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FMDV感染对肠道菌群及Ⅰ型干扰素对FMDV感染的影响

摘要第5-6页
abstract第6页
英文缩略表第10-13页
第一章 文献综述第13-21页
    1.1 肠道菌群的研究进展第13-16页
        1.1.1 正常的肠道菌群第13-14页
        1.1.2 肠道菌群处于波动状态第14-16页
    1.2 干扰素的研究进展第16-20页
    1.3 研究目的及意义第20-21页
第二章 口蹄疫病毒感染对乳鼠肠道菌群的影响研究第21-27页
    2.1 材料第21页
        2.1.1 乳鼠第21页
        2.1.2 试剂与仪器第21页
    2.2 方法第21-22页
        2.2.1 病毒接种第21页
        2.2.2 肠道菌群DNA提取和Illumina高通量测序第21-22页
        2.2.3 数据统计分析第22页
    2.3 结果第22-26页
        2.3.1 肠道菌群的分类学鉴定第22-23页
        2.3.2 病毒感染引起肠道菌群在门类水平的变化情况第23-25页
        2.3.3 病毒感染引起肠道菌群在属类水平的变化情况第25-26页
    2.4 讨论第26-27页
第三章 乳鼠EPSILON干扰素MRNA转录水平在口蹄疫病毒感染中的变化第27-34页
    3.1 材料第27页
        3.1.1 病毒第27页
        3.1.2 试剂与仪器第27页
    3.2 方法第27-29页
        3.2.1 引物的设计与合成第27页
        3.2.2 病毒接种第27-28页
        3.2.3 组织RNA提取第28页
        3.2.4 cDNA的反转录合成第28页
        3.2.5 IFN-ε基因荧光定量PCR检测方法的建立第28-29页
    3.3 结果第29-32页
        3.3.1 引物特异性检验第29-30页
        3.3.2 质粒标准品构建及基因标准曲线建立第30-31页
        3.3.3 荧光定量PCR检测乳鼠攻毒前后IFN-ε基因表达的变化第31-32页
    3.4 讨论第32-34页
第四章 干扰素OMEGA的抗口蹄疫病毒活性研究第34-44页
    4.1 材料第34页
        4.1.1 主要试剂第34页
        4.1.2 仪器第34页
    4.2 方法第34-39页
        4.2.1 IFN-ω7基因的设计与合成第34页
        4.2.2 重组质粒的验证第34-35页
        4.2.3 重组质粒pET-30a(+)-IFN-ω7的诱导表达第35页
        4.2.4 IFN-ω7蛋白的Western-blot验证第35-36页
        4.2.5 蛋白纯化第36页
        4.2.6 目的蛋白透析复性第36页
        4.2.7 抗病毒活性的鉴定第36-38页
        4.2.8 荧光定量测定IFN-ω7诱导ISG基因的表达第38-39页
    4.3 实验结果第39-43页
        4.3.1 重组质粒的构建第39页
        4.3.2 重组PoIFN-ω7蛋白的诱导表达第39页
        4.3.3 重组PoIFN-ω7蛋白的纯化与westernblot鉴定第39-40页
        4.3.4 在病毒感染前IFN-ω7处理细胞对FMDV感染的影响第40-41页
        4.3.5 在病毒感染后IFN-ω7处理细胞对FMDV感染的影响第41-42页
        4.3.6 PoIFN-ω7诱导ISG的活性第42-43页
    4.4 讨论第43-44页
第五章 干扰素DELTA,ALPHAOMEGA的抗口蹄疫病毒活性研究第44-55页
    5.1 材料第44页
    5.2 方法第44-46页
        5.2.1 IFN-δ8,IFN-αω基因的合成、克隆第44页
        5.2.2 重组质粒的验证第44页
        5.2.3 重组质粒的诱导表达第44页
        5.2.4 重组蛋白的Western-blot验证第44页
        5.2.5 蛋白纯化第44-45页
        5.2.6 蛋白复性第45页
        5.2.7 抗病毒活性的鉴定第45-46页
        5.2.8 荧光定量测定干扰素诱导ISG基因的表达第46页
        5.2.9 IFN-αω诱导形式的确定第46页
        5.2.10 统计学方法第46页
    5.3 实验结果第46-53页
        5.3.1 重组质粒的构建第46-48页
        5.3.2 重组IFN-δ8,IFN-αω蛋白的诱导表达分析第48页
        5.3.3 重组IFN-δ8,IFN-αω蛋白的纯化第48-49页
        5.3.4 在病毒感染前用IFN处理对FMDV感染的影响第49-50页
        5.3.5 在病毒感染后用IFN处理对FMDV感染的影响第50-51页
        5.3.6 IFN-δ8的抗A型FMDV活性第51页
        5.3.7 IFN-αω的表达形式第51-52页
        5.3.8 IFN-δ8,IFN-αω诱导ISG的活性第52-53页
    5.4 讨论第53-55页
第六章 全文结论第55-56页
参考文献第56-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

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