| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 符号说明 | 第10-12页 |
| 第一章 无脊椎动物的先天免疫系统 | 第12-22页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 一、细胞免疫 | 第13-14页 |
| 1、细胞吞噬作用 | 第13页 |
| 2、细胞包囊作用 | 第13-14页 |
| 二、体液免疫 | 第14-20页 |
| 1、抗氧化酶和酚氧化酶系统 | 第14页 |
| 2、抗菌肽 | 第14-16页 |
| 3、先天免疫相关信号途径 | 第16-20页 |
| 三、科学问题和解决方案 | 第20-22页 |
| 第二章 日本囊对虾Toll途径进化保守信号介导因子(MjECSIT1)在对虾抗菌免疫过程中的功能研究 | 第22-52页 |
| 一、前言 | 第22-23页 |
| 二、材料与方法 | 第23-36页 |
| 1、材料 | 第23-24页 |
| 1.1 实验动物及组织提取 | 第23页 |
| 1.2 载体,菌株以及病毒 | 第23页 |
| 1.3 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2、方法 | 第24-36页 |
| 2.1 总RNA的提取和cDNA的合成 | 第24页 |
| 2.2 基因克隆 | 第24-26页 |
| 2.3 序列分析 | 第26页 |
| 2.4 实时荧光定量Q-PCR | 第26-27页 |
| 2.5 重组表达、蛋白纯化以及抗体制备 | 第27-32页 |
| 2.6 双链RNA(dsRNA)的合成和对虾的体内干扰试验 | 第32-33页 |
| 2.7 对虾体内细菌清除和死亡率统计实验 | 第33页 |
| 2.8 血细胞吞噬细菌能力测定 | 第33-34页 |
| 2.9 抗菌肽重组蛋白的细菌结合试验 | 第34页 |
| 2.10 实验中所涉及引物序列 | 第34-36页 |
| 三、结果 | 第36-49页 |
| 1、MjEcsit 1基因克隆,序列分析以及进化树构建 | 第36-39页 |
| 2、MjEcsit 1在对虾各组织中呈组成型表达 | 第39-40页 |
| 3、细菌刺激上调MjEcsit 1的表达 | 第40-41页 |
| 4、体内干扰MjEcsit 1基因降低了对虾清除体内革兰氏阳性菌的能力增加了对虾的死亡率 | 第41-43页 |
| 5、体内干扰MjEcsit 1基因不影响对虾血细胞对细菌的吞噬能力 | 第43-44页 |
| 6、对虾受到革兰氏阳性菌刺激后不同抗菌肽的表达变化 | 第44-45页 |
| 7、体内干扰MjEcsit 1降低了受革兰氏阳性菌感染上调的两种抗菌肽的表达(Alf5和Alf6) | 第45-47页 |
| 8、抗脂多糖因子Alf5和Alf6参与虾体抵抗革兰氏阳性菌的免疫过程 | 第47-49页 |
| 四、讨论 | 第49-52页 |
| 第三章 日本囊对虾中Toll样受体3(MjTLR 3)基因的克隆及其功能研究 | 第52-62页 |
| 一、前言 | 第52-53页 |
| 二、材料和方法 | 第53-55页 |
| 1、实验材料 | 第53-54页 |
| 1.1 实验动物及组织提取 | 第53页 |
| 1.2 载体,菌株以及病毒 | 第53页 |
| 1.3 实验试剂 | 第53-54页 |
| 2、实验方法 | 第54-55页 |
| 2.1 总RNA的提取和cDNA的合成 | 第54页 |
| 2.2 基因克隆 | 第54页 |
| 2.3 序列分析 | 第54页 |
| 2.4 双链RNA(dsRNA)的合成和对虾的体内干扰试验 | 第54-55页 |
| 2.5 实时荧光定量Q-PCR检测 | 第55页 |
| 2.6 Western Blot实验 | 第55页 |
| 三、实验结果 | 第55-59页 |
| 1、MjTLR3基因克隆和日本囊对虾中三种Toll样受体序列分析 | 第55-57页 |
| 2、日本囊对虾中的MjTLR3-MjECSIT 1-ALF途径参与抗革兰氏阳性菌免疫过程 | 第57-59页 |
| 四、讨论 | 第59-62页 |
| 参考文献 | 第62-66页 |
| 已发表文章 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第69页 |
