| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-22页 |
| ·脯氨酸介绍 | 第9页 |
| ·色素依存性的His-tag L-脯氨酸脱氢酶 | 第9-13页 |
| ·碳纳米管 | 第13-14页 |
| ·碳纳米管生物感应器 | 第14-15页 |
| ·酶生物传感器 | 第15-20页 |
| ·吸附法 | 第16页 |
| ·包埋法 | 第16-18页 |
| ·交联法 | 第18-19页 |
| ·共价耦合法 | 第19-20页 |
| ·选题依据和意义 | 第20-21页 |
| ·创新之处 | 第21-22页 |
| 第二章 实验原料和仪器 | 第22-26页 |
| ·实验菌种 | 第22页 |
| ·化学试剂 | 第22-23页 |
| ·装置 | 第23-24页 |
| ·纯化材料 | 第24页 |
| ·菌体培养基 | 第24-25页 |
| ·溶液配制 | 第25-26页 |
| 第三章 His-tag L-脯氨酸脱氢酶的分离纯化 | 第26-42页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验方法 | 第26-31页 |
| ·质粒扩增 | 第26-27页 |
| ·形质转换 | 第27页 |
| ·大规模培养 | 第27页 |
| ·无细胞抽提液的制备 | 第27页 |
| ·His-tag L-脯氨酸脱氢酶的活性测定 | 第27-28页 |
| ·His-tag L-脯氨酸脱氢酶的蛋白质含量测定 | 第28-29页 |
| ·His-tag L-脯氨酸脱氢酶的热处理 | 第29-30页 |
| ·Ni Sepharose色谱凝胶亲和层析 | 第30页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第30-31页 |
| ·实验结果与分析讨论 | 第31-42页 |
| ·分析方法 | 第31-33页 |
| ·酶活计算 | 第31-32页 |
| ·蛋白含量的计算 | 第32-33页 |
| ·His-tag L-脯氨酸脱氢酶的分离纯化 | 第33-42页 |
| ·热处理 | 第33-34页 |
| ·Ni Sepharose色谱凝胶亲和层析 | 第34-36页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第36-40页 |
| ·His-tag L-脯氨酸脱氢酶的结构分析 | 第40-42页 |
| ·小结 | 第42页 |
| 第四章 His-tag L-脯氨酸脱氢酶的最适催化条件研究 | 第42-47页 |
| ·引言 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第42页 |
| ·缓冲溶液种类,浓度及pH值对酶活的影响 | 第42-43页 |
| ·实验结果与分析讨论 | 第43-47页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第43-44页 |
| ·缓冲溶液种类,浓度及pH值对酶活的影响 | 第44-47页 |
| ·小结 | 第47页 |
| 第五章 His-tag L-脯氨酸脱氢酶生物感应器的构建 | 第47-60页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-51页 |
| ·对酶,多壁纳米碳管和电极的连接方式的探索实验 | 第49-50页 |
| ·反应电极制备 | 第50-51页 |
| ·His-tag L-脯氨酸脱氢酶生物感应器的电化学实验 | 第51页 |
| ·实验结果与分析讨论 | 第51-60页 |
| ·对酶,多壁纳米碳管和电极的连接方式的探索实验 | 第51-54页 |
| ·反应电极制备 | 第54-56页 |
| ·His-tag L-脯氨酸脱氢酶生物感应器的电化学实验 | 第56-60页 |
| ·小结 | 第60页 |
| 第六章 His-tag的吸附特性 | 第60-64页 |
| ·引言 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-61页 |
| ·金电极的预处理 | 第60-61页 |
| ·QCM实验 | 第61页 |
| ·实验结果与分析讨论 | 第61-63页 |
| ·金电极的预处理 | 第61-62页 |
| ·QCM实验 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-64页 |
| 第七章 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69-70页 |
| 北京化工大学硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第70-71页 |
