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酚氧化酶介导的免疫防御参与小菜蛾对双酰胺类杀虫剂抗性机理初探

中文摘要第8-9页
Abstract第9页
1 前言第10-25页
    1.1 酚氧化酶简介第10-19页
        1.1.1 酚氧化酶的组织定位第10-11页
        1.1.2 酚氧化酶的功能第11-13页
        1.1.3 酚氧化酶活化的分子机制第13-15页
        1.1.4 酚氧化酶的分子生物学研究第15-17页
        1.1.5 酚氧化酶的抑制剂研究第17-19页
    1.2 小菜蛾抗双酰胺类杀虫剂的研究进展第19-22页
        1.2.1 小菜蛾的发生及危害第19页
        1.2.2 双酰胺类杀虫剂的研究进展第19-22页
    1.3 选题目的和意义第22-24页
    1.4 本研究的技术路线第24-25页
2 材料与方法第25-35页
    2.1 试虫饲养第25页
    2.2 试剂及仪器设备第25-26页
        2.2.1 主要试剂第25页
        2.2.2 主要仪器及设备第25-26页
    2.3 小菜蛾血淋巴的收集第26页
    2.4 小菜蛾总RNA的提取、鉴定及cDNA的合成第26-28页
        2.4.1 小菜蛾总RNA的提取第26-27页
        2.4.2 小菜蛾总RNA的检测第27页
        2.4.3 小菜蛾第一链cDNA合成第27-28页
    2.5 荧光定量PCR(Real-time-PCR)第28-29页
    2.6 小菜蛾总蛋白的提取及浓度标定第29-31页
        2.6.1 小菜蛾总蛋白的提取第29-30页
        2.6.2 蛋白浓度的标定第30-31页
    2.7 SDS-PAGE电泳第31页
        2.7.1 凝胶制备第31页
        2.7.2 上样第31页
        2.7.3 电泳第31页
    2.8 WesternBlot第31-33页
        2.8.1 转膜第31-32页
        2.8.2 免疫反应第32页
        2.8.3 ECL发光显影第32-33页
        2.8.4 凝胶图像分析第33页
    2.9 小菜蛾酶活力测定第33页
        2.9.1 小菜蛾酚氧化酶提取第33页
        2.9.2 小菜蛾酚氧化酶酶活力测定方法第33页
    2.10 三种化合物对小菜蛾酚氧化酶活力的影响第33-35页
        2.10.1 三种化合物对小菜蛾酚氧化酶活力的影响第33-34页
        2.10.2 化合物根皮苷对小菜蛾酚氧化酶抑制效应的测定第34页
        2.10.3 化合物根皮苷对小菜蛾酚氧化酶的抑制类型及抑制常数第34-35页
3 结果与分析第35-42页
    3.1 小菜蛾总RNA的提取第35页
    3.2 敏感与抗性小菜蛾酚氧化酶活性的差异第35-36页
    3.3 敏感与抗性品系小菜蛾酚氧化酶的表达研究第36-37页
        3.3.1 PxPPO1的表达研究第36-37页
        3.3.2 PxPPO2的表达研究第37页
    3.4 抗性品系/种群小菜蛾PPO蛋白含量第37-39页
        3.4.1 抗性品系/种群小菜蛾PPO1蛋白含量第37-38页
        3.4.2 抗性品系/种群小菜蛾PPO2蛋白含量第38-39页
    3.5 三种化合物对小菜蛾酚氧化酶酶活力影响第39-42页
        3.5.1 三种化合物对小菜蛾酚氧化酶酶活力影响第39-40页
        3.5.2 根皮苷对小菜蛾酚氧化酶的抑制效应第40-41页
        3.5.3 根皮苷对小菜蛾PO的抑制类型及抑制常数第41-42页
4 讨论第42-46页
    4.1 不同品系小菜蛾的酚氧化酶酶活力第42页
    4.2 不同品系小菜蛾酚氧化酶基因表达量的检测第42-43页
    4.3 不同品系小菜蛾PPO1、PPO2翻译表达量的检测第43-44页
    4.4 三种化合物对小菜蛾酚氧化酶酶活力的影响第44页
    4.5 化合物根皮苷对小菜蛾酚氧化酶酶活力的动力学研究第44-46页
5 结论第46-47页
参考文献第47-57页
致谢第57页

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