摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略语对照表 | 第9-12页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
1.1 原发性肝细胞癌研究概述 | 第12-15页 |
1.1.1 肝癌发生发展过程研究概述 | 第12-14页 |
1.1.2 慢性肝硬化、肝癌的临床检测 | 第14-15页 |
1.2 糖蛋白研究综述 | 第15-20页 |
1.2.1 糖基化概述 | 第15-17页 |
1.2.2 糖蛋白质与糖蛋白质组学 | 第17-18页 |
1.2.3 糖链结构的解析技术 | 第18-19页 |
1.2.4 肝病的异常糖基化研究 | 第19-20页 |
1.3 唾液肿瘤标志物的研究 | 第20-21页 |
1.3.1 利用唾液检测肿瘤的优势及意义 | 第20页 |
1.3.2 利用糖组学手段筛选唾液肿瘤标志物 | 第20-21页 |
1.4 本课题研究目的及意义 | 第21-24页 |
第二章 慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者唾液蛋白质差异糖链结构的筛选 | 第24-34页 |
2.1 引言 | 第24页 |
2.2 主要仪器、材料及试剂 | 第24-26页 |
2.2.1 实验涉及的主要仪器 | 第24-25页 |
2.2.2 实验涉及的试剂与耗材 | 第25页 |
2.2.3 实验涉及的溶液配制 | 第25-26页 |
2.2.4 数据采集和分析所涉及的软件及在线工具 | 第26页 |
2.3 研究方法 | 第26-29页 |
2.3.1 唾液样本的收集及预处理 | 第26-27页 |
2.3.2 个例唾液蛋白的荧光标记与定量 | 第27页 |
2.3.3 凝集素芯片逐例检测唾液蛋白质糖链表达差异 | 第27-28页 |
2.3.4 凝集素芯片数据分析 | 第28-29页 |
2.4 研究结果 | 第29-32页 |
2.4.1 凝集素芯片分析肝病患者唾液糖蛋白糖链表达差异 | 第29-30页 |
2.4.2 肝癌患者唾液差异糖蛋白糖链的筛选 | 第30-32页 |
2.5 本章结果讨论 | 第32-34页 |
第三章 利用凝集素LTL对健康志愿者和乙肝、肝硬化和肝癌患者唾液特定糖蛋白的分离及糖链鉴定 | 第34-60页 |
3.1 引言 | 第34-35页 |
3.2 主要仪器、材料及试剂 | 第35-38页 |
3.2.1 实验涉及的主要仪器 | 第35-36页 |
3.2.2 实验涉及的试剂与耗材 | 第36页 |
3.2.3 实验涉及的溶液配制 | 第36-38页 |
3.2.4 数据采集和分析所涉及的软件及在线工具 | 第38页 |
3.3 研究方法 | 第38-44页 |
3.3.1 唾液样本的选取、混合及定量 | 第38-39页 |
3.3.2 唾液芯片设计和糖链糖型差异验证 | 第39-40页 |
3.3.3 聚丙酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及条带显色 | 第40-41页 |
3.3.4 凝集素-磁性微粒复合体的制备及对应糖蛋白的磁性分离 | 第41-42页 |
3.3.5 酶法分离糖蛋白N-糖链(N-Glycans) | 第42页 |
3.3.6 NaClO氧化法分离O-糖链(O-Glycans) | 第42-43页 |
3.3.7 糖链的凝胶除盐 | 第43页 |
3.3.8 N-/O-糖链的MALDI-TOF-MS质谱解析 | 第43-44页 |
3.3.9 质谱数据分析 | 第44页 |
3.4 研究结果 | 第44-57页 |
3.4.1 唾液芯片对LTL识别唾液糖链糖型差异的验证 | 第44-46页 |
3.4.2 凝集素印迹验证混合样本结果 | 第46-47页 |
3.4.3 经LTL-LMPCs分离的糖蛋白N-糖链MALDI-TOF-MS解析 | 第47-52页 |
3.4.4 经LTL-LMPCs分离的糖蛋白O-糖链MALDI-TOF-MS解析 | 第52-57页 |
3.5 本章结果讨论 | 第57-60页 |
全文总结 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第68-70页 |
致谢 | 第70-72页 |