中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-29页 |
1.1 根结线虫的分类 | 第13-16页 |
1.2 根结线虫的危害 | 第16-19页 |
1.3 根结线虫生物防治方法 | 第19-22页 |
1.3.1 生物防治的一般定义 | 第19-20页 |
1.3.2 真菌作为BCA防治根结线虫 | 第20-22页 |
1.3.2.1 捕食性真菌 | 第20-21页 |
1.3.2.2 卵寄生真菌 | 第21页 |
1.3.2.3 具有黏性孢子的食线虫真菌 | 第21页 |
1.3.2.4 丛枝菌根内生真菌 | 第21页 |
1.3.2.5 微生物毒素 | 第21-22页 |
1.3.2.6 拮抗根结线虫的放线菌 | 第22页 |
1.3.2.7 拮抗根结线虫的细菌 | 第22页 |
1.3.2.8 其它生物体 | 第22页 |
1.4 生物防治药剂的主要审批机构 | 第22-23页 |
1.4.1 美国国家环境保护局(EPA) | 第23页 |
1.4.2 法国农业部和渔业部 | 第23页 |
1.4.3 有机物质评估研究所(OMRI) | 第23页 |
1.5 生防药剂市场 | 第23-27页 |
1.5.1 市场上的主要的防治根结线虫的真菌产品 | 第24-26页 |
1.5.1.1 BIO-ACT?/MELOCONWG | 第24页 |
1.5.1.2 BOTANIGARD?;MYCOTROL? | 第24-25页 |
1.5.1.3 BIOSTAT? | 第25页 |
1.5.1.4 MYCOTAL? | 第25页 |
1.5.1.5 TRIANUM? | 第25-26页 |
1.5.1.6 MET52? | 第26页 |
1.5.1.7 NEMAXXIONBIOL? | 第26页 |
1.5.1.8 REMG? | 第26页 |
1.5.2 流体态发酵产品 | 第26页 |
1.5.3 固态发酵产品 | 第26-27页 |
1.5.4 生防药剂的配方 | 第27页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
1.7 研究内容 | 第28-29页 |
2 材料与方法 | 第29-42页 |
2.1 试验材料 | 第29-31页 |
2.1.1 用于分菌的试验样品 | 第29页 |
2.1.2 靶标线虫 | 第29页 |
2.1.3 培养基 | 第29-30页 |
2.1.4 线虫染色材料 | 第30页 |
2.1.5 主要试剂 | 第30-31页 |
2.2 主要仪器 | 第31页 |
2.3 试验方法 | 第31-42页 |
2.3.1 样品分菌 | 第31-32页 |
2.3.1.1 芽孢菌的筛选 | 第31页 |
2.3.1.2 放线菌的筛选 | 第31-32页 |
2.3.2 土壤灭菌及番茄育苗 | 第32页 |
2.3.3 南方根结线虫二龄幼虫和根结线虫虫卵的获得 | 第32页 |
2.3.4 细菌发酵液的制备 | 第32页 |
2.3.5 放线菌发酵液的制备 | 第32页 |
2.3.6 杀线虫菌株触杀初筛 | 第32-33页 |
2.3.7 杀线虫菌株挥发性气体(VOC)抑制线虫试验 | 第33-34页 |
2.3.8 发酵液对线虫侵染活性的影响 | 第34-35页 |
2.3.8.1 根结线虫的处理 | 第34页 |
2.3.8.2 番茄植株的处理 | 第34-35页 |
2.3.8.3 番茄根部的染色 | 第35页 |
2.3.9 生防细菌发酵液对线虫胚胎发育影响 | 第35页 |
2.3.10 生防细菌发酵上清液对南方根结线虫二龄幼虫活性的影响 | 第35-36页 |
2.3.11 生防细菌的盆栽验证试验 | 第36-39页 |
2.3.11.1 灭菌土壤、番茄幼苗及二龄幼虫悬液的准备 | 第36页 |
2.3.11.2 发酵液的制备 | 第36页 |
2.3.11.3 试验设计 | 第36-37页 |
2.3.11.4 土壤虫口密度统计方法 | 第37-38页 |
2.3.11.5 生防菌对南方根结线虫防效的评定方法 | 第38-39页 |
2.3.12 生防细菌对根结线虫致死率及盆栽试验结果的数据分析 | 第39页 |
2.3.13 根结线虫生防细菌的形态学鉴定 | 第39页 |
2.3.14 三株根结线虫生防细菌的生理生化试验 | 第39页 |
2.3.15 三株根结线虫生防细菌的分子生物学鉴定 | 第39-42页 |
2.3.15.1 基因组DNA的提取 | 第39-40页 |
2.3.15.2 目的片段的扩增 | 第40-42页 |
3 结果与分析 | 第42-62页 |
3.1 从试验样品中初步分离生防菌株 | 第42页 |
3.2 南方根结线虫的活性验证 | 第42页 |
3.3 使用菌株发酵液对南方根结线虫的触杀试验 | 第42-45页 |
3.3.1 细菌发酵液对南方根结线虫幼虫的致死率 | 第42-44页 |
3.3.2 放线菌发酵液对南方根结线虫幼虫的致死率 | 第44-45页 |
3.4 杀线虫菌株挥发性气体(VOC)抑制南方根结线虫幼虫试验 | 第45-46页 |
3.4.1 细菌挥发性气体抑制南方根结线虫幼虫试验 | 第45页 |
3.4.2 放线菌挥发性气体抑制线虫试验 | 第45-46页 |
3.5 生防菌株发酵液对根结线虫侵染活性的影响 | 第46-49页 |
3.6 生防细菌发酵液对根结线虫胚胎发育的影响 | 第49-51页 |
3.6.1 南方根结线虫胚胎发育的过程 | 第49页 |
3.6.2 生防细菌发酵液处理卵囊后对线虫胚胎发育的影响 | 第49-50页 |
3.6.3 电子显微镜观察生防细菌发酵液处理卵囊后虫卵卵壳特征 | 第50-51页 |
3.7 生防细菌发酵上清液对南方根结线虫二龄幼虫的杀虫效果 | 第51-53页 |
3.7.1 生防细菌发酵上清液对南方根结线虫二龄幼虫(J2)的致死率 | 第51-52页 |
3.7.2 生防细菌发酵上清液在不同振荡培养时间对南方根结线虫二龄幼虫的致死率 | 第52-53页 |
3.8 生防细菌发酵液防治南方根结线虫盆栽试验 | 第53-57页 |
3.8.1 生防细菌发酵液灌根对南方根结线虫防治效果的盆栽试验 | 第53-55页 |
3.8.2 生防细菌发酵液处理含有南方根结线虫虫土试验 | 第55-57页 |
3.9 杀线虫生防细菌的鉴定 | 第57-62页 |
3.9.1 三株生防细菌的形态学鉴定 | 第57-59页 |
3.9.2 三株生防细菌的生理生化试验 | 第59-60页 |
3.9.3 三株生防细菌的16SrDNA分子鉴定 | 第60-62页 |
4 讨论 | 第62-64页 |
5 结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
致谢 | 第72页 |