| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 植物抗病机制 | 第11-15页 |
| ·植物的抗病性的类型 | 第11页 |
| ·植物的抗病机制 | 第11-12页 |
| ·抗病基因(resistence gene,R基因)的类型及其编码的蛋白结构 | 第12-14页 |
| ·病原菌的无毒基因 | 第14-15页 |
| ·植物抗病基因与病原无毒基因的互作 | 第15页 |
| 2 拟南芥的抗病基因 | 第15-19页 |
| ·RLK基因家族 | 第16页 |
| ·NBS-LRR抗病基因家族 | 第16-18页 |
| ·本实验研究的抗病基因的研究进展 | 第18-19页 |
| 3 R基因的利用存在的问题及发展趋势 | 第19-20页 |
| 4 论文的立题依据,研究目的,研究内容及意义 | 第20-23页 |
| ·立题依据 | 第20-21页 |
| ·不同科植物的基因组的共线性关系 | 第20页 |
| ·拟南芥与茄科植物抗病信号通路中存在功能保守的基因 | 第20-21页 |
| ·开展本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| ·本实验的研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 拟南芥抗病基因转化烟草及其PCR验证 | 第23-38页 |
| 1 前言 | 第23页 |
| 2 材料 | 第23-25页 |
| ·菌株和载体 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24-25页 |
| ·植物培养基 | 第24页 |
| ·LB培养基 | 第24-25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| 3 方法 | 第25-30页 |
| ·用于转化的根癌农杆菌的准备 | 第25-26页 |
| ·农杆菌C58C1的感受态的制备 | 第25页 |
| ·电击转化农杆菌C58C1 | 第25-26页 |
| ·烟草遗传转化体系的建立 | 第26-27页 |
| ·烟草N.benthamiana无菌苗的获得 | 第26页 |
| ·卡那霉素临界值的确定 | 第26页 |
| ·菌株的活化 | 第26页 |
| ·材料预培养 | 第26页 |
| ·浸染 | 第26页 |
| ·共培养 | 第26-27页 |
| ·脱菌及选择培养 | 第27页 |
| ·生根培养 | 第27页 |
| ·组培苗的炼苗和移栽 | 第27页 |
| ·转基因烟草的PCR鉴定 | 第27-30页 |
| ·植物总DNA的提取 | 第27-28页 |
| ·转基因烟草中nptⅡ基因和目的基因的PCR检测 | 第28-30页 |
| 4 结果与分析 | 第30-36页 |
| ·卡那霉素临界值的筛选结果 | 第30-31页 |
| ·转基因烟草再生苗的获得 | 第31页 |
| ·烟草转化抗性植株的PCR检测结果 | 第31-36页 |
| ·转基因植株基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
| ·nptⅡ基因的检测结果 | 第32页 |
| ·目的基因CAMTA引物的扩增结果 | 第32-36页 |
| 5 讨论 | 第36-37页 |
| ·卡那霉素作用的原理 | 第36页 |
| ·菌液浓度和侵染时间对转化效率的影响 | 第36页 |
| ·预培养对烟草遗传转化的影响 | 第36-37页 |
| ·特异重组位点及特异信号序列的应用 | 第37页 |
| ·引物NPTⅡ可以用来快速鉴定筛选转基因植株 | 第37页 |
| 6 结论 | 第37-38页 |
| 第三章 转基因烟草的表达分析 | 第38-45页 |
| 1 前言 | 第38页 |
| 2 实验材料 | 第38-39页 |
| 3 实验方法 | 第39-41页 |
| ·烟草叶片总RNA的提取 | 第39-40页 |
| ·跨内含子引物的设计 | 第40-41页 |
| ·转基因烟草的RT-PCR检测 | 第41页 |
| 4 结果和分析 | 第41-43页 |
| ·提取RNA的质量检测 | 第41页 |
| ·转基因植株的RNA提取和转基因苗中R基因转录水平上表达的RT-PCR检测 | 第41-43页 |
| 5 讨论 | 第43-44页 |
| ·跨内含子引物的设计 | 第43页 |
| ·部分拟南芥抗病基因能在其远缘物种烟草中表达 | 第43-44页 |
| 6 结论 | 第44-45页 |
| 第四章 全文结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简历 | 第55页 |
