摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第10-22页 |
1.1 前言 | 第10页 |
1.2 热凝胶基本性质、生产方法与应用 | 第10-14页 |
1.2.1 热凝胶基本性质 | 第10-12页 |
1.2.2 热凝胶生产方法 | 第12-13页 |
1.2.3 热凝胶应用领域 | 第13-14页 |
1.3 热凝胶寡糖的制备方法及其在植物防御响应中的作用 | 第14-17页 |
1.3.1 热凝胶寡糖的制备方法 | 第14-15页 |
1.3.2 激发子诱导植物产生防御响应 | 第15-16页 |
1.3.3 β-1,3-葡寡糖诱导植物产生防御响应的机理 | 第16-17页 |
1.4 本课题立题背景与主要研究内容 | 第17-22页 |
1.4.1 马铃薯作为植物诱抗模式植物 | 第17-18页 |
1.4.2 本研究尝试解决的问题 | 第18-20页 |
1.4.3 主要研究内容 | 第20-22页 |
第二章 溶氧水平对土壤杆菌 ATCC 31749 发酵产热凝胶流变性质和分子量的影响 | 第22-36页 |
2.1 前言 | 第22-23页 |
2.2 材料与方法 | 第23-24页 |
2.2.1 主要材料 | 第23页 |
2.2.2 主要仪器与设备 | 第23页 |
2.2.3 菌种与培养基 | 第23页 |
2.2.4 培养方法 | 第23-24页 |
2.2.5 分析方法 | 第24页 |
2.3 结果 | 第24-32页 |
2.3.1 发酵过程中通气量-溶氧水平关联控制策略 | 第24-25页 |
2.3.2 土壤杆菌 ATCC 31749 发酵动力学参数 | 第25-28页 |
2.3.3 溶氧水平对热凝胶流变性质的影响 | 第28-30页 |
2.3.4 溶氧水平对热凝胶分子量的影响 | 第30-32页 |
2.4 讨论 | 第32-35页 |
2.4.1 提高产胶期溶氧水平可以解除胞外热凝胶积累造成的溶氧扩散阻碍 | 第32-33页 |
2.4.2 溶氧水平 DO 25%时有利于提高热凝胶溶液表观粘度 | 第33-34页 |
2.4.3 表观粘度可以用于快速表征发酵过程中热凝胶性质 | 第34-35页 |
2.5 本章小结 | 第35-36页 |
第三章 两步法酸水解热凝胶制备系列β-1,3-葡寡糖的策略 | 第36-51页 |
3.1 前言 | 第36页 |
3.2 材料与方法 | 第36-38页 |
3.2.1 主要材料 | 第36-37页 |
3.2.2 主要仪器与设备 | 第37页 |
3.2.3 碱-中和处理热凝胶 | 第37页 |
3.2.4 酸水解热凝胶样品 | 第37页 |
3.2.5 两步法酸水解热凝胶样品 | 第37页 |
3.2.6 热凝胶寡糖分离与纯化 | 第37页 |
3.2.7 热凝胶寡糖鉴定 | 第37-38页 |
3.2.8 热凝胶沉降测定 | 第38页 |
3.2.9 扫描电镜观察方法 | 第38页 |
3.3 结果 | 第38-45页 |
3.3.1 采用 HPLC 方法制备热凝胶寡糖效果分析 | 第38-40页 |
3.3.2 碱-中和处理对热凝胶颗粒稳定性的影响 | 第40-41页 |
3.3.3 碱-中和处理对热凝胶颗粒均一度的影响 | 第41页 |
3.3.4 不同聚合度热凝胶寡糖浓度变化趋势 | 第41-43页 |
3.3.5 水解时间与热凝胶水解率相关性 | 第43-44页 |
3.3.6 酸预处理对寡糖得率的影响 | 第44-45页 |
3.4 讨论 | 第45-49页 |
3.4.1 HPLC 方法能够高效制备系列热凝胶β-1,3-葡寡糖 | 第45-46页 |
3.4.2 碱-中和处理提高热凝胶悬浮液稳定性 | 第46页 |
3.4.3 处理后热凝胶颗粒存在双层结构 | 第46-47页 |
3.4.4 硫酸水解对热凝胶颗粒结构模型的验证 | 第47-48页 |
3.4.5 热凝胶寡糖制备条件优化 | 第48-49页 |
3.5 本章小结 | 第49-51页 |
第四章 特异性水解热凝胶的内切β-1,3-葡聚糖酶的纯化与性质表征 | 第51-66页 |
4.1 前言 | 第51页 |
4.2 材料与方法 | 第51-55页 |
4.2.1 材料与药品 | 第51-52页 |
4.2.2 主要仪器 | 第52页 |
4.2.3 里氏木霉 GIM 3.498 发酵与粗酶制备 | 第52页 |
4.2.4 分析方法 | 第52-53页 |
4.2.5 内切β-1,3-葡聚糖酶纯化过程 | 第53-54页 |
4.2.6 内切β-1,3-葡聚糖酶性质测定 | 第54-55页 |
4.3 结果 | 第55-62页 |
4.3.1 薄层层析响应值与样品浓度相关性 | 第55页 |
4.3.2 内切β-1,3-葡聚糖酶纯化过程 | 第55-59页 |
4.3.3 Endo23 蛋白与酶学性质 | 第59-61页 |
4.3.4 Endo23 氨基酸序列测定 | 第61-62页 |
4.4 讨论 | 第62-65页 |
4.4.1 Endo23 性质与已报道内切β-1,3-葡聚糖酶存在差异 | 第62-63页 |
4.4.2 Endo23 特异性降解热凝胶原因分析 | 第63-64页 |
4.4.3 酶法与酸法水解热凝胶产物比较 | 第64-65页 |
4.5 本章小结 | 第65-66页 |
第五章 热凝胶寡糖诱导马铃薯细胞产生防御响应提高对致病疫霉抗性 | 第66-82页 |
5.1 前言 | 第66-67页 |
5.2 材料与方法 | 第67-70页 |
5.2.1 主要试剂 | 第67页 |
5.2.2 植物和病原菌培养方法 | 第67页 |
5.2.3 主要仪器 | 第67页 |
5.2.4 热凝胶β-1,3-葡寡糖制备与纯化 | 第67页 |
5.2.5 马铃薯植株的处理方法 | 第67-68页 |
5.2.6 染病情况与马铃薯产量分析 | 第68页 |
5.2.7 统计方法 | 第68页 |
5.2.8 马铃薯胞内 H2O2和水杨酸测定方法 | 第68页 |
5.2.9 胞内蛋白提取与酶活测定方法 | 第68-69页 |
5.2.10 2DE 分析方法 | 第69-70页 |
5.2.11 MALDI-TOF/TOF 质谱分析与蛋白质鉴定方法 | 第70页 |
5.3 结果 | 第70-79页 |
5.3.1 热凝胶寡糖对马铃薯叶片细胞的防御响应产生激活作用 | 第70-71页 |
5.3.2 热凝胶葡五糖是具有激活作用的最小寡糖单元 | 第71-74页 |
5.3.3 热凝胶寡糖激活马铃薯叶片细胞综合响应 | 第74-77页 |
5.3.4 热凝胶寡糖预处理有效增加马铃薯植株对致病疫霉的抗性 | 第77-79页 |
5.4 讨论 | 第79-80页 |
5.4.1 热凝胶寡糖能够激活马铃薯叶片细胞系列防御响应 | 第79页 |
5.4.2 马铃薯叶片细胞受热凝胶寡糖诱导产生综合响应 | 第79-80页 |
5.4.3 热凝胶寡糖激活马铃薯细胞的短期防御响应 | 第80页 |
5.5 本章小结 | 第80-82页 |
主要结论与展望 | 第82-84页 |
论文创新点 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-95页 |
附录 I: 作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第95-96页 |
附录 II 缩略语全称对照表 | 第96页 |