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水貂阿留申病毒VP2蛋白适配体的筛选与初步应用研究

摘要第6-7页
abstract第7-8页
英文缩略表第13-14页
第一章 引言第14-22页
    1.1 水貂阿留申病毒概述第14-16页
        1.1.1 AMDV的分子生物学特性第14-15页
        1.1.2 AMDV的致病机理第15页
        1.1.3 AD的流行病学第15页
        1.1.4 AD的诊断第15-16页
        1.1.5 AD的防治第16页
    1.2 适配体的概述第16-21页
        1.2.1 SELEX技术第17页
        1.2.2 适配体的特点第17-18页
        1.2.3 适配体的筛选方法第18-19页
        1.2.4 适配体的应用第19-21页
    展望第21-22页
第二章 水貂阿留申病毒VP2蛋白适配体的筛选第22-32页
    2.1 材料第22页
        2.1.1 蛋白与主要试剂第22页
        2.1.2 主要仪器第22页
        2.1.3 试剂的配制第22页
    2.2 方法第22-27页
        2.2.1 蛋白偶联磁珠第22-23页
        2.2.2 文库的构建及引物合成第23页
        2.2.3 PCR扩增条件的优化第23-24页
        2.2.4 水貂阿留申病毒VP2蛋白适配体的筛选第24-26页
        2.2.5 流式监测筛选过程第26页
        2.2.6 高通量测序分析第26-27页
    2.3 结果第27-30页
        2.3.1 蛋白偶联磁珠第27-28页
        2.3.2 PCR扩增条件的优化结果第28页
        2.3.3 水貂阿留申病毒VP2蛋白适配体的筛选第28-29页
        2.3.4 流式监测筛选过程第29页
        2.3.5 高通量测序结果分析第29-30页
    2.4 讨论第30-32页
第三章 AMDV VP2蛋白适配体的特性及结构分析第32-38页
    3.1 材料第32页
        3.1.1 蛋白、病毒与抗体第32页
        3.1.2 主要试剂与仪器第32页
        3.1.3 试剂的配制第32页
    3.2 方法第32-34页
        3.2.1 适配体序列的合成第32页
        3.2.2 适配体与AMDV VP2蛋白的亲和力分析第32-33页
        3.2.3 适配体与AMDV VP2蛋白的特异性分析第33页
        3.2.4 优势适配体与AMDV标准抗原的亲和力分析第33页
        3.2.5 优势适配体的结构分析第33-34页
    3.3 结果第34-37页
        3.3.1 适配体与AMDV VP2蛋白的亲和力分析结果第34-35页
        3.3.2 适配体与AMDV VP2蛋白的特异性分析结果第35-36页
        3.3.3 优势适配体与AMDV标准抗原的亲和力分析结果第36页
        3.3.4 优势适配体的结构分析结果第36-37页
    3.4 讨论第37-38页
第四章 DAS-ELOSA检测的建立第38-44页
    4.1 材料第38页
        4.1.1 细胞、病毒、抗体与实验动物第38页
        4.1.2 主要试剂与仪器第38页
    4.2 方法第38-40页
        4.2.1 单克隆抗体的选择第38-39页
        4.2.2 腹水的制备与纯化第39页
        4.2.3 反应条件的优化第39-40页
        4.2.4 判定标准的确定第40页
        4.2.5 特异性分析第40页
        4.2.6 敏感性分析第40页
        4.2.7 符合率分析第40页
    4.3 结果第40-43页
        4.3.1 单克隆抗体的选择结果第40-41页
        4.3.2 腹水的制备与纯化结果第41-42页
        4.3.3 条件优化结果第42页
        4.3.4 判定标准的确定第42页
        4.3.5 特异性分析结果第42页
        4.3.6 敏感性分析结果第42-43页
        4.3.7 符合率分析结果第43页
    4.4 讨论第43-44页
第五章 适配体对病毒复制的影响第44-51页
    5.1 材料第44页
        5.1.1 病毒、抗体与细胞第44页
        5.1.2 主要试剂第44页
        5.1.3 主要仪器第44页
    5.2 方法第44-46页
        5.2.1 AMDV-Utah株感染体系建立第44页
        5.2.2 AMDV实时荧光定量PCR扩增第44-45页
        5.2.3 MTT试验第45页
        5.2.4 细胞水平适配体对病毒复制的影响第45-46页
        5.2.5 优势适配体的特性及结构分析第46页
    5.3 结果第46-50页
        5.3.1 AMDV-Utah株感染体系建立第46-47页
        5.3.2 AMDV实时荧光定量PCR扩增第47-48页
        5.3.3 MTT试验第48-49页
        5.3.4 细胞水平适配体对病毒复制的影响第49页
        5.3.5 优势适配体的特性及结构分析结果第49-50页
    5.4 讨论第50-51页
第六章 全文结论第51-52页
参考文献第52-58页
致谢第58-59页
作者简历第59页

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