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凝集素PSA对人肝癌细胞凋亡的作用及其分子机制的研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩略语对照表第8-12页
引言第12-26页
    1.肝癌的研究现状第12-14页
        1.1 肝癌的危害第12-13页
        1.2 肝癌的发生发展第13页
        1.3 肝癌的治疗第13-14页
    2.凝集素概述第14-20页
        2.1 凝集素简介第14页
        2.2 凝集素分类第14-16页
        2.3 凝集素的生物学功能第16-17页
        2.4 凝集素与肿瘤治疗第17-20页
    3.凝集素芯片第20页
    4.细胞凋亡第20-26页
        4.1 细胞凋亡概述第20-23页
        4.2 细胞凋亡与癌症治疗第23-26页
第一部分 肝癌细胞中表达差异的糖链对应的凝集素的筛选研究第26-40页
    引言第26页
    1.材料第26-28页
        1.1 主要仪器设备第26-27页
        1.2 主要实验试剂及耗材第27页
        1.3 其它材料第27页
        1.4 主要溶液配制第27-28页
    2.方法第28-33页
        2.1 细胞培养第28页
        2.2 环氧化片基的制备第28-29页
        2.3 凝集素芯片的制备第29-30页
        2.4 细胞总蛋白的提取第30页
        2.5 BCA法蛋白定量第30页
        2.6 细胞蛋白的荧光标记与定量第30-31页
        2.7 凝集素芯片的封闭第31页
        2.8 凝集素芯片孵育第31-32页
        2.9 芯片分析数据第32页
        2.10 凝集素细胞免疫荧光实验第32-33页
    3.结果第33-38页
        3.1 凝集素芯片梯度实验第33-34页
        3.2 凝集素芯片筛选发现凝集素PSA所识别的糖链在肝癌细胞中表达上调第34-38页
    4.讨论第38-40页
第二部分 凝集素PSA对肝癌细胞水平影响的研究第40-50页
    引言第40页
    1.材料第40-41页
        1.1 主要仪器设备第40-41页
        1.2 主要实验试剂及耗材第41页
        1.3 主要溶液配制第41页
    2.方法第41-44页
        2.1 MTT实验第41-42页
        2.2 Transwell小室实验第42-43页
        2.3 Hoechst染色检测细胞凋亡第43-44页
    3.结果第44-47页
        3.1 MTT实验第44-45页
        3.2 Transwell检测凝集素PSA对肝癌细胞迁移和侵袭能力第45-46页
        3.3 细胞凋亡染色实验检测凝集素PSA对肝癌细胞凋亡的影响第46-47页
    4.讨论第47-50页
第三部分 凝集素PSA对肝癌细胞凋亡的分子机制研究第50-58页
    引言第50页
    1.材料第50-52页
        1.1 主要仪器设备第50-51页
        1.2 主要实验试剂及耗材第51页
        1.3 主要溶液配制第51-52页
    2.方法第52-55页
        2.1 免疫印迹实验第52-55页
    3.结果第55-56页
        3.1 凝集素PSA通过影响AKT/GSK3β/β-Catenin凋亡通路促进肝癌细胞凋亡的发生第55页
        3.2 GSK-3β的抑制剂逆转凝集素PSA对肝癌细胞凋亡的作用第55-56页
    4.讨论第56-58页
第四部分 凝集素PSA特异识别的肝癌细胞糖蛋白的质谱研究第58-76页
    引言第58页
    1.材料第58-59页
        1.1 主要仪器设备第58页
        1.2 主要实验试剂及耗材第58-59页
        1.3 主要溶液配制第59页
    2.方法第59-61页
        2.1 凝集素-磁性微粒复合体的制备及对应糖蛋白的磁性分离第59-60页
        2.2 糖蛋白的酶解第60页
        2.3 LC-OrbitrapMS/MS鉴定蛋白第60-61页
    3.结果第61-74页
        3.1 肝癌细胞中能与凝集素PSA结合的糖蛋白的分离和鉴定第61-73页
        3.2 与细胞凋亡相关的PSA特异性识别的糖蛋白第73-74页
    4.讨论第74-76页
全文总结第76-78页
参考文献第78-88页
致谢第88-90页
攻读硕士学位期间取得的科研成果第90-92页
作者简介第92-93页

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