猪MyD88基因的克隆及其在大肠杆菌中的融合表达
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-11页 |
| 1.文献综述 | 第11-20页 |
| ·猪抗病育种及免疫抗病的一般机理 | 第11-12页 |
| ·天然免疫与获得性免疫 | 第12-13页 |
| ·MrD88基因及其研究进展 | 第13-19页 |
| ·MyD88基因的发现 | 第14页 |
| ·MyD88的结构和组织分布 | 第14-15页 |
| ·MyD88介导的信号传导途径 | 第15-17页 |
| ·MyD88的生物学功能 | 第17-19页 |
| ·实验的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2.材料与方法 | 第20-37页 |
| ·试验材料 | 第20-24页 |
| ·试验材料的采集 | 第20页 |
| ·载体与菌株 | 第20页 |
| ·生物信息学网络资源及应用软件 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·试验溶液的配制 | 第21-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-37页 |
| ·RNA的提取 | 第25页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR | 第26-27页 |
| ·MyD88基因cDNA的克隆 | 第27-31页 |
| ·测序与序列分析 | 第31-32页 |
| ·生物信息学分析 | 第32-33页 |
| ·原核重组表达质粒的构建 | 第33-35页 |
| ·MyD88在大肠杆菌中的诱导表达及表达产物分析 | 第35-36页 |
| ·重组融合蛋白的纯化 | 第36-37页 |
| 3.结果与分析 | 第37-51页 |
| ·长白猪肠系淋巴结组织总RNA的提取 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR扩增MYD88 | 第38页 |
| ·重组克隆质粒的构建和鉴定 | 第38-40页 |
| ·测序与序列分析 | 第40-42页 |
| ·生物信息学分析 | 第42-47页 |
| ·糖基化位点预测 | 第42-43页 |
| ·磷酸化位点预测 | 第43页 |
| ·跨膜区分析 | 第43-44页 |
| ·疏水性预测 | 第44页 |
| ·蛋白质二级结构预测 | 第44-45页 |
| ·蛋白质三级结构预测 | 第45-46页 |
| ·猪MyD88结构功能域分析 | 第46-47页 |
| ·猪MyD88同源性分析 | 第47页 |
| ·原核重组表达质粒的构建和鉴定 | 第47-48页 |
| ·MYD88在大肠杆菌中的诱导表达及产物分析 | 第48-50页 |
| ·MyD88的诱导表达 | 第48-49页 |
| ·MyD88诱导表达条件的优化 | 第49-50页 |
| ·表达产物的可溶性分析 | 第50页 |
| ·重组融合蛋白的纯化 | 第50-51页 |
| 4.讨论 | 第51-58页 |
| ·肠系淋巴结组织总RNA的提取 | 第51-52页 |
| ·克隆片段的设计 | 第52页 |
| ·克隆载体的选择 | 第52-53页 |
| ·MYD88基因的序列分析 | 第53页 |
| ·MYD88生物信息学预测 | 第53-54页 |
| ·表达宿主菌的选择 | 第54-55页 |
| ·载体的选择 | 第55-57页 |
| ·MYD88在大肠杆菌中的诱导表达及表达产物分析 | 第57页 |
| ·关于融合蛋白的可溶性分析 | 第57页 |
| ·重组融合蛋白的纯化 | 第57-58页 |
| 5.结论 | 第58-59页 |
| 6.参考文献 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
