| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语对照表 | 第8-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-17页 |
| 1.1 散发性结直肠癌 | 第11页 |
| 1.1.1 散发性结直肠癌及其特点 | 第11页 |
| 1.2 散发性结直肠癌的分子发病途径与相关风险因素 | 第11-13页 |
| 1.2.1 染色体不稳定途径 | 第11-12页 |
| 1.2.2 微卫星不稳定途径 | 第12页 |
| 1.2.3 CpG岛甲基化表型(CIMP) | 第12-13页 |
| 1.2.4 散发性结直肠癌相关风险因素 | 第13页 |
| 1.3 全外显子组测序技术的发展 | 第13-14页 |
| 1.4 CAPN1及其家族蛋白与癌症的研究进展 | 第14-16页 |
| 1.4.1 CAPN1的结构 | 第14-15页 |
| 1.4.2 CAPN1的作用机制 | 第15页 |
| 1.4.3 CAPN1与sCRC发生发展的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.5 本研究的研究内容及意义 | 第16-17页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第17-32页 |
| 2.1 材料 | 第17-20页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂与耗材 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.4 主要溶液配制 | 第19-20页 |
| 2.2 方法 | 第20-32页 |
| 2.2.1 细胞株培养 | 第20-21页 |
| 2.2.2 细胞系RNA的提取及实时荧光定量PCR(SYBRGreenⅠ法)确定细胞系mRNA水平CAPN1的表达 | 第21-24页 |
| 2.2.3 蛋白提取及蛋白质印迹法确定细胞系中CAPN1的表达 | 第24-28页 |
| 2.2.4 CAPN1小干扰RNA(siRNA)的构建 | 第28页 |
| 2.2.5 细胞转染 | 第28-29页 |
| 2.2.6 CellCounting Kit-8细胞增殖实验 | 第29页 |
| 2.2.7 平板克隆形成实验 | 第29-30页 |
| 2.2.8 Transwell测定细胞迁移及侵袭能力 | 第30-31页 |
| 2.2.9 细胞划痕实验 | 第31页 |
| 2.2.10 统计学方法 | 第31-32页 |
| 第三章 实验结果 | 第32-42页 |
| 3.1 CAPN1在各细胞系中的RNA表达水平 | 第32-33页 |
| 3.1.1 RNA琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| 3.1.2 细胞系中CAPN1的RNA表达水平 | 第32-33页 |
| 3.2 CAPN1在各细胞系中的蛋白表达水平 | 第33-35页 |
| 3.2.1 绘制BSA标准曲线 | 第33-34页 |
| 3.2.2 蛋白表达结果 | 第34-35页 |
| 3.3 CAPN1siRNA的筛选与抑制效率 | 第35-38页 |
| 3.3.1 RNA水平CAPN1抑制效率的检测 | 第35-36页 |
| 3.3.2 蛋白水平CAPN1抑制效率 | 第36-38页 |
| 3.4 CCK-8细胞增殖实验结果 | 第38页 |
| 3.5 平板克隆形成实验结果 | 第38-39页 |
| 3.6 细胞划痕实验结果 | 第39-40页 |
| 3.7 Transwell小室侵袭与迁移实验 | 第40-42页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 攻读硕士学位期间取得的学术成果 | 第49-50页 |
| 发表文章 | 第49页 |
| 参与课题 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
