| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-22页 |
| ·小肽吸收的研究进展 | 第11-15页 |
| ·蛋白质消化吸收理论的变迁 | 第11-12页 |
| ·肽的吸收机制 | 第12-13页 |
| ·肽的组织利用 | 第13页 |
| ·肽吸收的意义 | 第13-14页 |
| ·PepTⅠ对小肽的转运及其重要性 | 第14-15页 |
| ·PepTⅠ分子生物学研究进展 | 第15-17页 |
| ·PepTⅠ基因克隆及氨基酸序列研究 | 第15-16页 |
| ·PepTⅠ蛋白结构 | 第16-17页 |
| ·PepTⅠ活性表达的影响因素及调控 | 第17-19页 |
| ·肠段差异性 | 第17页 |
| ·发育性变化 | 第17-18页 |
| ·营养环境 | 第18页 |
| ·其他因素 | 第18-19页 |
| ·PepTⅠ表达量检测的方法 | 第19页 |
| ·相关抗体的制备及在免疫组化中的应用 | 第19-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 bPepTⅠ基因部分片段克隆和原核表达 | 第22-52页 |
| ·材料和方法 | 第22-36页 |
| ·菌株与质粒 | 第22-23页 |
| ·仪器和试剂 | 第23-24页 |
| ·主要溶液的配制 | 第24-26页 |
| ·样品的采集 | 第26页 |
| ·样品总RNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR 扩增目的片段 | 第27-29页 |
| ·GST-BP 和His-BP 原核表达载体的构建 | 第29-33页 |
| ·重组质粒的原核表达与鉴定 | 第33-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-47页 |
| ·BP 基因片段的RT-PCR 扩增结果及分析 | 第36-37页 |
| ·目的片段与载体酶切回收结果 | 第37-39页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组质粒目的基因的序列测定 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白的表达与鉴定 | 第41-47页 |
| ·讨论 | 第47-51页 |
| ·bPepTⅠ基因特异性片段的筛选 | 第47-48页 |
| ·外源蛋白表达条件的优化 | 第48-49页 |
| ·包涵体的形成与提纯 | 第49-50页 |
| ·免疫印迹法 | 第50-51页 |
| ·结论 | 第51-52页 |
| 3 多克隆抗体的制备与鉴定 | 第52-61页 |
| ·材料和方法 | 第52-56页 |
| ·试剂及试剂盒 | 第52页 |
| ·试验动物 | 第52页 |
| ·主要材料和仪器 | 第52页 |
| ·试验主要用液的配制 | 第52-53页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第53-54页 |
| ·Western-blotting 检测多抗特异性 | 第54页 |
| ·免疫血清效价测定 | 第54-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-58页 |
| ·多克隆抗体的Westernblot 检测 | 第56页 |
| ·最佳抗原包被浓度和抗体稀释度的确定 | 第56-57页 |
| ·抗体效价的检测 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·重组抗原技术制备抗体 | 第58页 |
| ·抗体制备的影响因素 | 第58-59页 |
| ·抗体特异性检测的方法 | 第59-60页 |
| ·结论 | 第60-61页 |
| 4 本研究的总体结论与创新之处 | 第61-62页 |
| ·总体结论 | 第61页 |
| ·本研究创新之处 | 第61页 |
| ·需要进一步解决的问题 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-74页 |
| 致谢 | 第74页 |