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猪Dnmt2和Dnmt3b基因CDS克隆及DNA甲基转移酶基因家族在猪不同组织的差异表达

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
常用词语缩写第8-12页
1 文献综述第12-29页
   ·选题背景第12-13页
   ·DNA甲基化基本概念和作用机理第13-23页
     ·DNA甲基化基本概念第13-14页
     ·哺乳动物发育过程的重编程和DNA甲基化波动第14-16页
     ·DNA甲基化作用机理第16-18页
     ·DNA甲基化的作用第18-23页
   ·DNA甲基转移酶研究概述第23-28页
     ·Dnmt的分子结构第24-25页
     ·Dnmt1概述第25-26页
     ·Dnmt2概述第26-27页
     ·Dnmt3概述第27-28页
   ·本研究内容和意义第28-29页
2 材料与方法第29-43页
   ·技术路线第29-30页
   ·试验材料与仪器第30-32页
     ·试验材料第30页
     ·主要仪器第30页
     ·主要试剂第30-31页
     ·常用试剂配制第31-32页
   ·试验方法第32-43页
     ·总RNA的提取第32-33页
     ·总RNA质量的检测第33页
     ·Dnmt2 EST电子克隆和分析第33-34页
     ·Dnmt3b EST电子克隆和分析第34-35页
     ·DNA甲基转移酶家族基因定量PCR引物的设计与合成第35-36页
     ·逆转录反应第36页
     ·PCR扩增第36-37页
     ·3'RACE第37页
     ·标准曲线的建立第37-38页
     ·PCR扩增产物的胶回收第38-39页
     ·RT-PCR产物克隆第39-40页
     ·菌落筛选第40-41页
     ·测序第41页
     ·测序结果分析第41页
     ·Dnmt2和Dnmt3b基因序列的生物信息学分析第41-42页
     ·数据分析第42-43页
3.结果与分析第43-72页
   ·总RNA的抽提结果第43-44页
   ·EST电子克隆结果第44-45页
     ·Dnmt2EST电子克隆结果第44页
     ·Dnmt3bEST电子克隆结果第44-45页
   ·RT-PCR结果第45-47页
     ·Dnmt2 RT-PCR结果第45-46页
     ·Dnmt3b RT-PCR结果第46页
     ·荧光定量常规PCR反应的结果第46-47页
   ·生物信息学分析第47-67页
     ·Dnmt2生物学分析第47-56页
     ·Dnmt3b基因的生物学功能第56-67页
   ·荧光定量PCR结果与分析第67-72页
     ·PCR的标准曲线第67-68页
     ·猪Dnmt1基因的组织差异表达第68-69页
     ·猪Dnmt2基因的组织差异表达第69-70页
     ·猪Dnmt3a基因的组织差异表达第70-71页
     ·猪Dnmt3b因的组织差异表达第71-72页
4 讨论第72-76页
   ·电子克隆及引物设计第72-73页
   ·不同PCR技术的使用第73-74页
   ·载体的链接第74页
   ·Dnmt2生物学功能分析第74-75页
   ·Dnmt3b基因生物学功能分析第75页
   ·DNA甲基转移酶家族基因的组织表达差异第75-76页
5.结论第76-78页
参考文献第78-85页
致谢第85页

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