摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6页 |
英文缩略表 | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-21页 |
1.1 肠道菌群的研究进展 | 第13-16页 |
1.1.1 正常的肠道菌群 | 第13-14页 |
1.1.2 肠道菌群处于波动状态 | 第14-16页 |
1.2 干扰素的研究进展 | 第16-20页 |
1.3 研究目的及意义 | 第20-21页 |
第二章 口蹄疫病毒感染对乳鼠肠道菌群的影响研究 | 第21-27页 |
2.1 材料 | 第21页 |
2.1.1 乳鼠 | 第21页 |
2.1.2 试剂与仪器 | 第21页 |
2.2 方法 | 第21-22页 |
2.2.1 病毒接种 | 第21页 |
2.2.2 肠道菌群DNA提取和Illumina高通量测序 | 第21-22页 |
2.2.3 数据统计分析 | 第22页 |
2.3 结果 | 第22-26页 |
2.3.1 肠道菌群的分类学鉴定 | 第22-23页 |
2.3.2 病毒感染引起肠道菌群在门类水平的变化情况 | 第23-25页 |
2.3.3 病毒感染引起肠道菌群在属类水平的变化情况 | 第25-26页 |
2.4 讨论 | 第26-27页 |
第三章 乳鼠EPSILON干扰素MRNA转录水平在口蹄疫病毒感染中的变化 | 第27-34页 |
3.1 材料 | 第27页 |
3.1.1 病毒 | 第27页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第27页 |
3.2 方法 | 第27-29页 |
3.2.1 引物的设计与合成 | 第27页 |
3.2.2 病毒接种 | 第27-28页 |
3.2.3 组织RNA提取 | 第28页 |
3.2.4 cDNA的反转录合成 | 第28页 |
3.2.5 IFN-ε基因荧光定量PCR检测方法的建立 | 第28-29页 |
3.3 结果 | 第29-32页 |
3.3.1 引物特异性检验 | 第29-30页 |
3.3.2 质粒标准品构建及基因标准曲线建立 | 第30-31页 |
3.3.3 荧光定量PCR检测乳鼠攻毒前后IFN-ε基因表达的变化 | 第31-32页 |
3.4 讨论 | 第32-34页 |
第四章 干扰素OMEGA的抗口蹄疫病毒活性研究 | 第34-44页 |
4.1 材料 | 第34页 |
4.1.1 主要试剂 | 第34页 |
4.1.2 仪器 | 第34页 |
4.2 方法 | 第34-39页 |
4.2.1 IFN-ω7基因的设计与合成 | 第34页 |
4.2.2 重组质粒的验证 | 第34-35页 |
4.2.3 重组质粒pET-30a(+)-IFN-ω7的诱导表达 | 第35页 |
4.2.4 IFN-ω7蛋白的Western-blot验证 | 第35-36页 |
4.2.5 蛋白纯化 | 第36页 |
4.2.6 目的蛋白透析复性 | 第36页 |
4.2.7 抗病毒活性的鉴定 | 第36-38页 |
4.2.8 荧光定量测定IFN-ω7诱导ISG基因的表达 | 第38-39页 |
4.3 实验结果 | 第39-43页 |
4.3.1 重组质粒的构建 | 第39页 |
4.3.2 重组PoIFN-ω7蛋白的诱导表达 | 第39页 |
4.3.3 重组PoIFN-ω7蛋白的纯化与westernblot鉴定 | 第39-40页 |
4.3.4 在病毒感染前IFN-ω7处理细胞对FMDV感染的影响 | 第40-41页 |
4.3.5 在病毒感染后IFN-ω7处理细胞对FMDV感染的影响 | 第41-42页 |
4.3.6 PoIFN-ω7诱导ISG的活性 | 第42-43页 |
4.4 讨论 | 第43-44页 |
第五章 干扰素DELTA,ALPHAOMEGA的抗口蹄疫病毒活性研究 | 第44-55页 |
5.1 材料 | 第44页 |
5.2 方法 | 第44-46页 |
5.2.1 IFN-δ8,IFN-αω基因的合成、克隆 | 第44页 |
5.2.2 重组质粒的验证 | 第44页 |
5.2.3 重组质粒的诱导表达 | 第44页 |
5.2.4 重组蛋白的Western-blot验证 | 第44页 |
5.2.5 蛋白纯化 | 第44-45页 |
5.2.6 蛋白复性 | 第45页 |
5.2.7 抗病毒活性的鉴定 | 第45-46页 |
5.2.8 荧光定量测定干扰素诱导ISG基因的表达 | 第46页 |
5.2.9 IFN-αω诱导形式的确定 | 第46页 |
5.2.10 统计学方法 | 第46页 |
5.3 实验结果 | 第46-53页 |
5.3.1 重组质粒的构建 | 第46-48页 |
5.3.2 重组IFN-δ8,IFN-αω蛋白的诱导表达分析 | 第48页 |
5.3.3 重组IFN-δ8,IFN-αω蛋白的纯化 | 第48-49页 |
5.3.4 在病毒感染前用IFN处理对FMDV感染的影响 | 第49-50页 |
5.3.5 在病毒感染后用IFN处理对FMDV感染的影响 | 第50-51页 |
5.3.6 IFN-δ8的抗A型FMDV活性 | 第51页 |
5.3.7 IFN-αω的表达形式 | 第51-52页 |
5.3.8 IFN-δ8,IFN-αω诱导ISG的活性 | 第52-53页 |
5.4 讨论 | 第53-55页 |
第六章 全文结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简历 | 第64页 |