| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| 1.昆虫免疫概述 | 第14-15页 |
| 1.1 体液免疫 | 第14页 |
| 1.2 细胞免疫 | 第14-15页 |
| 2.Hemolin蛋白的研究进展 | 第15-23页 |
| 2.2 Hemolin的结构分析 | 第16-18页 |
| 2.2.1 Hemolin的基因结构 | 第16-17页 |
| 2.2.2 Hemolin蛋白的结构 | 第17-18页 |
| 2.3 Hemolin的免疫学功能 | 第18-20页 |
| 2.3.1 Hemolin的抗细菌作用 | 第18-19页 |
| 2.3.2 Hemolin的抗真菌功能 | 第19-20页 |
| 2.3.3 Hemolin蛋白的抗病毒活性 | 第20页 |
| 2.3.4 Hemolin与酚氧化物酶活性 | 第20页 |
| 2.4 Hemolin与昆虫发育 | 第20-21页 |
| 2.5 Hemolin与蜕皮激素 | 第21-23页 |
| 3.Yippee蛋白的研究进展 | 第23-26页 |
| 3.1 Yippee蛋白的研究 | 第23页 |
| 3.2 Yippee的结构分析 | 第23-24页 |
| 3.3 Yippee的功能分析 | 第24-26页 |
| 第二章 引言 | 第26-29页 |
| 2.1 研究目的与意义 | 第26页 |
| 2.2 研究内容与技术路线 | 第26-29页 |
| 2.2.1 研究内容 | 第26-27页 |
| 2.2.2 技术路线 | 第27-29页 |
| 第三章 柞蚕Hemolin及Yippee基因的克隆与特征分析 | 第29-44页 |
| 3.1 材料与方法 | 第29-32页 |
| 3.1.1 实验动物与主要实验仪器 | 第29页 |
| 3.1.2 cDNA模板与RACE模板的制备 | 第29-31页 |
| 3.1.3 PCR引物设计,柞蚕Hemolin及Yippee基因cDNA的扩增 | 第31-32页 |
| 3.1.4 柞蚕Hemolin及Yippee基因PCR产物的克隆与测序 | 第32页 |
| 3.1.5 柞蚕Hemolin及Yippee基因的生物信息学及进化分析 | 第32页 |
| 3.2 实验结果 | 第32-42页 |
| 3.2.1 柞蚕脂肪体RNA的提取 | 第32-33页 |
| 3.2.2 柞蚕Hemolin与Yippee基因序列的分析 | 第33-37页 |
| 3.2.3 Hemolin与Yippee的多重序列比对与系统进化树分析 | 第37-42页 |
| 3.3 讨论 | 第42-43页 |
| 3.4 结论 | 第43-44页 |
| 第四章 柞蚕Hemolin和Yippee的原核表达及抗体制备 | 第44-55页 |
| 4.1 材料与方法 | 第44-49页 |
| 4.1.1 主要试验仪器与试剂 | 第44-45页 |
| 4.1.2 常用溶液配制 | 第45-47页 |
| 4.1.3 柞蚕Hemolin和Yippee基因原核表达载体的构建 | 第47页 |
| 4.1.4 柞蚕Hemolin和Yippee重组蛋白的表达及验证。 | 第47-48页 |
| 4.1.5 柞蚕Hemolin和Yippee重组蛋白的可溶性分析 | 第48页 |
| 4.1.6 柞蚕Hemolin和Yippee重组蛋白的纯化 | 第48-49页 |
| 4.1.7 柞蚕Hemolin和Yippee蛋白的抗体制备 | 第49页 |
| 4.2 实验结果 | 第49-54页 |
| 4.2.1 柞蚕Hemolin及Yippee蛋白的小量诱导及Westernblot验证 | 第49-52页 |
| 4.2.2 柞蚕Hemolin及Yippee蛋白的纯化及抗体制备 | 第52-54页 |
| 4.3 讨论 | 第54页 |
| 4.4 结论 | 第54-55页 |
| 第五章 柞蚕Hemolin和Yippee相互作用关系的研究 | 第55-65页 |
| 5.1 材料与方法 | 第55-59页 |
| 5.1.1 主要实验仪器 | 第55页 |
| 5.1.2 柞蚕Hemolin和Yippee的基因克隆 | 第55页 |
| 5.1.3 柞蚕Hemolin和Yippee蛋白的表达与纯化 | 第55-56页 |
| 5.1.4 柞蚕Hemolin和Yippee包涵体蛋白的复性 | 第56页 |
| 5.1.5 柞蚕Hemolin与Yippee蛋白的互作实验 | 第56-57页 |
| 5.1.6 柞蚕Hemolin和Yippee的RNA干扰实验 | 第57-59页 |
| 5.2 实验结果 | 第59-63页 |
| 5.2.1 柞蚕Hemolin与Yippee蛋白的复性结果 | 第59页 |
| 5.2.2 柞蚕Hemolin与Yippee蛋白互作结果 | 第59-61页 |
| 5.2.3 柞蚕Hemolin和YippeeRNA干扰结果 | 第61-63页 |
| 5.3 讨论 | 第63-64页 |
| 5.4 结论 | 第64-65页 |
| 第六章 柞蚕Hemolin和Yippee的免疫功能研究 | 第65-84页 |
| 6.1 实验动物和主要实验仪器 | 第65-66页 |
| 6.1.1 柞蚕的人工饲养 | 第65页 |
| 6.1.2 柞蚕的分组处理 | 第65-66页 |
| 6.1.3 主要实验仪器 | 第66页 |
| 6.1.4 常用试剂配置 | 第66页 |
| 6.2 实验方法 | 第66-68页 |
| 6.2.1 病原微生物的处理 | 第66页 |
| 6.2.2 柞蚕的处理 | 第66-67页 |
| 6.2.3 柞蚕的解剖及组织处理 | 第67页 |
| 6.2.4 柞蚕组织RNA的提取与质量检测 | 第67页 |
| 6.2.5 柞蚕组织RNA反转录和cDNA第一链合成 | 第67页 |
| 6.2.6 荧光定量PCR | 第67-68页 |
| 6.2.7 数据统计与误差分析 | 第68页 |
| 6.2.8 柞蚕组织蛋白的提取 | 第68页 |
| 6.2.9 Westernblot检测 | 第68页 |
| 6.2.10 柞蚕Hemolin蛋白的体外凝集实验 | 第68页 |
| 6.3 实验结果 | 第68-82页 |
| 6.3.1 柞蚕Hemolin和Yippee在组织中的分布研究 | 第68-70页 |
| 6.3.2 柞蚕Hemolin和Yippee在不同发育阶段的表达差异研究 | 第70-72页 |
| 6.3.3 免疫刺激柞蚕后Hemolin的表达模式分析 | 第72-76页 |
| 6.3.4 免疫刺激柞蚕后Yippee的表达模式分析 | 第76-81页 |
| 6.3.5 柞蚕Hemolin蛋白对大肠杆菌的体外凝集实验 | 第81-82页 |
| 6.4 讨论 | 第82-83页 |
| 6.5 结论 | 第83-84页 |
| 结论 | 第84-85页 |
| 1.克隆得到柞蚕Hemolin和Yippee的基因序列 | 第84页 |
| 2.成功获得柞蚕Hemolin和Yippee重组蛋白并制备了多克隆抗体 | 第84页 |
| 3.验证了柞蚕Hemolin和Yippee蛋白的体外互作与调控关系 | 第84页 |
| 4.Hemolin和Yippee参与柞蚕对病原微生物的免疫反应 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-96页 |
| 个人简介 | 第96页 |
| 在读期间发表的论文及专利 | 第96-98页 |
