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热凝胶制备β-1,3-葡聚寡糖及其诱导抗真菌功能的研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 绪论第10-22页
    1.1 前言第10页
    1.2 热凝胶基本性质、生产方法与应用第10-14页
        1.2.1 热凝胶基本性质第10-12页
        1.2.2 热凝胶生产方法第12-13页
        1.2.3 热凝胶应用领域第13-14页
    1.3 热凝胶寡糖的制备方法及其在植物防御响应中的作用第14-17页
        1.3.1 热凝胶寡糖的制备方法第14-15页
        1.3.2 激发子诱导植物产生防御响应第15-16页
        1.3.3 β-1,3-葡寡糖诱导植物产生防御响应的机理第16-17页
    1.4 本课题立题背景与主要研究内容第17-22页
        1.4.1 马铃薯作为植物诱抗模式植物第17-18页
        1.4.2 本研究尝试解决的问题第18-20页
        1.4.3 主要研究内容第20-22页
第二章 溶氧水平对土壤杆菌 ATCC 31749 发酵产热凝胶流变性质和分子量的影响第22-36页
    2.1 前言第22-23页
    2.2 材料与方法第23-24页
        2.2.1 主要材料第23页
        2.2.2 主要仪器与设备第23页
        2.2.3 菌种与培养基第23页
        2.2.4 培养方法第23-24页
        2.2.5 分析方法第24页
    2.3 结果第24-32页
        2.3.1 发酵过程中通气量-溶氧水平关联控制策略第24-25页
        2.3.2 土壤杆菌 ATCC 31749 发酵动力学参数第25-28页
        2.3.3 溶氧水平对热凝胶流变性质的影响第28-30页
        2.3.4 溶氧水平对热凝胶分子量的影响第30-32页
    2.4 讨论第32-35页
        2.4.1 提高产胶期溶氧水平可以解除胞外热凝胶积累造成的溶氧扩散阻碍第32-33页
        2.4.2 溶氧水平 DO 25%时有利于提高热凝胶溶液表观粘度第33-34页
        2.4.3 表观粘度可以用于快速表征发酵过程中热凝胶性质第34-35页
    2.5 本章小结第35-36页
第三章 两步法酸水解热凝胶制备系列β-1,3-葡寡糖的策略第36-51页
    3.1 前言第36页
    3.2 材料与方法第36-38页
        3.2.1 主要材料第36-37页
        3.2.2 主要仪器与设备第37页
        3.2.3 碱-中和处理热凝胶第37页
        3.2.4 酸水解热凝胶样品第37页
        3.2.5 两步法酸水解热凝胶样品第37页
        3.2.6 热凝胶寡糖分离与纯化第37页
        3.2.7 热凝胶寡糖鉴定第37-38页
        3.2.8 热凝胶沉降测定第38页
        3.2.9 扫描电镜观察方法第38页
    3.3 结果第38-45页
        3.3.1 采用 HPLC 方法制备热凝胶寡糖效果分析第38-40页
        3.3.2 碱-中和处理对热凝胶颗粒稳定性的影响第40-41页
        3.3.3 碱-中和处理对热凝胶颗粒均一度的影响第41页
        3.3.4 不同聚合度热凝胶寡糖浓度变化趋势第41-43页
        3.3.5 水解时间与热凝胶水解率相关性第43-44页
        3.3.6 酸预处理对寡糖得率的影响第44-45页
    3.4 讨论第45-49页
        3.4.1 HPLC 方法能够高效制备系列热凝胶β-1,3-葡寡糖第45-46页
        3.4.2 碱-中和处理提高热凝胶悬浮液稳定性第46页
        3.4.3 处理后热凝胶颗粒存在双层结构第46-47页
        3.4.4 硫酸水解对热凝胶颗粒结构模型的验证第47-48页
        3.4.5 热凝胶寡糖制备条件优化第48-49页
    3.5 本章小结第49-51页
第四章 特异性水解热凝胶的内切β-1,3-葡聚糖酶的纯化与性质表征第51-66页
    4.1 前言第51页
    4.2 材料与方法第51-55页
        4.2.1 材料与药品第51-52页
        4.2.2 主要仪器第52页
        4.2.3 里氏木霉 GIM 3.498 发酵与粗酶制备第52页
        4.2.4 分析方法第52-53页
        4.2.5 内切β-1,3-葡聚糖酶纯化过程第53-54页
        4.2.6 内切β-1,3-葡聚糖酶性质测定第54-55页
    4.3 结果第55-62页
        4.3.1 薄层层析响应值与样品浓度相关性第55页
        4.3.2 内切β-1,3-葡聚糖酶纯化过程第55-59页
        4.3.3 Endo23 蛋白与酶学性质第59-61页
        4.3.4 Endo23 氨基酸序列测定第61-62页
    4.4 讨论第62-65页
        4.4.1 Endo23 性质与已报道内切β-1,3-葡聚糖酶存在差异第62-63页
        4.4.2 Endo23 特异性降解热凝胶原因分析第63-64页
        4.4.3 酶法与酸法水解热凝胶产物比较第64-65页
    4.5 本章小结第65-66页
第五章 热凝胶寡糖诱导马铃薯细胞产生防御响应提高对致病疫霉抗性第66-82页
    5.1 前言第66-67页
    5.2 材料与方法第67-70页
        5.2.1 主要试剂第67页
        5.2.2 植物和病原菌培养方法第67页
        5.2.3 主要仪器第67页
        5.2.4 热凝胶β-1,3-葡寡糖制备与纯化第67页
        5.2.5 马铃薯植株的处理方法第67-68页
        5.2.6 染病情况与马铃薯产量分析第68页
        5.2.7 统计方法第68页
        5.2.8 马铃薯胞内 H2O2和水杨酸测定方法第68页
        5.2.9 胞内蛋白提取与酶活测定方法第68-69页
        5.2.10 2DE 分析方法第69-70页
        5.2.11 MALDI-TOF/TOF 质谱分析与蛋白质鉴定方法第70页
    5.3 结果第70-79页
        5.3.1 热凝胶寡糖对马铃薯叶片细胞的防御响应产生激活作用第70-71页
        5.3.2 热凝胶葡五糖是具有激活作用的最小寡糖单元第71-74页
        5.3.3 热凝胶寡糖激活马铃薯叶片细胞综合响应第74-77页
        5.3.4 热凝胶寡糖预处理有效增加马铃薯植株对致病疫霉的抗性第77-79页
    5.4 讨论第79-80页
        5.4.1 热凝胶寡糖能够激活马铃薯叶片细胞系列防御响应第79页
        5.4.2 马铃薯叶片细胞受热凝胶寡糖诱导产生综合响应第79-80页
        5.4.3 热凝胶寡糖激活马铃薯细胞的短期防御响应第80页
    5.5 本章小结第80-82页
主要结论与展望第82-84页
论文创新点第84-85页
致谢第85-86页
参考文献第86-95页
附录 I: 作者在攻读博士学位期间发表的论文第95-96页
附录 II 缩略语全称对照表第96页

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