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鸡胚原始生殖细胞的分离与培养

英文缩略词第1-8页
中文摘要第8-10页
1 引言第10-19页
   ·PGCs来源的胚胎干细胞研究历史与现状第10-14页
     ·鸡PGCs的形态特征与类型第10-11页
     ·PGCs的起源、迁移和聚集的研究第11-12页
     ·PGCs体外的获取及向胚胎生殖细胞的转化第12-13页
     ·目前从PGCs中分离克隆鸡胚胎干细胞的研究进展及存在的问题第13-14页
   ·胚胎干细胞建系的技术要点第14-18页
     ·饲养层细胞的重要性第14-15页
     ·条件培养基和生长因子的应用第15页
     ·PGCs的培养基及EG细胞的分离传代第15-16页
     ·添加物的影响第16页
     ·胚胎日龄、遗传背景以及获取PGCs的时间第16-17页
     ·EG细胞的鉴定和冻存第17-18页
   ·EG细胞的应用前景第18页
   ·本研究的目的、意义及主要内容第18-19页
2 材料与方法第19-28页
   ·实验动物第19页
   ·主要仪器第19-20页
   ·主要试剂第20页
   ·有关溶液的配制第20-23页
   ·实验方法第23-28页
     ·52h鸡胚PGCs的分离第23页
     ·5.5d~9.5d鸡胚PGCs的分离第23页
     ·PGCs的染色第23-24页
     ·鸡胚成纤维细胞的制备第24-25页
     ·小鼠胎儿成纤维细胞的制备第25页
     ·饲养层的制备第25-26页
     ·胚胎成纤维细胞、SNL细胞的冻存与复苏第26页
     ·鸡胚浸出液的制作第26-27页
     ·类EG细胞的培养第27页
     ·类EG细胞的鉴定的第27-28页
3 实验结果第28-33页
   ·成纤维细胞的生长行为第28-29页
   ·PGCs的体外培养与类EG细胞集落的识别第29页
   ·不同胚龄对鸡类EG细胞培养的影响第29-30页
   ·饲养层对鸡类EG细胞的效果第30-31页
   ·生长因子对鸡类EG细胞生长的效果第31-32页
   ·消化液对鸡类EG细胞克隆传代的效果第32-33页
   ·鸡类EG细胞的鉴定结果第33页
     ·形态学鉴定第33页
     ·PAS染色结果第33页
     ·体外分化实验结果第33页
     ·嵌合体鸡的制作第33页
4 分析与讨论第33-39页
   ·影响饲养层质量的因素第33-35页
   ·PGCs的获取与PGCs的体外培养第35页
   ·不同饲养层及生长因子对鸡类EG细胞生长的影响第35-37页
   ·消化液及其它因素对鸡类EG细胞培养的影响第37-38页
   ·来源于PGCs的鸡类EG细胞的生长特性和鉴定第38-39页
5 结论第39-40页
参考文献第40-47页
英文摘要第47-49页
图版说明第49-52页
致谢第52页

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