| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-25页 |
| 1.1 流感病毒概述 | 第15-16页 |
| 1.1.1 主要流行病原和多变原因 | 第15-16页 |
| 1.1.2 H5亚型流感危害 | 第16页 |
| 1.1.3 H7N9流感危害 | 第16页 |
| 1.2 流感病毒血凝素 | 第16-17页 |
| 1.3 宿主因素对传播能力影响 | 第17页 |
| 1.4 免疫的作用 | 第17-19页 |
| 1.4.1 免疫策略 | 第18-19页 |
| 1.5 禽流感疫苗概述 | 第19-21页 |
| 1.5.1 灭活疫苗 | 第20页 |
| 1.5.2 重组病毒活载体疫苗 | 第20页 |
| 1.5.3 RNA疫苗 | 第20页 |
| 1.5.4 亚单位疫苗 | 第20-21页 |
| 1.5.5 DNA疫苗 | 第21页 |
| 1.6 DNA疫苗研究进展 | 第21-24页 |
| 1.6.1 DNA疫苗的基本原理 | 第21-22页 |
| 1.6.2 DNA疫苗的主要特点 | 第22页 |
| 1.6.3 流感DNA疫苗的发展 | 第22-23页 |
| 1.6.4 影响DNA疫苗免疫应答的因素 | 第23-24页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第24-25页 |
| 第二章 clade2.3.2e和clade2.3.4.4H5亚型DNA疫苗的构建与免疫效力评估 | 第25-40页 |
| 2.1 材料和方法 | 第25-28页 |
| 2.1.1 质粒、毒株和细胞 | 第25页 |
| 2.1.2 实验中主要试剂 | 第25页 |
| 2.1.3 实验动物和鸡胚 | 第25页 |
| 2.1.4 血清与抗体 | 第25页 |
| 2.1.5 主要用的仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.6 优化基因的合成 | 第26页 |
| 2.1.7 重组质粒pCA-S1246的构建与鉴定 | 第26页 |
| 2.1.8 重组质粒pCA-S1246在293T细胞中表达 | 第26-27页 |
| 2.1.9 重组质粒pCA-S1246和pCA-GZ4的有效免疫剂量测定 | 第27-28页 |
| 2.1.10 重组质粒pCA-GZ4的异源攻毒保护实验 | 第28页 |
| 2.1.11 重组质粒pCA-GZ4和pCA-S1246的HI抗体持续期检测 | 第28页 |
| 2.2 结果 | 第28-38页 |
| 2.2.1 重组质粒pCA-S1246的鉴定 | 第28-30页 |
| 2.2.2 IFA鉴定结果 | 第30页 |
| 2.2.3 HA蛋白的Westernblotting结果鉴定 | 第30页 |
| 2.2.4 重组质粒pCA-S1246的免疫效力评估 | 第30-33页 |
| 2.2.5 重组质粒pCA-GZ4的免疫效力评估 | 第33-38页 |
| 2.3 讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 共表达CK/GZ/4/13(H5N1)和DK/AH/S1246/15(H5N1)HA蛋白的双价DNA质粒的构建和免疫效力评估 | 第40-52页 |
| 3.1 材料和方法 | 第40-44页 |
| 3.1.1 毒株、质粒和细胞 | 第40页 |
| 3.1.2 实验中主要试剂 | 第40页 |
| 3.1.3 实验动物和鸡胚 | 第40页 |
| 3.1.4 血清与抗体 | 第40页 |
| 3.1.5 主要用的仪器 | 第40-41页 |
| 3.1.6 禽流感DNA疫苗双表达载体的构建及鉴定 | 第41-42页 |
| 3.1.7 重组双表达质粒在293T细胞中表达 | 第42-43页 |
| 3.1.8 重组双表达质粒的免疫效力评估 | 第43-44页 |
| 3.2 结果 | 第44-50页 |
| 3.2.1 重组质粒pCA-CGZ4-S1246和pCA-FGZ4-S1246的酶切鉴定结果 | 第44页 |
| 3.2.2 重组质粒pCA-CGZ4-S1246和pCA-FGZ4-S1246的IFA的鉴定结果 | 第44-45页 |
| 3.2.3 重组质粒的Westernblotting鉴定结果 | 第45-46页 |
| 3.2.4 重组质粒针对CK/GZ/4/13的免疫效力评估结果 | 第46-47页 |
| 3.2.5 重组质粒针对DK/AH/S1246/15的免疫效力评估结果 | 第47-50页 |
| 3.3 讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 表达H7N9HA蛋白的DNA疫苗和共表达H5和H7亚型HA蛋白的DNA疫苗的构建及免疫效力评估 | 第52-67页 |
| 4.1 材料和方法 | 第52-55页 |
| 4.1.1 毒株、质粒和细胞 | 第52页 |
| 4.1.2 实验中主要试剂 | 第52页 |
| 4.1.3 实验动物和鸡胚 | 第52页 |
| 4.1.4 血清与抗体 | 第52页 |
| 4.1.5 主要用的仪器 | 第52-53页 |
| 4.1.6 禽流感DNA疫苗pCA-SD098表达载体的构建及鉴定 | 第53页 |
| 4.1.7 重组质粒pCA-SD098在293T细胞中表达 | 第53-54页 |
| 4.1.8 禽流感DNA疫苗双表达载体pCA-GZ4-SD098的构建及鉴定 | 第54页 |
| 4.1.9 重组双表达质粒pCA-GZ4-SD098在293T细胞中表达 | 第54-55页 |
| 4.1.10 重组质粒的免疫效力评估 | 第55页 |
| 4.2 结果 | 第55-65页 |
| 4.2.1 重组质粒pCA-SD098的鉴定 | 第55-56页 |
| 4.2.2 IFA鉴定结果 | 第56-57页 |
| 4.2.3 HA蛋白的Westernblotting结果鉴定 | 第57页 |
| 4.2.4 重组质粒pCA-GZ4-SD09的酶切鉴定结果 | 第57-58页 |
| 4.2.5 重组质粒pCA-GZ4-SD098的IFA鉴定结果 | 第58-59页 |
| 4.2.6 重组质粒pCA-GZ4-SD0986的Westernblotting鉴定结果 | 第59页 |
| 4.2.7 重组质粒针对CK/GX/SD098/17(H7N9)的免疫效力评估结果 | 第59-61页 |
| 4.2.8 重组质粒针对CK/CQ/SD057/17(H7N9)的免疫效力评估结果 | 第61-63页 |
| 4.2.9 重组质粒针对CK/GZ/4/13(H5N1)的免疫效力评估 | 第63-65页 |
| 4.3 讨论 | 第65-67页 |
| 第五章 全文结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 作者简历 | 第76页 |
