| 缩写词 | 第1-13页 |
| 摘要 | 第13-16页 |
| Abstract | 第16-21页 |
| 第一章 引言 | 第21-30页 |
| 1 植物种质资源保存研究进展 | 第21-23页 |
| ·植物离体保存研究的优势 | 第22页 |
| ·植物离体保存方法简介 | 第22-23页 |
| ·常规组织培养技术保存法 | 第22页 |
| ·限制生长保存法 | 第22页 |
| ·超低温保存法 | 第22-23页 |
| 2 植物多酚氧化酶基因和叶绿素a-b结合蛋白基因研究进展 | 第23-26页 |
| ·植物多酚氧化酶基因研究概况 | 第23-25页 |
| ·多酚氧化酶在植物中的分布及亚细胞定位 | 第23-24页 |
| ·植物多酚氧化酶基因的结构与特性 | 第24页 |
| ·植物多酚氧化酶基因的生理功能 | 第24-25页 |
| ·植物多酚氧化酶基因的表达 | 第25页 |
| ·植物叶绿素a-b结合蛋白基因研究进展 | 第25-26页 |
| ·植物叶绿素a-b结合蛋白基因的克隆 | 第25-26页 |
| ·植物光系统捕光色素蛋白复合体的类型及功能 | 第26页 |
| 3 橄榄种质资源的离体保存 | 第26-29页 |
| ·橄榄种质资源保存研究进展 | 第26-27页 |
| ·橄榄离体培养研究进展 | 第27-28页 |
| ·茎尖培养 | 第27页 |
| ·幼胚培养 | 第27页 |
| ·成熟胚培养 | 第27-28页 |
| ·橄榄分子生物学研究进展 | 第28-29页 |
| ·DNA和RNA的提取 | 第28页 |
| ·分子标记 | 第28页 |
| ·基因克隆 | 第28-29页 |
| 4 本研究的意义和内容 | 第29-30页 |
| ·本研究的意义 | 第29页 |
| ·本研究的内容 | 第29-30页 |
| 第二章 橄榄离体培养 | 第30-47页 |
| 第一节 橄榄花药愈伤组织的诱导 | 第30-32页 |
| 1 材料与方法 | 第30-31页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-31页 |
| ·培养条件 | 第31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-32页 |
| ·不同消毒方法对橄榄花药消毒效果的影响 | 第31页 |
| ·不同培养基配方对橄榄花药愈伤组织诱导的影响 | 第31-32页 |
| 3 讨论 | 第32页 |
| ·橄榄花药愈伤组织的诱导的难点 | 第32页 |
| ·诱导橄榄花药愈伤组织的关键因素是2,4-D | 第32页 |
| 第二节 橄榄幼胚培养与试管苗获得 | 第32-41页 |
| 1 材料与方法 | 第33-34页 |
| ·试验材料 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-34页 |
| ·外植体的处理 | 第33页 |
| ·影响3个橄榄品种幼胚萌发的因素 | 第33-34页 |
| ·3个橄榄品种试管苗的增殖培养 | 第34页 |
| ·培养条件 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-40页 |
| ·影响3个橄榄品种幼胚萌发的因素 | 第34-38页 |
| ·不同幼胚类型对3个橄榄品种萌发的影响 | 第34-35页 |
| ·不同光照强度对3个橄榄品种萌发的影响 | 第35页 |
| ·不同MS浓度和蔗糖含量对3个橄榄品种萌发的影响 | 第35-37页 |
| ·不同取材时间对3个橄榄品种萌发的影响 | 第37-38页 |
| ·3个橄榄品种试管苗的增殖培养 | 第38-40页 |
| 3 讨论 | 第40-41页 |
| ·3个橄榄品种幼胚培养反应类似 | 第40-41页 |
| ·6-BA是橄榄侧芽诱导的关键因素 | 第41页 |
| 第三节 橄榄成熟胚培养与试管苗获得 | 第41-47页 |
| 1 材料与方法 | 第41-42页 |
| ·试验材料 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-46页 |
| ·不同光照时间对橄榄侧芽诱导的影响 | 第42-43页 |
| ·不同质量浓度蔗糖对橄榄侧芽诱导的影响 | 第43-44页 |
| ·四因素三水平正交设计不同因素对橄榄侧芽诱导的影响 | 第44-46页 |
| 3 讨论 | 第46-47页 |
| ·光照和蔗糖在橄榄侧芽诱导中起关键作用 | 第46页 |
| ·植物生长调节物在橄榄侧芽诱导中的作用 | 第46-47页 |
| 第三章 橄榄试管苗离体种质保存研究 | 第47-56页 |
| 第一节 橄榄试管苗离体种质保存方法初探 | 第47-49页 |
| 1 材料与方法 | 第47页 |
| ·试验材料 | 第47页 |
| ·方法 | 第47页 |
| ·培养条件 | 第47页 |
| 2 结果与分析 | 第47-49页 |
| ·不同培养基对橄榄试管苗离体保存的影响 | 第47-48页 |
| ·不同成熟度胚对橄榄试管苗离体保存的影响 | 第48-49页 |
| 3 讨论 | 第49页 |
| 第二节 橄榄试管苗离体种质保存 | 第49-56页 |
| 1 材料与方法 | 第49-51页 |
| ·试验材料 | 第49-51页 |
| ·方法 | 第51页 |
| ·培养条件 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-55页 |
| ·56份橄榄种质资源的成熟胚萌发 | 第51-53页 |
| ·长期保存的橄榄种质资源生长情况 | 第53-55页 |
| 3 讨论 | 第55-56页 |
| ·成熟胚作为橄榄离体种质保存启动材料的探讨 | 第55页 |
| ·不同基因型种质资源试管苗的保存 | 第55页 |
| ·橄榄离体种质保存的现实意义 | 第55-56页 |
| 第四章 橄榄试管苗 PPO 和 Cab 基因克隆及生物信息学分析 | 第56-98页 |
| 第一节 橄榄试管苗 PPO 基因克隆及生物信息学分析 | 第56-81页 |
| 1 材料与方法 | 第56-61页 |
| ·材料 | 第56-57页 |
| ·供试材料 | 第56页 |
| ·供试菌种 | 第56页 |
| ·仪器和试剂 | 第56-57页 |
| ·方法 | 第57-61页 |
| ·橄榄试管苗总 RNA 和DNA的提取方法 | 第57页 |
| ·橄榄试管苗PPO基因cDNA保守区第一次的克隆 | 第57-58页 |
| ·橄榄试管苗PPO基因第二次保守区扩增 | 第58页 |
| ·橄榄试管苗 PPO 基因 cDNA 的 3′RACE | 第58-59页 |
| ·橄榄试管苗PPO基因的cDNA的5′RACE扩增 | 第59-60页 |
| ·序列拼接 | 第60页 |
| ·橄榄试管苗PPO基因cDNA开放阅读框(ORF)克隆 | 第60页 |
| ·全长基因序列分析 | 第60页 |
| ·橄榄试管苗PPO2基因的生物信息学分析 | 第60-61页 |
| ·橄榄试管苗PPO2基因DNA的克隆 | 第61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-80页 |
| ·橄榄试管苗总 RNA 和叶片基因组DNA的提取纯度及含量检测 | 第61-62页 |
| ·橄榄试管苗PPO第一次cDNA保守区的克隆 | 第62-63页 |
| ·橄榄试管苗PPO第二次cDNA保守区的克隆 | 第63-64页 |
| ·橄榄试管苗PPO基因的cDNA的 3′RACE 克隆结果 | 第64-65页 |
| ·橄榄试管苗PPO基因的cDNA的 5′RACE 克隆结果 | 第65-67页 |
| ·橄榄试管苗PPO基因全长序列拼接结果 | 第67-68页 |
| ·橄榄试管苗PPO2基因cDNA开放阅读框(ORF)的克隆 | 第68-70页 |
| ·橄榄试管苗PPO2基因序列分析 | 第70-71页 |
| ·橄榄试管苗PPO2基因的生物信息学分析 | 第71-80页 |
| ·PPO2蛋白理化性质的分析 | 第71-72页 |
| ·PPO2保守结构域预测及同源蛋白家族比较 | 第72-73页 |
| ·橄榄PPO2蛋白质信号肽的预测和分析 | 第73-74页 |
| ·橄榄PPO2蛋白的跨膜结构预测及分析 | 第74-75页 |
| ·橄榄PPO2蛋白亚细胞定位预测与分析 | 第75-76页 |
| ·橄榄PPO2蛋白磷酸化位点预测 | 第76页 |
| ·橄榄PPO2蛋白质的功能基序分析 | 第76-77页 |
| ·橄榄PPO2蛋白卷曲螺旋预测 | 第77-78页 |
| ·橄榄PPO2蛋白进二级结构预测及分析 | 第78页 |
| ·橄榄PPO2蛋白质三维结构预测 | 第78-79页 |
| ·橄榄PPO2系统进化树 | 第79-80页 |
| ·橄榄试管苗基因组 DNAPPO2基因全长的 PCR 扩增结果 | 第80页 |
| 3. 讨论 | 第80-81页 |
| ·克隆橄榄试管苗PPO基因的难点分析 | 第80页 |
| ·橄榄试管苗PPO基因通过磷酸化方式调节氧化作用 | 第80-81页 |
| ·橄榄PPO基因的特性及其功能域分析 | 第81页 |
| 第二节 橄榄试管苗Cab基因克隆及生物信息学分析 | 第81-98页 |
| 1 材料与方法 | 第81-83页 |
| ·材料 | 第81-82页 |
| ·方法 | 第82-83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-97页 |
| ·橄榄试管苗Cab基因cDNA的 3′RACE 克隆结果 | 第83-84页 |
| ·橄榄试管苗Cab基因cDNA的 ORF 克隆结果 | 第84-85页 |
| ·橄榄试管苗Cab的cDNA全长的拼接序列 | 第85-86页 |
| ·橄榄试管苗Cab基因序列分析 | 第86-88页 |
| ·橄榄试管苗Cab基因的生物信息学分析 | 第88-96页 |
| ·Cab蛋白理化性质的分析 | 第88-89页 |
| ·Cab保守功能域预测及同源蛋白家族比较 | 第89-90页 |
| ·橄榄试管苗Cab蛋白信号肽预测 | 第90-91页 |
| ·橄榄试管苗Cab蛋白质跨膜区结构预测 | 第91-92页 |
| ·橄榄试管苗Cab蛋白亚细胞定位预测与分析 | 第92-93页 |
| ·橄榄试管苗Cab蛋白磷酸化位点预测 | 第93页 |
| ·橄榄Cab蛋白质的功能基序(motif)分析 | 第93页 |
| ·橄榄Cab蛋白质卷曲螺旋预测 | 第93-94页 |
| ·橄榄试管苗Cab蛋白二级结构预测 | 第94-95页 |
| ·橄榄试管苗Cab蛋白质三维结构预测 | 第95页 |
| 2. 5.11 橄榄Cab系统进化树 | 第95-96页 |
| ·橄榄试管苗基因组 DNA 的Cab基因克隆 | 第96-97页 |
| 3 讨论 | 第97-98页 |
| ·橄榄Cab基因cDNA全长和 DNA 全长的获得 | 第97页 |
| ·橄榄Cab基因的功能 | 第97-98页 |
| 第五章 橄榄试管苗保存过程中 PPO2 和Cab基因的荧光定量 PCR 表达分析 | 第98-110页 |
| 第一节 橄榄试管苗保存过程中基因 PPO2 荧光定量表达分析 | 第98-105页 |
| 1 材料与方法 | 第98-100页 |
| ·供试材料 | 第98页 |
| ·试剂和仪器 | 第98页 |
| ·方法 | 第98-100页 |
| 2 结果与分析 | 第100-105页 |
| ·橄榄试管苗不同保存阶段下培养物总RNA提取 | 第100-101页 |
| ·荧光实时 PCR 扩增参照基因和PPO2基因的参数分析 | 第101-104页 |
| ·橄榄试管苗保存过程中PPO2基因的相对定量表达分析 | 第104-105页 |
| 3 讨论 | 第105页 |
| ·PPO基因与幼嫩组织的启动分化有关 | 第105页 |
| ·橄榄试管苗离体保存过程相关基因PPO的作用 | 第105页 |
| 第二节 橄榄试管苗保存过程中基因 Cab 荧光定量表达分析 | 第105-110页 |
| 1 材料与方法 | 第106-107页 |
| ·材料 | 第106页 |
| ·试剂和仪器 | 第106页 |
| ·方法 | 第106-107页 |
| 2 结果与分析 | 第107-108页 |
| ·荧光实时 PCR 扩增 Cab 基因的参数分析 | 第107-108页 |
| ·橄榄试管苗保存过程中 Cab 基因相对定量表达分析 | 第108页 |
| 3 讨论 | 第108-110页 |
| ·Cab 基因在橄榄试管苗保存过程中的表达 | 第108-109页 |
| ·Cab、PPO 与植物光合作用的关系 | 第109-110页 |
| 第六章 橄榄试管苗保存过程中PPO酶活性变化 | 第110-113页 |
| 1 材料和方法 | 第110页 |
| ·材料 | 第110页 |
| ·方法 | 第110页 |
| 2 结果与分析 | 第110-111页 |
| ·不同保存阶段下PPO活性的变化 | 第110-111页 |
| ·不同橄榄品系的PPO活性差异比较 | 第111页 |
| 3 讨论 | 第111-113页 |
| ·橄榄试管苗离体保存过程PPO酶活性总体呈上升趋势 | 第111-112页 |
| ·橄榄试管苗离体保存过程PPO转录水平和酶活变化比较分析 | 第112-113页 |
| 第七章 小结 | 第113-117页 |
| 1 橄榄离体培养 | 第113页 |
| ·橄榄花药愈伤组织的诱导 | 第113页 |
| ·橄榄幼胚培养与试管苗获得 | 第113页 |
| ·橄榄成熟胚培养与试管苗获得 | 第113页 |
| 2 橄榄试管苗离体种质保存研究 | 第113-114页 |
| 3 橄榄试管苗保存过程中PPO基因的克隆及荧光定量 PCR 表达分析 | 第114-115页 |
| 4 橄榄试管苗Cab基因的克隆及荧光定量PCR表达分析 | 第115页 |
| 5 橄榄试管苗保存过程中 PPO 酶活性变化 | 第115-117页 |
| 参考文献 | 第117-124页 |
| 附录 | 第124-143页 |
| 附录1 图版及图版说明 | 第124-138页 |
| 附录2 橄榄试管苗 PPO 基因（cDNA）序列登陆GenBank信息 | 第138-141页 |
| 附录3 橄榄试管苗 Cab 基因（cDNA）序列登陆GenBank信息 | 第141-143页 |
| 致谢 | 第143页 |
