| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第14-26页 |
| 1 海洋资源简介 | 第14-15页 |
| 1.1 海藻多糖概述 | 第14页 |
| 1.2 琼胶概述 | 第14-15页 |
| 1.3 海洋微生物来源概述 | 第15页 |
| 2 琼胶酶的来源及其酶学性质 | 第15-20页 |
| 2.1 琼胶酶 | 第15-16页 |
| 2.2 琼胶酶的来源 | 第16页 |
| 2.3 琼胶酶的分类 | 第16-20页 |
| 2.3.1 α-琼胶酶 | 第16-18页 |
| 2.3.2 β-琼胶酶 | 第18-20页 |
| 3 琼胶酶的应用 | 第20-22页 |
| 3.1 在分子生物学领域中的应用 | 第20页 |
| 3.2 用于海洋藻类的研究 | 第20-21页 |
| 3.3 降解琼胶获得琼胶寡糖 | 第21-22页 |
| 4 琼胶寡糖 | 第22-24页 |
| 4.1 琼胶寡糖的制备 | 第22页 |
| 4.2 琼胶寡糖的生物活性 | 第22-24页 |
| 4.2.1 抗氧化作用 | 第22-24页 |
| 4.2.2 抗炎症,抗肿瘤作用 | 第24页 |
| 4.2.3 抑菌作用 | 第24页 |
| 4.2.4 增加益生菌 | 第24页 |
| 5 本论文研究目的和意义 | 第24-26页 |
| 第二章 杂色鲍肠道中产琼胶酶菌株的分离及鉴定 | 第26-36页 |
| 1 材料与仪器 | 第26-27页 |
| 1.1 主要试剂 | 第26页 |
| 1.2 仪器 | 第26-27页 |
| 1.3 培养基 | 第27页 |
| 2 试验方法 | 第27-31页 |
| 2.1 鲍鱼肠道中产琼胶酶菌株的初筛 | 第27页 |
| 2.2 鲍鱼肠道中产琼胶酶菌株的复筛 | 第27-28页 |
| 2.3 琼胶酶酶活力的测定方法 | 第28-29页 |
| 2.4 产琼胶酶菌株的鉴定 | 第29-31页 |
| 2.4.1 形态特征鉴定 | 第29页 |
| 2.4.2 生长曲线测定 | 第29页 |
| 2.4.3 16S rDNA序列分析鉴定 | 第29-31页 |
| 2.4.3.1 产琼胶酶细菌16S rDNA提取 | 第29-30页 |
| 2.4.3.2 16S rDNA的PCR扩增 | 第30页 |
| 2.4.3.3 从琼脂糖凝胶上回收DNA片段 | 第30-31页 |
| 2.4.3.4 连接反应及16s rDNA测序 | 第31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-35页 |
| 3.1 筛选结果 | 第31-32页 |
| 3.1.1 形态特征 | 第31-32页 |
| 3.1.2 生长曲线 | 第32页 |
| 3.2 菌种鉴定结果 | 第32-35页 |
| 4 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 产琼胶酶菌株fjfst-2013001的发酵条件优化 | 第36-50页 |
| 1 材料与仪器 | 第36-37页 |
| 1.1 主要试剂 | 第36页 |
| 1.2 仪器 | 第36页 |
| 1.3 培养基 | 第36-37页 |
| 2 试验方法 | 第37-39页 |
| 2.1 琼胶酶酶活力的测定方法 | 第37页 |
| 2.2 不同碳源对产琼胶酶酶活力的影响 | 第37页 |
| 2.3 不同氮源对产琼胶酶酶活力的影响 | 第37页 |
| 2.4 发酵温度对产琼胶酶酶活力的影响 | 第37页 |
| 2.5 发酵时间对产琼胶酶酶活力的影响 | 第37-38页 |
| 2.6 接种量对产琼胶酶酶活力的影响 | 第38页 |
| 2.7 盐度对产琼胶酶酶活力的影响 | 第38页 |
| 2.8 琼胶浓度对产琼胶酶酶活力的影响 | 第38页 |
| 2.9 胰蛋白胨浓度对产琼胶酶酶活力的影响 | 第38页 |
| 2.10 酵母粉浓度对产琼胶酶酶活力的影响 | 第38页 |
| 2.11 pH值对产琼胶酶酶活力的影响 | 第38页 |
| 2.12 装液量对产琼胶酶酶活力的影响 | 第38页 |
| 2.13 摇床转速对产琼胶酶酶活力的影响 | 第38页 |
| 2.14 产琼胶酶发酵条件的优化 | 第38-39页 |
| 2.15 菌株fjfst-2013001产酶曲线分析 | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-48页 |
| 3.1 不同碳源对产琼胶酶酶活力的影响 | 第39页 |
| 3.2 不同氮源对产琼胶酶酶活力的影响 | 第39-40页 |
| 3.3 发酵温度对产琼胶酶酶活力的影响 | 第40-41页 |
| 3.4 发酵时间对产琼胶酶酶活力的影响 | 第41页 |
| 3.5 接种量对产琼胶酶酶活力的影响 | 第41-42页 |
| 3.6 盐度对产琼胶酶酶活力的影响 | 第42-43页 |
| 3.7 琼胶浓度对产琼胶酶酶活力的影响 | 第43页 |
| 3.8 胰蛋白胨浓度对产琼胶酶酶活力的影响 | 第43-44页 |
| 3.9 酵母粉浓度对产琼胶酶酶活力的影响 | 第44-45页 |
| 3.10 pH值对产琼胶酶酶活力的影响 | 第45页 |
| 3.11 装液量对产琼胶酶酶活力的影响 | 第45-46页 |
| 3.12 摇床转速对产琼胶酶酶活力的影响 | 第46页 |
| 3.13 产琼胶酶发酵条件的优化 | 第46-48页 |
| 3.14 菌株fjfst-2013001产酶曲线分析 | 第48页 |
| 4 小结 | 第48-50页 |
| 第四章 高活性琼胶酶的分离纯化及其特性研究 | 第50-61页 |
| 1 材料与仪器 | 第50-51页 |
| 1.1 主要试剂 | 第50页 |
| 1.2 仪器 | 第50-51页 |
| 1.3 培养基 | 第51页 |
| 2 试验方法 | 第51-54页 |
| 2.1 琼胶粗酶的制备方法 | 第51-53页 |
| 2.1.1 琼胶粗酶溶液的制备 | 第51页 |
| 2.1.2 硫酸铵浓缩琼胶粗酶溶液曲线的测定 | 第51-52页 |
| 2.1.3 琼胶酶的纯化 | 第52-53页 |
| 2.1.3.1 琼胶粗酶粉的制备 | 第52页 |
| 2.1.3.2 琼胶粗酶的纯化 | 第52-53页 |
| 2.2 琼胶酶酶解最佳条件的确定 | 第53-54页 |
| 2.2.1 琼胶酶酶解最佳温度的确定 | 第53页 |
| 2.2.2 琼胶酶酶解最佳底物浓度的确定 | 第53页 |
| 2.2.3 琼胶酶酶解最佳pH的确定 | 第53页 |
| 2.2.4 琼胶酶酶解最佳时间的确定 | 第53-54页 |
| 2.2.5 琼胶酶酶解底物专一性的研究 | 第54页 |
| 2.2.6 金属离子对琼胶酶酶解效率影响 | 第54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-59页 |
| 3.1 琼胶酶的分离纯化 | 第54-56页 |
| 3.1.1 硫酸铵盐析浓缩琼胶粗酶液结果 | 第54-55页 |
| 3.1.2 琼胶粗酶的纯化结果 | 第55-56页 |
| 3.2 琼胶酶酶解的最佳条件 | 第56-59页 |
| 3.2.1 琼胶酶酶解最佳温度对生成琼胶寡糖的影响 | 第56页 |
| 3.2.2 琼胶酶酶解最佳pH对生成琼胶寡糖的影响 | 第56-57页 |
| 3.2.3 琼胶酶酶解最佳底物浓度对生成琼胶寡糖的影响 | 第57页 |
| 3.2.4 琼胶酶酶解最佳时间对生成琼胶寡糖的影响 | 第57-58页 |
| 3.2.5 琼胶酶酶解底物专一性的研究 | 第58页 |
| 3.2.6 金属离子对琼胶酶酶解效率研究 | 第58-59页 |
| 4 小结 | 第59-61页 |
| 第五章 产琼胶酶菌株fjfst-2013001的酶解产物制备与分析及体外抗氧化特性研究 | 第61-70页 |
| 1 材料与仪器 | 第61-62页 |
| 1.1 主要试剂 | 第61页 |
| 1.2 仪器 | 第61-62页 |
| 1.3 培养基 | 第62页 |
| 2 试验方法 | 第62-64页 |
| 2.1 酶法制备琼胶寡糖 | 第62-63页 |
| 2.2 TLC分析酶解琼胶寡糖的组成: | 第63页 |
| 2.3 HPLC分析酶解琼胶寡糖的组成 | 第63页 |
| 2.4 琼胶寡糖的体外抗氧化研究 | 第63-64页 |
| 2.4.1 琼胶寡糖抗超氧阴离子自由基能力测定 | 第63页 |
| 2.4.2 琼胶寡糖抗羟自由基能力测定 | 第63-64页 |
| 2.4.3 琼胶寡糖清除DPPH自由基能力测定 | 第64页 |
| 2.4.4 琼胶寡糖总抗氧化能力(T-AOC)测定 | 第64页 |
| 3 结果分析 | 第64-68页 |
| 3.1 酶解产物的检测 | 第64-66页 |
| 3.2 新琼六糖抗超氧阴离子自由基能力测定 | 第66页 |
| 3.3 新琼六糖抗羟自由基能力测定 | 第66-67页 |
| 3.4 新琼六糖清除DPPH自由基能力测定 | 第67-68页 |
| 3.5 新琼六糖总抗氧化能力(T-AOC)测定 | 第68页 |
| 4 小结 | 第68-70页 |
| 结论与展望 | 第70-72页 |
| 1 主要结论 | 第70-71页 |
| 2 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
