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拟南芥FHY3不同结构域在调节光敏色素A信号传导中的功能研究

致谢第1-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10-12页
缩写第12-14页
目次第14-17页
1 引言第17-44页
   ·植物光敏色素的研究进展第17-22页
     ·光敏色素分子基因第17-18页
     ·光敏色素分子特征第18-21页
     ·光敏色素的类型第21-22页
     ·光敏色素的反应方式第22页
   ·植物光敏色素信号传导的研究进展第22-29页
     ·光敏色素的核定位第25页
     ·光信号转导的核内调节因子第25-29页
       ·PIFs第25-27页
       ·HY5第27-28页
       ·COP1/SPA第28-29页
   ·植物光敏色素的生理功能第29-32页
     ·光敏色素在植物个体发育中的作用第29-30页
     ·光敏色素与光周期第30页
     ·光敏色素与昼夜节律钟第30-31页
     ·光敏色素与植物激素第31-32页
   ·PhyA信号传导作用因子FHY3/FAR1的研究进展第32-40页
   ·本论文的立题依据及研究内容第40-44页
     ·立题依据第40-42页
     ·研究内容第42-44页
2 FHY3和FAR1在phyA的信号传导中的部分重叠功能第44-58页
   ·引言第44页
   ·材料第44-46页
     ·植物品种第44-45页
     ·菌株第45页
       ·大肠杆菌(Escherichia coli)第45页
       ·农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)第45页
     ·质粒载体第45页
     ·试剂盒及酶第45-46页
     ·其他各类化合物第46页
   ·方法第46-53页
     ·载体构建第46-48页
       ·载体构建方法第46-47页
       ·载体具体构建步骤第47-48页
     ·大肠杆菌转化第48页
       ·感受态细胞制备第48页
       ·转化第48页
     ·农杆菌的转化第48-49页
       ·感受态细胞制备第48页
       ·转化第48-49页
     ·拟南芥基因组DNA提取第49页
     ·拟南芥总RNA的提取第49页
       ·普通方法第49页
       ·试剂盒方法第49页
     ·PCR反应第49-51页
       ·PCR反应体系第49-51页
       ·PCR反应条件第51页
       ·PCR引物序列第51页
     ·RT-PCR检测第51页
     ·Real-Time PCR检测第51-52页
     ·拟南芥种植第52页
       ·拟南芥无菌培养第52页
       ·拟南芥土壤种植第52页
     ·拟南芥转化第52-53页
   ·实验结果第53-58页
     ·FHY3和FAR1的表达特征第53-55页
     ·FHY3和FAR1在phyA的信号传导中的部分重叠作用第55-58页
3 FHY3不同结构域的功能研究第58-92页
   ·引言第58-59页
   ·材料第59-60页
     ·植物品种第59页
     ·菌株第59-60页
       ·大肠杆菌第59页
       ·农杆菌第59页
       ·酵母菌(Yeast)第59-60页
     ·质粒载体第60页
     ·试剂盒及酶第60页
     ·其他各类化合物第60页
   ·方法第60-71页
     ·载体构建第60-64页
       ·载体构建方法第60-61页
       ·载体具体构建步骤第61-64页
     ·点突变第64-65页
     ·大肠杆菌转化第65页
     ·农杆菌转化第65页
     ·酵母杂交第65-66页
       ·酵母单杂交第65-66页
       ·酵母双杂交第66页
       ·β-半乳糖苷酶(β-galactocidase)的测定第66页
     ·拟南芥基因组DNA提取第66-67页
     ·拟南芥总RNA的提取第67页
     ·PCR反应第67页
     ·RT-PCR检测第67页
     ·酵母蛋白质的提取第67页
     ·免疫印迹实验(Immunoblot assay)第67-68页
     ·电泳迁移率检测(Electrophoretic Mobility Shift Assay,EMSA)第68-69页
     ·拟南芥原生质体转化第69-70页
       ·质粒DNA的提取第69页
       ·拟南芥原生质体的分离第69页
       ·PEG转化第69-70页
       ·LUC和GUS的测定第70页
     ·叶绿素和花青素的测定第70页
       ·叶绿素的测定第70页
       ·花青素的测定第70页
     ·Confocal显微镜观察第70-71页
     ·拟南芥种植第71页
     ·拟南芥转化第71页
   ·实验结果第71-92页
     ·FHY3氮末端C2H2型锌指结构域的DNA结合功能第71-78页
       ·酵母体系中FHY3的DNA结合活性验证第71-72页
       ·EMSA实验中FHY3的DNA结合活性验证第72-75页
       ·拟南芥转基因植株中FHY3的DNA结合活性验证第75-78页
     ·FHY3转座酶催化结构域和SWIM模体的转录激活活性第78-88页
       ·酵母体系中FHY3转录激活活性验证第78-80页
       ·拟南芥原生质体中FHY3转录激活活性验证第80-82页
       ·拟南芥转基因植株中FHY3转录激活活性验证第82-88页
     ·FHY3的转录激活活性与其二聚体形成第88-90页
     ·FHY3的细胞核定位第90-92页
4 讨论第92-96页
   ·FHY3和FAR1的部分重叠功能第92-93页
   ·FHY3不同结构域的功能分析第93-96页
5 结论与展望第96-99页
参考文献第99-117页
附录1 各类化合物第117-121页
附录2 PCR引物第121-123页
附录3 氨基酸及碱基第123-125页
作者简历第125页
攻读博士学位期间发表论文第125页

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