中文摘要 | 第1-6页 |
英文摘要 | 第6-8页 |
常用词语缩写 | 第8-12页 |
1 文献综述 | 第12-29页 |
·选题背景 | 第12-13页 |
·DNA甲基化基本概念和作用机理 | 第13-23页 |
·DNA甲基化基本概念 | 第13-14页 |
·哺乳动物发育过程的重编程和DNA甲基化波动 | 第14-16页 |
·DNA甲基化作用机理 | 第16-18页 |
·DNA甲基化的作用 | 第18-23页 |
·DNA甲基转移酶研究概述 | 第23-28页 |
·Dnmt的分子结构 | 第24-25页 |
·Dnmt1概述 | 第25-26页 |
·Dnmt2概述 | 第26-27页 |
·Dnmt3概述 | 第27-28页 |
·本研究内容和意义 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-43页 |
·技术路线 | 第29-30页 |
·试验材料与仪器 | 第30-32页 |
·试验材料 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30-31页 |
·常用试剂配制 | 第31-32页 |
·试验方法 | 第32-43页 |
·总RNA的提取 | 第32-33页 |
·总RNA质量的检测 | 第33页 |
·Dnmt2 EST电子克隆和分析 | 第33-34页 |
·Dnmt3b EST电子克隆和分析 | 第34-35页 |
·DNA甲基转移酶家族基因定量PCR引物的设计与合成 | 第35-36页 |
·逆转录反应 | 第36页 |
·PCR扩增 | 第36-37页 |
·3'RACE | 第37页 |
·标准曲线的建立 | 第37-38页 |
·PCR扩增产物的胶回收 | 第38-39页 |
·RT-PCR产物克隆 | 第39-40页 |
·菌落筛选 | 第40-41页 |
·测序 | 第41页 |
·测序结果分析 | 第41页 |
·Dnmt2和Dnmt3b基因序列的生物信息学分析 | 第41-42页 |
·数据分析 | 第42-43页 |
3.结果与分析 | 第43-72页 |
·总RNA的抽提结果 | 第43-44页 |
·EST电子克隆结果 | 第44-45页 |
·Dnmt2EST电子克隆结果 | 第44页 |
·Dnmt3bEST电子克隆结果 | 第44-45页 |
·RT-PCR结果 | 第45-47页 |
·Dnmt2 RT-PCR结果 | 第45-46页 |
·Dnmt3b RT-PCR结果 | 第46页 |
·荧光定量常规PCR反应的结果 | 第46-47页 |
·生物信息学分析 | 第47-67页 |
·Dnmt2生物学分析 | 第47-56页 |
·Dnmt3b基因的生物学功能 | 第56-67页 |
·荧光定量PCR结果与分析 | 第67-72页 |
·PCR的标准曲线 | 第67-68页 |
·猪Dnmt1基因的组织差异表达 | 第68-69页 |
·猪Dnmt2基因的组织差异表达 | 第69-70页 |
·猪Dnmt3a基因的组织差异表达 | 第70-71页 |
·猪Dnmt3b因的组织差异表达 | 第71-72页 |
4 讨论 | 第72-76页 |
·电子克隆及引物设计 | 第72-73页 |
·不同PCR技术的使用 | 第73-74页 |
·载体的链接 | 第74页 |
·Dnmt2生物学功能分析 | 第74-75页 |
·Dnmt3b基因生物学功能分析 | 第75页 |
·DNA甲基转移酶家族基因的组织表达差异 | 第75-76页 |
5.结论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-85页 |
致谢 | 第85页 |