摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-22页 |
1.1 水貂阿留申病毒概述 | 第14-16页 |
1.1.1 AMDV的分子生物学特性 | 第14-15页 |
1.1.2 AMDV的致病机理 | 第15页 |
1.1.3 AD的流行病学 | 第15页 |
1.1.4 AD的诊断 | 第15-16页 |
1.1.5 AD的防治 | 第16页 |
1.2 适配体的概述 | 第16-21页 |
1.2.1 SELEX技术 | 第17页 |
1.2.2 适配体的特点 | 第17-18页 |
1.2.3 适配体的筛选方法 | 第18-19页 |
1.2.4 适配体的应用 | 第19-21页 |
展望 | 第21-22页 |
第二章 水貂阿留申病毒VP2蛋白适配体的筛选 | 第22-32页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.1.1 蛋白与主要试剂 | 第22页 |
2.1.2 主要仪器 | 第22页 |
2.1.3 试剂的配制 | 第22页 |
2.2 方法 | 第22-27页 |
2.2.1 蛋白偶联磁珠 | 第22-23页 |
2.2.2 文库的构建及引物合成 | 第23页 |
2.2.3 PCR扩增条件的优化 | 第23-24页 |
2.2.4 水貂阿留申病毒VP2蛋白适配体的筛选 | 第24-26页 |
2.2.5 流式监测筛选过程 | 第26页 |
2.2.6 高通量测序分析 | 第26-27页 |
2.3 结果 | 第27-30页 |
2.3.1 蛋白偶联磁珠 | 第27-28页 |
2.3.2 PCR扩增条件的优化结果 | 第28页 |
2.3.3 水貂阿留申病毒VP2蛋白适配体的筛选 | 第28-29页 |
2.3.4 流式监测筛选过程 | 第29页 |
2.3.5 高通量测序结果分析 | 第29-30页 |
2.4 讨论 | 第30-32页 |
第三章 AMDV VP2蛋白适配体的特性及结构分析 | 第32-38页 |
3.1 材料 | 第32页 |
3.1.1 蛋白、病毒与抗体 | 第32页 |
3.1.2 主要试剂与仪器 | 第32页 |
3.1.3 试剂的配制 | 第32页 |
3.2 方法 | 第32-34页 |
3.2.1 适配体序列的合成 | 第32页 |
3.2.2 适配体与AMDV VP2蛋白的亲和力分析 | 第32-33页 |
3.2.3 适配体与AMDV VP2蛋白的特异性分析 | 第33页 |
3.2.4 优势适配体与AMDV标准抗原的亲和力分析 | 第33页 |
3.2.5 优势适配体的结构分析 | 第33-34页 |
3.3 结果 | 第34-37页 |
3.3.1 适配体与AMDV VP2蛋白的亲和力分析结果 | 第34-35页 |
3.3.2 适配体与AMDV VP2蛋白的特异性分析结果 | 第35-36页 |
3.3.3 优势适配体与AMDV标准抗原的亲和力分析结果 | 第36页 |
3.3.4 优势适配体的结构分析结果 | 第36-37页 |
3.4 讨论 | 第37-38页 |
第四章 DAS-ELOSA检测的建立 | 第38-44页 |
4.1 材料 | 第38页 |
4.1.1 细胞、病毒、抗体与实验动物 | 第38页 |
4.1.2 主要试剂与仪器 | 第38页 |
4.2 方法 | 第38-40页 |
4.2.1 单克隆抗体的选择 | 第38-39页 |
4.2.2 腹水的制备与纯化 | 第39页 |
4.2.3 反应条件的优化 | 第39-40页 |
4.2.4 判定标准的确定 | 第40页 |
4.2.5 特异性分析 | 第40页 |
4.2.6 敏感性分析 | 第40页 |
4.2.7 符合率分析 | 第40页 |
4.3 结果 | 第40-43页 |
4.3.1 单克隆抗体的选择结果 | 第40-41页 |
4.3.2 腹水的制备与纯化结果 | 第41-42页 |
4.3.3 条件优化结果 | 第42页 |
4.3.4 判定标准的确定 | 第42页 |
4.3.5 特异性分析结果 | 第42页 |
4.3.6 敏感性分析结果 | 第42-43页 |
4.3.7 符合率分析结果 | 第43页 |
4.4 讨论 | 第43-44页 |
第五章 适配体对病毒复制的影响 | 第44-51页 |
5.1 材料 | 第44页 |
5.1.1 病毒、抗体与细胞 | 第44页 |
5.1.2 主要试剂 | 第44页 |
5.1.3 主要仪器 | 第44页 |
5.2 方法 | 第44-46页 |
5.2.1 AMDV-Utah株感染体系建立 | 第44页 |
5.2.2 AMDV实时荧光定量PCR扩增 | 第44-45页 |
5.2.3 MTT试验 | 第45页 |
5.2.4 细胞水平适配体对病毒复制的影响 | 第45-46页 |
5.2.5 优势适配体的特性及结构分析 | 第46页 |
5.3 结果 | 第46-50页 |
5.3.1 AMDV-Utah株感染体系建立 | 第46-47页 |
5.3.2 AMDV实时荧光定量PCR扩增 | 第47-48页 |
5.3.3 MTT试验 | 第48-49页 |
5.3.4 细胞水平适配体对病毒复制的影响 | 第49页 |
5.3.5 优势适配体的特性及结构分析结果 | 第49-50页 |
5.4 讨论 | 第50-51页 |
第六章 全文结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简历 | 第59页 |