| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第1章 综述 前体m RNA 剪切的研究背景 | 第12-39页 |
| ·引言 | 第12-15页 |
| ·前体mRNA 加工与剪切体大分子机器 | 第15-25页 |
| ·前体mRNA 的3 个加工过程 | 第16-19页 |
| ·剪切体(Spliceosome)：细胞内最复杂的大分子机器 | 第19-25页 |
| ·前体mRNA 的剪切与转录之间的偶联 | 第25-30页 |
| ·共转录前体mRNA 加工剪切的必要性 | 第25-27页 |
| ·前体mRNA 剪切：与转录的时间竞赛？ | 第27-28页 |
| ·RNAP II CTD 在转录和前体mRNA 剪切偶联中的作用 | 第28-30页 |
| ·总结 | 第30-32页 |
| 参考文献 | 第32-39页 |
| 第2章 人剪切体蛋白FBP21 双WW 结构域的结构研究 | 第39-83页 |
| ·剪切体蛋白FBP21 及其WW 结构域的介绍 | 第39-44页 |
| ·剪切体蛋白FBP21 的背景介绍 | 第39-42页 |
| ·WW 结构域的简要概述 | 第42-44页 |
| ·实验材料和方法 | 第44-59页 |
| ·目的基因的获得 | 第44-45页 |
| ·表达质粒的构建 | 第45页 |
| ·突变体表达质粒的构建 | 第45-47页 |
| ·目的蛋白的表达纯化 | 第47-48页 |
| ·目的蛋白的稳定性测定 | 第48页 |
| ·小肽的合成与纯化 | 第48页 |
| ·等温滴定量热实验(ITC) | 第48-49页 |
| ·NMR 波谱解析人剪切体蛋白FBP21 WW1-2 的三维溶液结构 | 第49-58页 |
| ·化学位移扰动实验 | 第58-59页 |
| ·主链弛豫实验 | 第59页 |
| ·~1DNH 残留欧极耦合常数（RDCs）的测定 | 第59页 |
| ·实验结果和讨论 | 第59-76页 |
| ·FBP21 WW1-2/ pET226(+) 重组质粒的构建 | 第59-60页 |
| ·FBP21 双WW 结构域蛋白的表达和纯化 | 第60-62页 |
| ·FBP21 双WW 结构域蛋白的CD 光谱分析 | 第62页 |
| ·NMR 波谱解析人FBP21 WW1-2 蛋白质的三维溶液结构 | 第62-70页 |
| ·FBP21 双 WW 结构域与脯氨酸多肽的相互作用 | 第70-76页 |
| ·总结 | 第76-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 第3章 人剪切体蛋白 FBP21 的生物学功能研究 | 第83-126页 |
| ·剪切体蛋白FBP21 的功能研究背景 | 第83-95页 |
| ·酵母剪切因子Prp40 在剪切体装配中的功能 | 第84-87页 |
| ·剪切因子SF1/BBP 在剪切体装配中的功能 | 第87-91页 |
| ·剪切体核心蛋白SmB/B’和U1511RNP 特异性蛋白U1C | 第91-95页 |
| ·实验材料和方法 | 第95-103页 |
| ·重组质粒的构建 | 第95页 |
| ·抗体及其来源 | 第95页 |
| ·FBP21-His 和 GST-SIPP1 蛋白的表达纯化 | 第95-96页 |
| ·质粒DNA 的中量制备 | 第96-97页 |
| ·GST pull-down 实验 | 第97页 |
| ·Western blot 实验 | 第97-98页 |
| ·细胞的培养和DNA 转染 | 第98页 |
| ·免疫共沉淀实验 | 第98-99页 |
| ·FBP21 的in vivo 前体mRNA 剪切实验 | 第99-101页 |
| ·反转录PCR (RT-PCR) | 第101页 |
| ·FBP21 的in vitro 前体mRNA 剪切实验 | 第101-102页 |
| ·免疫荧光定位和激光共聚焦实验 | 第102-103页 |
| ·实验结果和讨论 | 第103-121页 |
| ·FBP21 和SIPP1 的重组质粒 | 第103-104页 |
| ·FBP21 和SIPP1 重组蛋白的表达和纯化 | 第104-105页 |
| ·FBP21 和SIPP1 的in vitro 相互作用 | 第105-106页 |
| ·FBP21 和SIPP1 的in vivo 相互作用 | 第106-109页 |
| ·FBP21 在细胞内的定位 | 第109-113页 |
| ·FBP21 及其双WW 结构域在前体mRNA 剪切中的功能 | 第113-121页 |
| ·总结 | 第121-123页 |
| 参考文献 | 第123-126页 |
| 英文缩写词表 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127-129页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的研究成果 | 第129-131页 |
