致谢 | 第7-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
abstract | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第18-29页 |
1.1 D-阿洛酮糖 | 第18-20页 |
1.1.1 D-阿洛酮糖结构 | 第18页 |
1.1.2 D-阿洛酮糖的体内代谢特性 | 第18-19页 |
1.1.3 D-阿洛酮糖的功能及应用 | 第19-20页 |
1.2 D-阿洛酮糖-3-差向异构酶的催化机理 | 第20-24页 |
1.2.1 微生物来源 | 第20页 |
1.2.2 结构特征 | 第20-21页 |
1.2.3 酶学性质 | 第21-23页 |
1.2.4 催化机制 | 第23-24页 |
1.3 产D-阿洛酮糖基因工程菌的构建 | 第24-26页 |
1.3.1 大肠杆菌表达系统 | 第24页 |
1.3.2 芽孢杆菌表达系统 | 第24页 |
1.3.3 酵母表达系统 | 第24-26页 |
1.4 D-阿洛酮糖的分离纯化 | 第26页 |
1.5 课题的研究背景、目的、意义和主要内容 | 第26-29页 |
1.5.1 研究背景 | 第26-27页 |
1.5.2 目的和意义 | 第27页 |
1.5.3 主要研究内容 | 第27-28页 |
1.5.4 主要技术路线框架图 | 第28-29页 |
第二章 D-阿洛酮糖-3-差向异构酶基因的克隆及分析 | 第29-45页 |
2.1 材料与仪器 | 第29-31页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第29页 |
2.1.2 试剂 | 第29-30页 |
2.1.3 主要仪器 | 第30页 |
2.1.4 溶液的配置 | 第30-31页 |
2.2 试验方法 | 第31-34页 |
2.2.1 根癌农杆菌基因组DNA的提取 | 第31-32页 |
2.2.2 PCR扩增与回收 | 第32-33页 |
2.2.3 PCR产物的连接与转化 | 第33页 |
2.2.4 PCR鉴定 | 第33-34页 |
2.2.5 测序鉴定 | 第34页 |
2.2.6 生物信息学分析 | 第34页 |
2.3 结果与分析 | 第34-44页 |
2.3.1 根癌农杆菌基因组的提取 | 第34-35页 |
2.3.2 PCR扩增与回收 | 第35-36页 |
2.3.3 PCR鉴定 | 第36页 |
2.3.4 测序鉴定 | 第36-39页 |
2.3.5 生物信息学分析 | 第39-44页 |
2.4 本章小结 | 第44-45页 |
第三章 重组马克斯克鲁维酵母的构建及酶学特性 | 第45-62页 |
3.1 材料与仪器 | 第45-47页 |
3.1.1 菌株与质粒 | 第45页 |
3.1.2 试剂 | 第45-46页 |
3.1.3 主要仪器 | 第46-47页 |
3.1.4 溶液的配制 | 第47页 |
3.2 试验方法 | 第47-52页 |
3.2.1 表达载体的构建 | 第47-49页 |
3.2.2 dpe基因遗传转化K.marxianus | 第49页 |
3.2.3 拟转化子的鉴定 | 第49-50页 |
3.2.4 重组DPEase的分离纯化 | 第50-52页 |
3.2.5 D-阿洛酮糖的测定方法 | 第52页 |
3.2.6 重组DPEase的酶学特性 | 第52页 |
3.3 结果与分析 | 第52-61页 |
3.3.1 表达载体的构建 | 第52-55页 |
3.3.2 潮霉素筛选拟转化子 | 第55-56页 |
3.3.3 反转录与酶活筛选转化子 | 第56页 |
3.3.4 重组菌的表达 | 第56-57页 |
3.3.5 重组DPEase的分离纯化 | 第57-58页 |
3.3.6 重组DPEase的酶学特性 | 第58-61页 |
3.4 本章小结 | 第61-62页 |
第四章 生物法脱除催化反应液中D-果糖的研究 | 第62-71页 |
4.1 试剂与主要仪器 | 第63页 |
4.1.1 试剂 | 第63页 |
4.1.2 主要仪器 | 第63页 |
4.2 试验方法 | 第63-64页 |
4.2.1 工程菌原位催化特性的研究 | 第63页 |
4.2.2 生物法脱除催化反应液中的D-果糖 | 第63-64页 |
4.3 结果与分析 | 第64-70页 |
4.3.1 工程菌原位催化特性的研究 | 第64-68页 |
4.3.2 生物法脱除催化反应液中的D-果糖 | 第68-70页 |
4.4 本章小结 | 第70-71页 |
第五章 结论与讨论 | 第71-73页 |
5.1 结论 | 第71页 |
5.2 讨论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-82页 |
攻读硕士学位期间的学术活动及成果情况 | 第82-83页 |