摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-16页 |
·过氧化氢酶 | 第8-10页 |
·过氧化氢酶的催化反应 | 第8页 |
·过氧化氢酶的分类 | 第8页 |
·过氧化氢酶的应用 | 第8-10页 |
·过氧化氢酶的研究进展 | 第10-11页 |
·活性氧 | 第11-12页 |
·活性氧的种类和危害 | 第11-12页 |
·活性氧的积极意义 | 第12页 |
·活性氧与过氧化氢酶的关系 | 第12页 |
·生物体内的抗氧化剂 | 第12-14页 |
·抗氧化剂的种类 | 第12-13页 |
·抗氧化剂的功能 | 第13-14页 |
·抗氧化酶之间的联系 | 第14页 |
·立题依据 | 第14-15页 |
·研究过氧化氢酶产酶机理的意义 | 第14页 |
·粘质沙雷氏菌的过氧化氢酶基因克隆的意义 | 第14-15页 |
·研究目的与内容 | 第15-16页 |
·研究目的 | 第15页 |
·主要研究内容 | 第15-16页 |
第二章 材料与方法 | 第16-20页 |
·实验材料 | 第16页 |
·菌种 | 第16页 |
·试剂 | 第16页 |
·主要仪器 | 第16页 |
·培养基 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-20页 |
·培养方法 | 第16-17页 |
·过氧化氢酶活力测定 | 第17页 |
·菌体量测定 | 第17页 |
·蛋白含量测定 | 第17页 |
·细胞内抗氧化系统分析 | 第17页 |
·培养基中柠檬酸和葡萄糖含量测定 | 第17-18页 |
·糖代谢途径中限速酶的测定 | 第18页 |
·代谢过程中其他酶的测定 | 第18页 |
·引物设计 | 第18页 |
·粘质沙雷氏菌基因组DNA 的提取 | 第18页 |
·PCR 扩增过氧化氢酶基因 | 第18-19页 |
·PCR 产物的回收纯化、与载体连接 | 第19页 |
·感受态细胞的制备、重组质粒的转化及筛选 | 第19页 |
·重组质粒的提取鉴定 | 第19页 |
·过氧化氢酶基因序列分析 | 第19页 |
·基因表达及重组蛋白检测 | 第19页 |
·数据分析 | 第19-20页 |
第三章 结果与讨论 | 第20-36页 |
·柠檬酸添加量对S. marcescens SYBCT02 产过氧化氢酶的影响 | 第20页 |
·等摩尔碳含量培养基中S. marcescens SYBCT02 产过氧化氢酶情况 | 第20-21页 |
·柠檬酸对其它粘质沙雷氏菌产过氧化氢酶的影响 | 第21页 |
·S. marcescens SYBCT02 胞内与氧化胁迫相关物质 | 第21-23页 |
·胞内氧化胁迫及抗氧化相关物质 | 第22页 |
·胞内抗氧化酶活性 | 第22-23页 |
·柠檬酸促进S. marcescens SYBCT02 合成CAT 的机理初步验证 | 第23-24页 |
·S. marcescens SYBCT02 对柠檬酸和葡萄糖的利用 | 第24-26页 |
·S. marcescens SYBCT02 的产过氧化氢酶曲线 | 第26-27页 |
·柠檬酸对 S. marcescens SYBCT02 的生长代谢过程的影响 | 第27-32页 |
·柠檬酸对S. marcescens SYBCT02 糖酵解途径的影响 | 第27-28页 |
·柠檬酸对S. marcescens SYBCT02 三羧酸循环途径的影响 | 第28-29页 |
·柠檬酸对S. marcescens SYBCT02 戊糖磷酸途径的影响 | 第29-30页 |
·柠檬酸对S. marcescens SYBCT02 代谢途径中其他酶的影响 | 第30-32页 |
·S. marcescens SYBCT02 过氧化氢酶的基因克隆表达 | 第32-34页 |
·粘质沙雷氏菌基因组DNA 的提取 | 第32页 |
·过氧化氢酶基因扩增 | 第32页 |
·重组质粒酶切鉴定 | 第32-33页 |
·基因同源性分析 | 第33-34页 |
·重组蛋白检测 | 第34页 |
·柠檬酸和葡萄糖作为复合碳源对重组菌过氧化氢酶产量的影响 | 第34-36页 |
主要结论与展望 | 第36-38页 |
主要结论 | 第36页 |
展望 | 第36-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-48页 |
附录1 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第48-49页 |
附录2 菌株Serratia marcescens SYBCT02 的CAT 基因序列 | 第49页 |