| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 前言 | 第9-16页 |
| 1.1 磷素的利用状况 | 第9页 |
| 1.2 溶磷微生物 | 第9-10页 |
| 1.3 溶磷菌的利用现状 | 第10-13页 |
| 1.3.1 溶磷菌的分布与数量研究 | 第10-11页 |
| 1.3.2 溶磷菌的应用 | 第11-12页 |
| 1.3.3 溶磷菌应用的影响因素 | 第12-13页 |
| 1.4 溶磷菌溶磷机制研究现状 | 第13-15页 |
| 1.4.1 有机酸的溶磷作用 | 第13页 |
| 1.4.2 酶的研究 | 第13-14页 |
| 1.4.3 溶磷菌溶磷相关基因的研究 | 第14-15页 |
| 1.5 目的与意义 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-28页 |
| 2.1 材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 土壤 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 仪器 | 第16页 |
| 2.1.4 培养基的配制 | 第16-17页 |
| 2.1.5 供试引物 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-28页 |
| 2.2.1 土壤采集 | 第17页 |
| 2.2.2 菌株的分离 | 第17-18页 |
| 2.2.3 菌株的鉴定 | 第18页 |
| 2.2.4 菌株溶磷培养基的优化 | 第18-19页 |
| 2.2.5 溶磷过程中pH值变化及有机酸测定 | 第19-20页 |
| 2.2.6 酶活测定 | 第20-21页 |
| 2.2.7 GDH的克隆与序列分析 | 第21-25页 |
| 2.2.8 假单胞菌wj1和肠杆菌wj3 GDH基因的qPCR测定 | 第25-28页 |
| 第三章 结果与分析 | 第28-57页 |
| 3.1 菌株的分离、鉴定与溶磷能力分析 | 第28-35页 |
| 3.1.1 菌株的分离、纯化 | 第28页 |
| 3.1.2 菌株的鉴定 | 第28-31页 |
| 3.1.3 菌株最佳溶磷培养条件的确定 | 第31-33页 |
| 3.1.4 菌株溶磷能力分析 | 第33-35页 |
| 3.2 不同菌株产有机酸分析 | 第35-40页 |
| 3.2.1 甲基红显色反应 | 第35-36页 |
| 3.2.2 菌株在LB和优化的NBRIP液体培养中pH值变化 | 第36-37页 |
| 3.2.3 不同pH的LB液体培养基中菌株生长量变化 | 第37页 |
| 3.2.4 有机酸分析 | 第37-40页 |
| 3.3 溶磷过程中不同酶活的测定 | 第40-43页 |
| 3.3.1 磷酸酶活性测定 | 第40页 |
| 3.3.2 GDH酶活测定 | 第40-43页 |
| 3.4 GDH基因的克隆与序列分析 | 第43-52页 |
| 3.4.1 不同溶磷菌基因组的提取 | 第43-44页 |
| 3.4.2 4 种不同溶磷菌GDH基因的克隆 | 第44-45页 |
| 3.4.3 测序结果及序列分析 | 第45-52页 |
| 3.5 假单胞菌wj1和肠杆菌wj3 GDH基因相对表达量分析 | 第52-57页 |
| 3.5.1 两种溶磷菌总RNA提取 | 第52-53页 |
| 3.5.2 96h内两种菌GDH基因相对表达量分析 | 第53页 |
| 3.5.3 不同磷源的NBRIP培养基中GDH基因相对表达量分析 | 第53-55页 |
| 3.5.4 不同pH值NBRIP培养基中GDH基因相对表达量分析 | 第55-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 作者简介 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
