频率的影响第43-45页
     ·各因素对体胚得胚率的影响第45-46页
     ·激素对体细胞胚发育的影响第46-47页
     ·蔗糖对体细胞胚发育的影响第47-48页
   ·三种途径再生植株成活率的比较第48-50页
第四部分 再生植株rol基因的检测及其生理生化分析第50-55页
 1 材料和方法第50-51页
   ·实验材料第50页
   ·研究方法第50-51页
     ·再生植株rol基因的PCR检测第50页
     ·再生植株靛蓝、靛玉红的定性、定量分析第50-51页
       ·色谱条件第50页
       ·样品预处理第50-51页
 2 结果与讨论第51-55页
   ·再生植株的的形态学比较及生理观察第51-52页
   ·再生植株rol基因的PCR鉴定第52-53页
   ·再生植株靛蓝、靛玉红的定性、定量分析第53-55页
     ·标准曲线的制定第53页
     ·再生植株靛蓝、靛玉红含量测定第53-55页
结论第55-56页
致谢第56-57页
参考文献第57-66页
附图第66-72页

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