| 中文摘要 | 第9-11页 |
| abstract | 第11-13页 |
| 1 前言 | 第14-20页 |
| 1.1 表观遗传学 | 第14页 |
| 1.2 DNA甲基化 | 第14页 |
| 1.3 DNA甲基化检测技术 | 第14-15页 |
| 1.4 DNA羟甲基化 | 第15页 |
| 1.5 DNA羟甲基化检测方法 | 第15-17页 |
| 1.5.1 亚硫酸盐方法 | 第15页 |
| 1.5.2 高效液相色谱法 | 第15-16页 |
| 1.5.3 电化学方法 | 第16页 |
| 1.5.4 光电传感器 | 第16页 |
| 1.5.5 电致化学发光传感器 | 第16-17页 |
| 1.6 实验选用材料 | 第17-18页 |
| 1.7 本课题的提出以及主要研究内容 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-34页 |
| 2.1 仪器与试剂 | 第20-24页 |
| 2.1.1 仪器 | 第20-21页 |
| 2.1.2 试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.3 实验中主要缓冲溶液的配制 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-34页 |
| 2.2.1 基于AuNCs-H2O2ECL生物传感器对5-及甲基胞嘧啶,TET1,β-糖基转移酶活性检测 | 第24-27页 |
| 2.2.1.1 BSA-AuNCs的制备 | 第25页 |
| 2.2.1.2 AuNCs/AuNPs/GCE的制备 | 第25页 |
| 2.2.1.3 探针DNA的固定 | 第25页 |
| 2.2.1.4 DNA杂交 | 第25页 |
| 2.2.1.5 TET1催化 | 第25页 |
| 2.2.1.6 β-GT诱导 | 第25页 |
| 2.2.1.7 HRP的固定 | 第25-26页 |
| 2.2.1.8 ECL信号检测 | 第26页 |
| 2.2.1.9 ECL生物传感器的特异性及稳定性检测 | 第26页 |
| 2.2.1.10 抑制活性检测 | 第26-27页 |
| 2.2.2 基于酶催化和SPAABs电化学生物传感器对5-羟甲基胞嘧啶的检测 | 第27-29页 |
| 2.2.2.1 石墨烯-苝-3,4,9,10-四羧酸(GR-PTCA)纳米复合材料的制备 | 第27页 |
| 2.2.2.2 SiO_2-SPAABs-HRP的制备及表征 | 第27-28页 |
| 2.2.2.3 电极预处理 | 第28页 |
| 2.2.2.4 固定GR-PTCA | 第28页 |
| 2.2.2.5 探针DNA的固定 | 第28页 |
| 2.2.2.6 M.HhaI酶处理 | 第28页 |
| 2.2.2.7 SiO_2-SPAABs-HRP的固定 | 第28页 |
| 2.2.2.8 电化学信号检测 | 第28-29页 |
| 2.2.3 基于Fe_3O_4@SiO_2及PAMAM树状高分子对5-羟甲基胞嘧啶的ECL检测 | 第29-31页 |
| 2.2.3.1 Fe_3O_4@SiO_2-Ab的制备 | 第29页 |
| 2.2.3.2 Ru-PAMAM-avidin的制备 | 第29页 |
| 2.2.3.3 ECL免疫传感器的构建 | 第29-30页 |
| 2.2.3.4 ECL信号检测 | 第30-31页 |
| 2.2.3.5 实际样品检测 | 第31页 |
| 2.2.4 基于PAMAM-Ag/NG纳米复合材料对5-羟甲基胞嘧啶的ECL检测 | 第31-34页 |
| 2.2.4.1 PAMAM-Ag-NG的制备 | 第31-32页 |
| 2.2.4.2 ECL免疫传感器的制备 | 第32页 |
| 2.2.4.3 ECL检测 | 第32-33页 |
| 2.2.4.4 实际样品检测 | 第33-34页 |
| 3.结果与分析 | 第34-54页 |
| 3.1 基于AuNCs-H_2O_2ECL生物传感器对5-及甲基胞嘧啶,TET1,β-糖基转移酶活性检测 | 第34-39页 |
| 3.1.1 AuNCs和不同修饰电极的表征 | 第34-35页 |
| 3.1.2 可行性分析 | 第35-36页 |
| 3.1.3 实验条件优化 | 第36页 |
| 3.1.4 5 mC-DNA检测及性能分析 | 第36-37页 |
| 3.1.5 β-GT活性分析 | 第37-38页 |
| 3.1.6 β-GT 活性分析 | 第38-39页 |
| 3.2 基于酶催化和SPAABs电化学生物传感器对5-羟甲基胞嘧啶的检测 | 第39-44页 |
| 3.2.1 GR-PTCA的表征 | 第39-40页 |
| 3.2.2 SiO_2-SPAABs-HRP的表征 | 第40-41页 |
| 3.2.3 EIS分析和可行性分析 | 第41-42页 |
| 3.2.4 条件优化 | 第42-43页 |
| 3.2.5 5 hmC-DNA检测 | 第43页 |
| 3.2.6 特异性和重现性 | 第43-44页 |
| 3.3 基于Fe_3O_4@SiO_2及PAMAM树状高分子对5-羟甲基胞嘧啶的ECL检测 | 第44-50页 |
| 3.3.1 Fe_3O_4@SiO_2-Ab的表征 | 第44-45页 |
| 3.3.2 Ru-PAMAM-avidin的表征 | 第45-46页 |
| 3.3.3 电极表征及可行性分析 | 第46-47页 |
| 3.3.4 实验优化 | 第47-48页 |
| 3.3.5 信号放大策略探究 | 第48-49页 |
| 3.3.6 5 hmC的检测 | 第49页 |
| 3.3.7 ECL免疫传感器的稳定性、重现性、选择性 | 第49-50页 |
| 3.3.8 实际样品检测 | 第50页 |
| 3.4 基于PAMAM-Ag-NG纳米复合材料对5-羟甲基胞嘧啶的ECL检测 | 第50-54页 |
| 3.4.1 EIS表征 | 第50-51页 |
| 3.4.2 可行性分析 | 第51页 |
| 3.4.3 实验优化 | 第51-52页 |
| 3.4.4 标准曲线的绘制 | 第52-53页 |
| 3.4.5 传感器性能分析 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 4.1 基于AuNCs-H_2O_2ECL生物传感器对5-甲基胞嘧啶,TET1,β-糖基转移酶活性检测 | 第54页 |
| 4.2 基于酶催化和SPAABs电化学生物传感器对5-羟甲基胞嘧啶的检测 | 第54-55页 |
| 4.3 基于Fe_3O_4@SiO_2及PAMAM树状高分子对5-羟甲基胞嘧啶的ECL检测 | 第55-56页 |
| 4.4 基于PAMAM-Ag-NG纳米复合材料对5-羟甲基胞嘧啶的ECL检测 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 5.1 基于AuNCs-H_2O_2ECL生物传感器对5-甲基胞嘧啶,TET1,β-糖基转移酶活性检测 | 第57页 |
| 5.2 基于酶催化和SPAABs电化学生物传感器对5-羟甲基胞嘧啶的检测 | 第57页 |
| 5.3 基于Fe_3O_4@SiO_2及PAMAM树状高分子对5-羟甲基胞嘧啶的ECL检测 | 第57页 |
| 5.4 基于PAMAM-Ag-NG纳米复合材料对5-羟甲基胞嘧啶的ECL检测 | 第57-58页 |
| 6 创新之处 | 第58-59页 |
| 7 参考文献 | 第59-68页 |
| 8 致谢 | 第68-70页 |
| 9 攻读学位期间发表论文情况 | 第70页 |
