| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略语对照表 | 第8-12页 |
| 引言 | 第12-26页 |
| 1.肝癌的研究现状 | 第12-14页 |
| 1.1 肝癌的危害 | 第12-13页 |
| 1.2 肝癌的发生发展 | 第13页 |
| 1.3 肝癌的治疗 | 第13-14页 |
| 2.凝集素概述 | 第14-20页 |
| 2.1 凝集素简介 | 第14页 |
| 2.2 凝集素分类 | 第14-16页 |
| 2.3 凝集素的生物学功能 | 第16-17页 |
| 2.4 凝集素与肿瘤治疗 | 第17-20页 |
| 3.凝集素芯片 | 第20页 |
| 4.细胞凋亡 | 第20-26页 |
| 4.1 细胞凋亡概述 | 第20-23页 |
| 4.2 细胞凋亡与癌症治疗 | 第23-26页 |
| 第一部分 肝癌细胞中表达差异的糖链对应的凝集素的筛选研究 | 第26-40页 |
| 引言 | 第26页 |
| 1.材料 | 第26-28页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 1.2 主要实验试剂及耗材 | 第27页 |
| 1.3 其它材料 | 第27页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第27-28页 |
| 2.方法 | 第28-33页 |
| 2.1 细胞培养 | 第28页 |
| 2.2 环氧化片基的制备 | 第28-29页 |
| 2.3 凝集素芯片的制备 | 第29-30页 |
| 2.4 细胞总蛋白的提取 | 第30页 |
| 2.5 BCA法蛋白定量 | 第30页 |
| 2.6 细胞蛋白的荧光标记与定量 | 第30-31页 |
| 2.7 凝集素芯片的封闭 | 第31页 |
| 2.8 凝集素芯片孵育 | 第31-32页 |
| 2.9 芯片分析数据 | 第32页 |
| 2.10 凝集素细胞免疫荧光实验 | 第32-33页 |
| 3.结果 | 第33-38页 |
| 3.1 凝集素芯片梯度实验 | 第33-34页 |
| 3.2 凝集素芯片筛选发现凝集素PSA所识别的糖链在肝癌细胞中表达上调 | 第34-38页 |
| 4.讨论 | 第38-40页 |
| 第二部分 凝集素PSA对肝癌细胞水平影响的研究 | 第40-50页 |
| 引言 | 第40页 |
| 1.材料 | 第40-41页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第40-41页 |
| 1.2 主要实验试剂及耗材 | 第41页 |
| 1.3 主要溶液配制 | 第41页 |
| 2.方法 | 第41-44页 |
| 2.1 MTT实验 | 第41-42页 |
| 2.2 Transwell小室实验 | 第42-43页 |
| 2.3 Hoechst染色检测细胞凋亡 | 第43-44页 |
| 3.结果 | 第44-47页 |
| 3.1 MTT实验 | 第44-45页 |
| 3.2 Transwell检测凝集素PSA对肝癌细胞迁移和侵袭能力 | 第45-46页 |
| 3.3 细胞凋亡染色实验检测凝集素PSA对肝癌细胞凋亡的影响 | 第46-47页 |
| 4.讨论 | 第47-50页 |
| 第三部分 凝集素PSA对肝癌细胞凋亡的分子机制研究 | 第50-58页 |
| 引言 | 第50页 |
| 1.材料 | 第50-52页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第50-51页 |
| 1.2 主要实验试剂及耗材 | 第51页 |
| 1.3 主要溶液配制 | 第51-52页 |
| 2.方法 | 第52-55页 |
| 2.1 免疫印迹实验 | 第52-55页 |
| 3.结果 | 第55-56页 |
| 3.1 凝集素PSA通过影响AKT/GSK3β/β-Catenin凋亡通路促进肝癌细胞凋亡的发生 | 第55页 |
| 3.2 GSK-3β的抑制剂逆转凝集素PSA对肝癌细胞凋亡的作用 | 第55-56页 |
| 4.讨论 | 第56-58页 |
| 第四部分 凝集素PSA特异识别的肝癌细胞糖蛋白的质谱研究 | 第58-76页 |
| 引言 | 第58页 |
| 1.材料 | 第58-59页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第58页 |
| 1.2 主要实验试剂及耗材 | 第58-59页 |
| 1.3 主要溶液配制 | 第59页 |
| 2.方法 | 第59-61页 |
| 2.1 凝集素-磁性微粒复合体的制备及对应糖蛋白的磁性分离 | 第59-60页 |
| 2.2 糖蛋白的酶解 | 第60页 |
| 2.3 LC-OrbitrapMS/MS鉴定蛋白 | 第60-61页 |
| 3.结果 | 第61-74页 |
| 3.1 肝癌细胞中能与凝集素PSA结合的糖蛋白的分离和鉴定 | 第61-73页 |
| 3.2 与细胞凋亡相关的PSA特异性识别的糖蛋白 | 第73-74页 |
| 4.讨论 | 第74-76页 |
| 全文总结 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 致谢 | 第88-90页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第90-92页 |
| 作者简介 | 第92-93页 |
