摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
目录 | 第5-7页 |
缩略表 | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第8-14页 |
·炭疽芽胞杆菌生物学特性 | 第8页 |
·炭疽芽胞杆菌的致病性和发病机理 | 第8-10页 |
·炭疽芽胞杆菌S-layer 蛋白的研究 | 第10-11页 |
·炭疽芽胞杆菌疫苗的研究现状 | 第11-13页 |
·研究的目的、意义和研究内容 | 第13-14页 |
第二章 材料和方法 | 第14-26页 |
·菌株、质粒、实验动物 | 第14页 |
·实验所用仪器设备以及主要试剂 | 第14-15页 |
·实验所用主要仪器 | 第14页 |
·实验所用主要试剂 | 第14-15页 |
·培养基及相关试剂配制 | 第15-17页 |
·培养基及抗生素的浓度 | 第15页 |
·DNA 琼脂糖凝胶电泳的配制 | 第15页 |
·SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳相关试剂的配制 | 第15-16页 |
·Western blot 所用相关试剂配制 | 第16页 |
·Ni~(2+) 柱纯化所用相关试剂配制 | 第16页 |
·ELISA 所用相关试剂配制 | 第16-17页 |
·免疫荧光所用相关试剂配制 | 第17页 |
·炭疽杆菌重要免疫原性蛋白的分子克隆 | 第17-21页 |
·引物设计、合成 | 第17页 |
·PCR 反应扩增目的基因片段 | 第17-18页 |
·质粒提取 | 第18-19页 |
·酶切反应和切胶回收 | 第19-20页 |
·同源重组连接片段和质粒 | 第20页 |
·化学转化 | 第20页 |
·PCR 验证和酶切验证转化质粒 | 第20-21页 |
·测序和DNA 序列分析 | 第21页 |
·炭疽杆菌重要免疫原性蛋白的诱导表达 | 第21页 |
·Western blot 验证炭疽杆菌重要免疫原性蛋白的表达 | 第21-22页 |
·炭疽杆菌重要免疫原性蛋白的纯化 | 第22页 |
·炭疽杆菌重要免疫原性蛋白多克隆抗体的制备 | 第22页 |
·间接ELISA 法测量小鼠血清效价 | 第22-23页 |
·炭疽杆菌重要免疫原性蛋白的免疫原性的验证 | 第23页 |
·炭疽杆菌重要免疫原性蛋白BA3338 的免疫荧光实验 | 第23页 |
·炭疽杆菌重要免疫原性蛋白BA3338 的流式细胞实验 | 第23-26页 |
第三章 结果与讨论 | 第26-38页 |
·炭疽杆菌15 个重要免疫原性蛋白基因片段的琼脂糖回收结果 | 第26页 |
·质粒提取和酶切回收结果 | 第26-27页 |
·转化的单菌落菌落PCR 初筛 | 第27-29页 |
·提取质粒PCR 验证和质粒酶切验证结果 | 第29-31页 |
·DNA 测序结果 | 第31页 |
·炭疽杆菌15 个重要免疫原性蛋白的诱导表达结果以及Western blot 验证 | 第31-33页 |
·炭疽杆菌15 个重要免疫原性蛋白的纯化结果 | 第33页 |
·炭疽杆菌15 个重要免疫原性蛋白多克隆抗体的制备结果 | 第33-34页 |
·炭疽杆菌15 个重要免疫原性蛋白的免疫原性的验证结果 | 第34-35页 |
·炭疽杆菌重要免疫原性蛋白BA3338 的免疫荧光实验结果 | 第35页 |
·炭疽杆菌重要免疫原性蛋白BA3338 的流式细胞实验结果 | 第35-38页 |
主要结论与展望 | 第38-40页 |
主要结论 | 第38-39页 |
1 炭疽杆菌重要免疫原性蛋白基因原核表达载体的构建 | 第38页 |
2 炭疽杆菌重要免疫原性蛋白的诱导表达和纯化 | 第38页 |
3 炭疽杆菌重要免疫原性蛋白多克隆抗体的制备 | 第38页 |
4 炭疽杆菌重要免疫原性蛋白的免疫原性的验证 | 第38-39页 |
5 炭疽杆菌重要免疫原性蛋白BA3338 的细胞定位 | 第39页 |
展望 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
附录1:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第45-46页 |
附录2:PCR 扩增中所使用引物 | 第46页 |