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苹果小吉丁虫对寄主植物挥发物的行为反应及嗅觉相关基因功能研究

摘要第5-8页
abstract第8-11页
第一章 文献综述第16-29页
    1.1 寄主植物挥发物第16-18页
        1.1.1 寄主植物挥发物对昆虫行为的影响第16页
        1.1.2 昆虫对气味物质的嗅觉反应机制第16-18页
    1.2 昆虫嗅觉相关基因研究第18-26页
        1.2.1 昆虫触角基因组和转录组研究第18-20页
        1.2.2 气味结合蛋白第20-22页
        1.2.3 化学感受蛋白第22-23页
        1.2.4 气味受体第23-24页
        1.2.5 离子受体第24-25页
        1.2.6 感觉神经元膜蛋白第25-26页
    1.3 苹果小吉丁虫研究进展第26-27页
        1.3.1 苹果小吉丁虫概述第26页
        1.3.2 苹果小吉丁虫防治第26-27页
    1.4 本研究目的和意义第27-29页
第二章 苹果小吉丁虫对四种植物的偏好性及相关挥发物分析第29-43页
    2.1 材料与方法第29-31页
        2.1.1 供试昆虫和植物第29页
        2.1.2 主要仪器第29-30页
        2.1.3 主要试剂第30页
        2.1.4 苹果小吉丁虫对4种植物的选择偏好性第30页
        2.1.5 苹果小吉丁虫对4种植物叶片的取食量第30页
        2.1.6 植物挥发物采集和化合物组分鉴定第30-31页
    2.2 结果与分析第31-41页
        2.2.1 苹果小吉丁虫对四种植物的选择偏好性第31-32页
        2.2.2 苹果小吉丁虫对四种植物叶片的取食量第32-34页
        2.2.3 四种植物叶片释放的挥发物组分和含量第34-37页
        2.2.4 四种植物叶片挥发物的因子分析第37-41页
    2.3 讨论第41-43页
第三章 苹果小吉丁虫嗅觉相关基因的鉴定第43-73页
    3.1 材料与方法第43-46页
        3.1.1 供试昆虫第43页
        3.1.2 主要试剂和仪器第43-44页
        3.1.3 触角总RNA的提取第44页
        3.1.4 构建cDNA文库和转录组测序第44-45页
        3.1.5 序列组装与生物信息学分析第45页
        3.1.6 嗅觉基因的鉴定和表达量分析第45-46页
        3.1.7 序列分析和系统发育树构建第46页
    3.2 结果与分析第46-69页
        3.2.1 总RNA质量和浓度检测第46-47页
        3.2.2 转录组测序和序列组装第47-48页
        3.2.3 转录组基因序列的同源比对第48-49页
        3.2.4 转录组基因序列的功能注释第49-50页
        3.2.5 转录组基因序列的KOG分析第50页
        3.2.6 转录组基因序列的KEGG分析第50-51页
        3.2.7 气味结合蛋白基因的鉴定第51-54页
        3.2.8 化学感受蛋白基因的鉴定第54-56页
        3.2.9 气味受体基因的鉴定第56-60页
        3.2.10 味觉受体基因的鉴定第60-69页
    3.3 讨论第69-73页
第四章 苹果小吉丁虫OBPs和CSPs的组织表达特异性分析第73-83页
    4.1 材料与方法第73-76页
        4.1.1 供试昆虫第73页
        4.1.2 主要仪器第73页
        4.1.3 主要试剂第73页
        4.1.4 总RNA的提取及cDNA模板合成第73-74页
        4.1.5 OBP和CSP基因的克隆验证第74-75页
        4.1.6 荧光定量PCR反应第75-76页
        4.1.7 数据分析第76页
    4.2 结果与分析第76-81页
        4.2.1 苹果小吉丁虫OBP基因的表达量分析第76-80页
        4.2.2 苹果小吉丁虫CSP基因的表达量分析第80-81页
    4.3 讨论第81-83页
第五章 苹果小吉丁虫OBPs和CSPs的原核表达及荧光竞争结合特性第83-110页
    5.1 材料与方法第84-91页
        5.1.1 主要仪器第84页
        5.1.2 主要试剂第84页
        5.1.3 重组质粒的表达载体构建第84-85页
        5.1.4 重组质粒的诱导表达分析第85-88页
        5.1.5 蛋白纯化第88-89页
        5.1.6 表达产物的SDS-PAGE分析第89-90页
        5.1.7 蛋白印迹杂交分析第90-91页
        5.1.8 重组蛋白与荧光探针1-NPN的结合第91页
    5.2 结果与分析第91-108页
        5.2.1 OBP和CSP基因的序列分析第91-94页
        5.2.2 目的基因表达载体的构建第94页
        5.2.3 重组蛋白的诱导表达和Westernblot分析第94-95页
        5.2.4 重组蛋白与荧光探针1-NPN的结合常数第95-98页
        5.2.5 重组蛋白AmalOBPs与配体化合物的结合特性第98-99页
        5.2.6 重组蛋白AmalCSPs与配体化合物的结合特性第99-108页
    5.3 讨论第108-110页
第六章 苹果小吉丁虫对寄主植物挥发物的行为生测反应及田间诱捕试验第110-120页
    6.1 材料与方法第110-113页
        6.1.1 供试昆虫第110页
        6.1.2 主要试剂第110页
        6.1.3 主要仪器第110-112页
        6.1.4 触角电位测定第112页
        6.1.5 双向嗅觉行为第112页
        6.1.6 不同颜色诱虫板对苹果小吉丁虫的诱捕试验第112-113页
        6.1.7 不同寄主植物挥发物对苹果小吉丁虫的诱捕试验第113页
        6.1.8 数据处理第113页
    6.2 结果与分析第113-118页
        6.2.1 触角电位反应第113-114页
        6.2.2 嗅觉行为反应第114-116页
        6.2.3 不同颜色诱捕器对苹果小吉丁虫的诱捕效果第116-117页
        6.2.4 不同寄主植物挥发物对苹果小吉丁虫的诱捕效果第117-118页
    6.3 讨论第118-120页
第七章 全文总结与研究展望第120-122页
    7.1 全文主要结论第120-121页
    7.2 本论文的创新点第121页
    7.3 下一步工作展望第121-122页
参考文献第122-136页
缩略语表第136-137页
致谢第137-138页
作者简介第138页

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