| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第11-19页 |
| 1.1 消毒剂概述 | 第11页 |
| 1.2 季铵盐类消毒剂 | 第11-12页 |
| 1.2.1 季铵盐类消毒剂概况 | 第11页 |
| 1.2.2 QACs的作用机制 | 第11-12页 |
| 1.2.3 消毒剂耐药性分析 | 第12页 |
| 1.3 Listeria monocytogenes | 第12-13页 |
| 1.3.1 Listeria monocytogenes生理特性 | 第12页 |
| 1.3.2 李斯特病的爆发和流行 | 第12-13页 |
| 1.4 Listeria monocytogenes对QACs的耐药 | 第13页 |
| 1.5 外排泵 | 第13-14页 |
| 1.5.1 外排泵分类 | 第14页 |
| 1.5.2 外排泵抑制剂 | 第14页 |
| 1.6 Listeria monocytogenes的MFS家族外排泵 | 第14-15页 |
| 1.7 Listeria monocytogenes的调控因子 | 第15-16页 |
| 1.8 研究目的 | 第16页 |
| 1.9 研究方案 | 第16-17页 |
| 1.10 研究内容 | 第17-19页 |
| 第二章 mdrL基因缺失和回复突变株的构建 | 第19-41页 |
| 2.1 引言 | 第19-21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-25页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第21页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第21页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.4 培养基和常用试剂配制 | 第22-24页 |
| 2.2.5 引物 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-33页 |
| 2.3.1 大肠杆菌DH5α感受态细胞制备 | 第25页 |
| 2.3.2 EGD-e感受态制备 | 第25-26页 |
| 2.3.3 mdrL基因转录水平检测 | 第26-28页 |
| 2.3.4 外排泵抑制实验 | 第28-29页 |
| 2.3.5 mdrL基因缺失菌株的构建与分子鉴定 | 第29-31页 |
| 2.3.6 mdrL回复突变菌株的构建 | 第31-33页 |
| 2.4 结果与分析 | 第33-38页 |
| 2.4.1 mdrL基因转录水平分析 | 第33-34页 |
| 2.4.2 外排泵抑制实验 | 第34页 |
| 2.4.3 mdrL基因缺失株的构建与分子鉴定 | 第34-37页 |
| 2.4.4 mdrL基因回复突变菌株的构建与分子鉴定 | 第37-38页 |
| 2.5 本章讨论 | 第38-41页 |
| 第三章 Mdr L外排泵在Listeria monocytogenes对苯扎氯铵耐受中的作用 | 第41-51页 |
| 3.1 引言 | 第41页 |
| 3.2 实验材料 | 第41-42页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第41页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第41页 |
| 3.2.3 主要试剂配制 | 第41-42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-45页 |
| 3.3.1 药物敏感性试验 | 第42页 |
| 3.3.2 平板法检测菌株对BC的耐受性 | 第42-43页 |
| 3.3.3 生长曲线测定 | 第43页 |
| 3.3.4 致死曲线测定 | 第43-44页 |
| 3.3.5 EB积累和外排试验 | 第44-45页 |
| 3.4 结果与分析 | 第45-48页 |
| 3.4.1 药物敏感性试验 | 第45页 |
| 3.4.2 平板法检测 | 第45-46页 |
| 3.4.3 生长曲线测定 | 第46-47页 |
| 3.4.4 致死曲线测定 | 第47页 |
| 3.4.5 EB的积累和外排 | 第47-48页 |
| 3.5 本章讨论 | 第48-51页 |
| 第四章 调控子LadR对mdrL基因的调控 | 第51-59页 |
| 4.1 引言 | 第51页 |
| 4.2 实验材料 | 第51-52页 |
| 4.2.1 菌株及质粒 | 第51页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第51-52页 |
| 4.2.3 引物 | 第52页 |
| 4.3 实验方法 | 第52-54页 |
| 4.3.1 ladR基因缺失菌株的构建与分子鉴定 | 第52-53页 |
| 4.3.2 mdrL基因转录水平检测 | 第53-54页 |
| 4.4 结果与分析 | 第54-57页 |
| 4.4.1 ladR基因缺失株的构建与分子鉴定 | 第54-56页 |
| 4.4.2 mdrL基因转录水平分析 | 第56-57页 |
| 4.5 本章讨论 | 第57-59页 |
| 第五章 调控子LadR与mdrL基因启动子的结合 | 第59-73页 |
| 5.1 前言 | 第59页 |
| 5.2 实验材料 | 第59-63页 |
| 5.2.1 菌株和质粒 | 第59-60页 |
| 5.2.2 主要仪器 | 第60页 |
| 5.2.3 主要试剂 | 第60页 |
| 5.2.4 主要试剂配制 | 第60-62页 |
| 5.2.5 引物 | 第62-63页 |
| 5.3 实验方法 | 第63-67页 |
| 5.3.1 LadR蛋白表达菌株的构建与分子鉴定 | 第63-64页 |
| 5.3.2 重组蛋白His_6-LadR的表达与纯化 | 第64-66页 |
| 5.3.3 EMSA | 第66-67页 |
| 5.4 结果与分析 | 第67-70页 |
| 5.4.1 LadR表达菌株的构建与分子鉴定 | 第67-68页 |
| 5.4.2 重组蛋白His_6-LadR的表达与纯化 | 第68-70页 |
| 5.4.3 EMSA | 第70页 |
| 5.5 本章讨论 | 第70-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 攻读学位期间发表的学术研究成果 | 第85-86页 |
