摘要 | 第5-8页 |
abstract | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第16-29页 |
1.1 寄主植物挥发物 | 第16-18页 |
1.1.1 寄主植物挥发物对昆虫行为的影响 | 第16页 |
1.1.2 昆虫对气味物质的嗅觉反应机制 | 第16-18页 |
1.2 昆虫嗅觉相关基因研究 | 第18-26页 |
1.2.1 昆虫触角基因组和转录组研究 | 第18-20页 |
1.2.2 气味结合蛋白 | 第20-22页 |
1.2.3 化学感受蛋白 | 第22-23页 |
1.2.4 气味受体 | 第23-24页 |
1.2.5 离子受体 | 第24-25页 |
1.2.6 感觉神经元膜蛋白 | 第25-26页 |
1.3 苹果小吉丁虫研究进展 | 第26-27页 |
1.3.1 苹果小吉丁虫概述 | 第26页 |
1.3.2 苹果小吉丁虫防治 | 第26-27页 |
1.4 本研究目的和意义 | 第27-29页 |
第二章 苹果小吉丁虫对四种植物的偏好性及相关挥发物分析 | 第29-43页 |
2.1 材料与方法 | 第29-31页 |
2.1.1 供试昆虫和植物 | 第29页 |
2.1.2 主要仪器 | 第29-30页 |
2.1.3 主要试剂 | 第30页 |
2.1.4 苹果小吉丁虫对4种植物的选择偏好性 | 第30页 |
2.1.5 苹果小吉丁虫对4种植物叶片的取食量 | 第30页 |
2.1.6 植物挥发物采集和化合物组分鉴定 | 第30-31页 |
2.2 结果与分析 | 第31-41页 |
2.2.1 苹果小吉丁虫对四种植物的选择偏好性 | 第31-32页 |
2.2.2 苹果小吉丁虫对四种植物叶片的取食量 | 第32-34页 |
2.2.3 四种植物叶片释放的挥发物组分和含量 | 第34-37页 |
2.2.4 四种植物叶片挥发物的因子分析 | 第37-41页 |
2.3 讨论 | 第41-43页 |
第三章 苹果小吉丁虫嗅觉相关基因的鉴定 | 第43-73页 |
3.1 材料与方法 | 第43-46页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第43页 |
3.1.2 主要试剂和仪器 | 第43-44页 |
3.1.3 触角总RNA的提取 | 第44页 |
3.1.4 构建cDNA文库和转录组测序 | 第44-45页 |
3.1.5 序列组装与生物信息学分析 | 第45页 |
3.1.6 嗅觉基因的鉴定和表达量分析 | 第45-46页 |
3.1.7 序列分析和系统发育树构建 | 第46页 |
3.2 结果与分析 | 第46-69页 |
3.2.1 总RNA质量和浓度检测 | 第46-47页 |
3.2.2 转录组测序和序列组装 | 第47-48页 |
3.2.3 转录组基因序列的同源比对 | 第48-49页 |
3.2.4 转录组基因序列的功能注释 | 第49-50页 |
3.2.5 转录组基因序列的KOG分析 | 第50页 |
3.2.6 转录组基因序列的KEGG分析 | 第50-51页 |
3.2.7 气味结合蛋白基因的鉴定 | 第51-54页 |
3.2.8 化学感受蛋白基因的鉴定 | 第54-56页 |
3.2.9 气味受体基因的鉴定 | 第56-60页 |
3.2.10 味觉受体基因的鉴定 | 第60-69页 |
3.3 讨论 | 第69-73页 |
第四章 苹果小吉丁虫OBPs和CSPs的组织表达特异性分析 | 第73-83页 |
4.1 材料与方法 | 第73-76页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第73页 |
4.1.2 主要仪器 | 第73页 |
4.1.3 主要试剂 | 第73页 |
4.1.4 总RNA的提取及cDNA模板合成 | 第73-74页 |
4.1.5 OBP和CSP基因的克隆验证 | 第74-75页 |
4.1.6 荧光定量PCR反应 | 第75-76页 |
4.1.7 数据分析 | 第76页 |
4.2 结果与分析 | 第76-81页 |
4.2.1 苹果小吉丁虫OBP基因的表达量分析 | 第76-80页 |
4.2.2 苹果小吉丁虫CSP基因的表达量分析 | 第80-81页 |
4.3 讨论 | 第81-83页 |
第五章 苹果小吉丁虫OBPs和CSPs的原核表达及荧光竞争结合特性 | 第83-110页 |
5.1 材料与方法 | 第84-91页 |
5.1.1 主要仪器 | 第84页 |
5.1.2 主要试剂 | 第84页 |
5.1.3 重组质粒的表达载体构建 | 第84-85页 |
5.1.4 重组质粒的诱导表达分析 | 第85-88页 |
5.1.5 蛋白纯化 | 第88-89页 |
5.1.6 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第89-90页 |
5.1.7 蛋白印迹杂交分析 | 第90-91页 |
5.1.8 重组蛋白与荧光探针1-NPN的结合 | 第91页 |
5.2 结果与分析 | 第91-108页 |
5.2.1 OBP和CSP基因的序列分析 | 第91-94页 |
5.2.2 目的基因表达载体的构建 | 第94页 |
5.2.3 重组蛋白的诱导表达和Westernblot分析 | 第94-95页 |
5.2.4 重组蛋白与荧光探针1-NPN的结合常数 | 第95-98页 |
5.2.5 重组蛋白AmalOBPs与配体化合物的结合特性 | 第98-99页 |
5.2.6 重组蛋白AmalCSPs与配体化合物的结合特性 | 第99-108页 |
5.3 讨论 | 第108-110页 |
第六章 苹果小吉丁虫对寄主植物挥发物的行为生测反应及田间诱捕试验 | 第110-120页 |
6.1 材料与方法 | 第110-113页 |
6.1.1 供试昆虫 | 第110页 |
6.1.2 主要试剂 | 第110页 |
6.1.3 主要仪器 | 第110-112页 |
6.1.4 触角电位测定 | 第112页 |
6.1.5 双向嗅觉行为 | 第112页 |
6.1.6 不同颜色诱虫板对苹果小吉丁虫的诱捕试验 | 第112-113页 |
6.1.7 不同寄主植物挥发物对苹果小吉丁虫的诱捕试验 | 第113页 |
6.1.8 数据处理 | 第113页 |
6.2 结果与分析 | 第113-118页 |
6.2.1 触角电位反应 | 第113-114页 |
6.2.2 嗅觉行为反应 | 第114-116页 |
6.2.3 不同颜色诱捕器对苹果小吉丁虫的诱捕效果 | 第116-117页 |
6.2.4 不同寄主植物挥发物对苹果小吉丁虫的诱捕效果 | 第117-118页 |
6.3 讨论 | 第118-120页 |
第七章 全文总结与研究展望 | 第120-122页 |
7.1 全文主要结论 | 第120-121页 |
7.2 本论文的创新点 | 第121页 |
7.3 下一步工作展望 | 第121-122页 |
参考文献 | 第122-136页 |
缩略语表 | 第136-137页 |
致谢 | 第137-138页 |
作者简介 | 第138页 |