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柠檬酸对粘质沙雷氏菌产过氧化氢酶的影响及其机理

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-16页
   ·过氧化氢酶第8-10页
     ·过氧化氢酶的催化反应第8页
     ·过氧化氢酶的分类第8页
     ·过氧化氢酶的应用第8-10页
   ·过氧化氢酶的研究进展第10-11页
   ·活性氧第11-12页
     ·活性氧的种类和危害第11-12页
     ·活性氧的积极意义第12页
     ·活性氧与过氧化氢酶的关系第12页
   ·生物体内的抗氧化剂第12-14页
     ·抗氧化剂的种类第12-13页
     ·抗氧化剂的功能第13-14页
     ·抗氧化酶之间的联系第14页
   ·立题依据第14-15页
     ·研究过氧化氢酶产酶机理的意义第14页
     ·粘质沙雷氏菌的过氧化氢酶基因克隆的意义第14-15页
   ·研究目的与内容第15-16页
     ·研究目的第15页
     ·主要研究内容第15-16页
第二章 材料与方法第16-20页
   ·实验材料第16页
     ·菌种第16页
     ·试剂第16页
     ·主要仪器第16页
     ·培养基第16页
   ·实验方法第16-20页
     ·培养方法第16-17页
     ·过氧化氢酶活力测定第17页
     ·菌体量测定第17页
     ·蛋白含量测定第17页
     ·细胞内抗氧化系统分析第17页
     ·培养基中柠檬酸和葡萄糖含量测定第17-18页
     ·糖代谢途径中限速酶的测定第18页
     ·代谢过程中其他酶的测定第18页
     ·引物设计第18页
     ·粘质沙雷氏菌基因组DNA 的提取第18页
     ·PCR 扩增过氧化氢酶基因第18-19页
     ·PCR 产物的回收纯化、与载体连接第19页
     ·感受态细胞的制备、重组质粒的转化及筛选第19页
     ·重组质粒的提取鉴定第19页
     ·过氧化氢酶基因序列分析第19页
     ·基因表达及重组蛋白检测第19页
     ·数据分析第19-20页
第三章 结果与讨论第20-36页
   ·柠檬酸添加量对S. marcescens SYBCT02 产过氧化氢酶的影响第20页
   ·等摩尔碳含量培养基中S. marcescens SYBCT02 产过氧化氢酶情况第20-21页
   ·柠檬酸对其它粘质沙雷氏菌产过氧化氢酶的影响第21页
   ·S. marcescens SYBCT02 胞内与氧化胁迫相关物质第21-23页
     ·胞内氧化胁迫及抗氧化相关物质第22页
     ·胞内抗氧化酶活性第22-23页
   ·柠檬酸促进S. marcescens SYBCT02 合成CAT 的机理初步验证第23-24页
   ·S. marcescens SYBCT02 对柠檬酸和葡萄糖的利用第24-26页
   ·S. marcescens SYBCT02 的产过氧化氢酶曲线第26-27页
   ·柠檬酸对 S. marcescens SYBCT02 的生长代谢过程的影响第27-32页
     ·柠檬酸对S. marcescens SYBCT02 糖酵解途径的影响第27-28页
     ·柠檬酸对S. marcescens SYBCT02 三羧酸循环途径的影响第28-29页
     ·柠檬酸对S. marcescens SYBCT02 戊糖磷酸途径的影响第29-30页
     ·柠檬酸对S. marcescens SYBCT02 代谢途径中其他酶的影响第30-32页
   ·S. marcescens SYBCT02 过氧化氢酶的基因克隆表达第32-34页
     ·粘质沙雷氏菌基因组DNA 的提取第32页
     ·过氧化氢酶基因扩增第32页
     ·重组质粒酶切鉴定第32-33页
     ·基因同源性分析第33-34页
     ·重组蛋白检测第34页
   ·柠檬酸和葡萄糖作为复合碳源对重组菌过氧化氢酶产量的影响第34-36页
主要结论与展望第36-38页
 主要结论第36页
 展望第36-38页
致谢第38-39页
参考文献第39-48页
附录1 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第48-49页
附录2 菌株Serratia marcescens SYBCT02 的CAT 基因序列第49页

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