摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一章:文献综述 | 第12-24页 |
1.小菜蛾 | 第12-13页 |
·形态特征 | 第12页 |
·危害特点 | 第12页 |
·防治策略 | 第12-13页 |
·农业防治 | 第12页 |
·物理及生物防治 | 第12页 |
·药剂防治 | 第12-13页 |
2.昆虫的抗药性研究 | 第13-15页 |
·昆虫的抗药性机理 | 第13-14页 |
·行为抗性 | 第13页 |
·生理抗性 | 第13-14页 |
·表皮抗性 | 第13页 |
·靶标抗性 | 第13-14页 |
·生化抗性 | 第14页 |
·昆虫的抗药性遗传 | 第14-15页 |
·抗药性形式遗传 | 第14页 |
·抗药性分子遗传 | 第14-15页 |
·抗药性种群遗传 | 第15页 |
3.昆虫乙酰胆碱酯酶研究概况 | 第15-23页 |
·昆虫 AChE 基因的结构及类型 | 第16-18页 |
·昆虫 ace 的结构 | 第16-17页 |
·昆虫 ace 的类型 | 第17-18页 |
·昆虫 AChE 结构 | 第18-19页 |
·AChE 的分子类型 | 第18页 |
·AChE 的功能位点 | 第18-19页 |
·催化三联体 | 第18页 |
·胆碱结合位点 | 第18-19页 |
·酰基口袋 | 第19页 |
·氧阴离子洞 | 第19页 |
·外周阴离子位点 | 第19页 |
·AChE 的生物学功能及应用 | 第19-22页 |
·AChE 的催化功能 | 第19-20页 |
·AChE 的非催化功能 | 第20-21页 |
·细胞粘附作用 | 第20页 |
·促进轴突生长 | 第20页 |
·促进血小板和造血祖细胞的生成 | 第20页 |
·活化多巴胺能神经元 | 第20页 |
·与突触发生有关 | 第20-21页 |
·促进淀粉样蛋白聚集 | 第21页 |
·在细胞凋亡中的作用 | 第21页 |
·AChE 的应用 | 第21-22页 |
·AChE 在农残检测中的应用 | 第21页 |
·AChE 在医学中的应用 | 第21-22页 |
·乙酰胆碱酯酶基因突变与昆虫抗药性研究 | 第22-23页 |
4.本课题的研究意义 | 第23-24页 |
第二章:抗性与敏感小菜蛾 ace 基因克隆及序列分析 | 第24-43页 |
1.材料与方法 | 第24-32页 |
·实验材料 | 第24-26页 |
·供试昆虫 | 第24页 |
·主要仪器 | 第24-25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·试剂及培养基配制 | 第25-26页 |
·抗性与敏感小菜蛾 ace 基因中间片段克隆 | 第26-30页 |
·引物设计 | 第26页 |
·抗性与敏感小菜蛾总 RNA 提取 | 第26-27页 |
·逆转录合成 cDNA 第一链 | 第27-28页 |
·PCR 体系及程序 | 第28页 |
·PCR 产物纯化 | 第28-29页 |
·大肠杆菌感受态的制备 | 第29页 |
·克隆片段的连接 | 第29页 |
·转化、筛选及测序 | 第29-30页 |
·抗性与敏感小菜蛾 ace 基因 3’RACE 和 5’RACE | 第30-32页 |
·设计 RACE 引物 | 第30页 |
·3’和 5’RACE-Ready cDNA 第一链合成 | 第30-31页 |
·巢式 PCR 体系及程序 | 第31-32页 |
·序列拼接和分析 | 第32页 |
2 结果与分析 | 第32-41页 |
·抗性与敏感小菜蛾 ace 基因克隆与核苷酸序列分析 | 第32-34页 |
·抗敏品系小菜蛾 ace 基因克隆 | 第32-34页 |
·小菜蛾 ace 基因核苷酸序列分析 | 第34页 |
·小菜蛾 ace 基因拟表达多肽链同源性分析 | 第34-36页 |
·抗、敏品系小菜蛾 ace-1 蛋白多肽链比对 | 第36-37页 |
·抗、感品系小菜蛾 ace-1 基本性质 | 第37页 |
·小菜蛾 ace-1 蛋白质信号肽预测 | 第37-38页 |
·小菜蛾 ace-1 蛋白质二级结构分析 | 第38-39页 |
·小菜蛾 ace-1 蛋白质三级结构分析 | 第39-41页 |
3 小结与讨论 | 第41-43页 |
第三章:抗性小菜蛾脱离选择性压力后基因频率变化分析 | 第43-49页 |
1.材料与方法 | 第43-46页 |
·实验材料 | 第43-44页 |
·供试昆虫 | 第43页 |
·主要仪器 | 第43页 |
·主要试剂及配置 | 第43-44页 |
·基因频率检测 | 第44-46页 |
·Bi-PASA 引物和测序引物设计 | 第44页 |
·小菜蛾 DNA 提取 | 第44-45页 |
·Bi-PASA 原理检测基因频率 | 第45-46页 |
2 结果与分析 | 第46-47页 |
bi-PASA 分子检测结果及分析 | 第46-47页 |
3 小结与讨论 | 第47-49页 |
第四章 抗性和敏感小菜蛾 AChE 对杀虫剂敏感性研究 | 第49-53页 |
1.实验材料和实验方法 | 第49-50页 |
·实验材料 | 第49页 |
·供试试剂 | 第49页 |
·主要仪器 | 第49页 |
·试剂配制 | 第49-50页 |
·抗性和敏感小菜蛾对杀虫剂的敏感性 | 第50页 |
·抗性和敏感小菜蛾 AChE 对杀虫剂的敏感性 | 第50页 |
2 结果分析 | 第50-51页 |
·杀虫剂对抗性和敏感小菜蛾的影响 | 第51页 |
·杀虫剂对抗性和敏感小菜蛾 AChE 活性的影响 | 第51页 |
3 小结与讨论 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
附录 | 第59-61页 |
致谢 | 第61页 |