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马克斯克鲁维酵母D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因工程菌的构建

致谢第7-8页
摘要第8-10页
abstract第10-11页
第一章 绪论第18-29页
    1.1 D-阿洛酮糖第18-20页
        1.1.1 D-阿洛酮糖结构第18页
        1.1.2 D-阿洛酮糖的体内代谢特性第18-19页
        1.1.3 D-阿洛酮糖的功能及应用第19-20页
    1.2 D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的催化机理第20-24页
        1.2.1 微生物来源第20页
        1.2.2 结构特征第20-21页
        1.2.3 酶学性质第21-23页
        1.2.4 催化机制第23-24页
    1.3 产D-阿洛酮糖基因工程菌的构建第24-26页
        1.3.1 大肠杆菌表达系统第24页
        1.3.2 芽孢杆菌表达系统第24页
        1.3.3 酵母表达系统第24-26页
    1.4 D-阿洛酮糖的分离纯化第26页
    1.5 课题的研究背景、目的、意义和主要内容第26-29页
        1.5.1 研究背景第26-27页
        1.5.2 目的和意义第27页
        1.5.3 主要研究内容第27-28页
        1.5.4 主要技术路线框架图第28-29页
第二章 D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因的克隆及分析第29-45页
    2.1 材料与仪器第29-31页
        2.1.1 菌株与质粒第29页
        2.1.2 试剂第29-30页
        2.1.3 主要仪器第30页
        2.1.4 溶液的配置第30-31页
    2.2 试验方法第31-34页
        2.2.1 根癌农杆菌基因组DNA的提取第31-32页
        2.2.2 PCR扩增与回收第32-33页
        2.2.3 PCR产物的连接与转化第33页
        2.2.4 PCR鉴定第33-34页
        2.2.5 测序鉴定第34页
        2.2.6 生物信息学分析第34页
    2.3 结果与分析第34-44页
        2.3.1 根癌农杆菌基因组的提取第34-35页
        2.3.2 PCR扩增与回收第35-36页
        2.3.3 PCR鉴定第36页
        2.3.4 测序鉴定第36-39页
        2.3.5 生物信息学分析第39-44页
    2.4 本章小结第44-45页
第三章 重组马克斯克鲁维酵母的构建及酶学特性第45-62页
    3.1 材料与仪器第45-47页
        3.1.1 菌株与质粒第45页
        3.1.2 试剂第45-46页
        3.1.3 主要仪器第46-47页
        3.1.4 溶液的配制第47页
    3.2 试验方法第47-52页
        3.2.1 表达载体的构建第47-49页
        3.2.2 dpe基因遗传转化K.marxianus第49页
        3.2.3 拟转化子的鉴定第49-50页
        3.2.4 重组DPEase的分离纯化第50-52页
        3.2.5 D-阿洛酮糖的测定方法第52页
        3.2.6 重组DPEase的酶学特性第52页
    3.3 结果与分析第52-61页
        3.3.1 表达载体的构建第52-55页
        3.3.2 潮霉素筛选拟转化子第55-56页
        3.3.3 反转录与酶活筛选转化子第56页
        3.3.4 重组菌的表达第56-57页
        3.3.5 重组DPEase的分离纯化第57-58页
        3.3.6 重组DPEase的酶学特性第58-61页
    3.4 本章小结第61-62页
第四章 生物法脱除催化反应液中D-果糖的研究第62-71页
    4.1 试剂与主要仪器第63页
        4.1.1 试剂第63页
        4.1.2 主要仪器第63页
    4.2 试验方法第63-64页
        4.2.1 工程菌原位催化特性的研究第63页
        4.2.2 生物法脱除催化反应液中的D-果糖第63-64页
    4.3 结果与分析第64-70页
        4.3.1 工程菌原位催化特性的研究第64-68页
        4.3.2 生物法脱除催化反应液中的D-果糖第68-70页
    4.4 本章小结第70-71页
第五章 结论与讨论第71-73页
    5.1 结论第71页
    5.2 讨论第71-73页
参考文献第73-82页
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况第82-83页

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