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貉源和狐源H9N2亚型流感病毒的分离鉴定及其全基因序列分析

符号说明第4-8页
摘要第8-10页
abstract第10-11页
引言第12-13页
1.综述第13-26页
    1.1 流感病毒的分类和命名第13页
    1.2 流感病毒的历史及现状第13-15页
    1.3 流感病毒的分子生物学特征第15-20页
        1.3.1 流感病毒的形态结构第15页
        1.3.2 流感病毒的化学组成第15页
        1.3.3 流感病毒的理化特性第15-16页
        1.3.4 流感病毒的基因结构及其蛋白功能第16-20页
    1.4 流感病毒的转录和复制机制第20-22页
        1.4.1 流感病毒的遗传变异第20-21页
        1.4.2 流感病毒的跨种传播机制第21-22页
    1.5 H9N2亚型流感病毒的流行病学概述第22-23页
    1.6 毛皮动物流感病毒的流行病学概述第23-25页
        1.6.1 水貂感染流感病毒第23-24页
        1.6.2 狐狸、貉子感染流感病毒第24-25页
    1.7 本实验研究的目的和意义第25-26页
2.实验材料和方法第26-37页
    2.1 材料第26页
        2.1.1 病料第26页
        2.1.2 血清第26页
        2.1.3 鸡胚第26页
    2.2 主要仪器和试剂第26-29页
        2.2.1 主要试剂第26页
        2.2.2 主要仪器第26-27页
        2.2.3 试剂的配制第27-28页
        2.2.4 引物第28-29页
    2.3 实验方法第29-37页
        2.3.1 病料的收集、处理第29页
        2.3.2 病毒在SPF鸡胚中增殖纯化第29页
        2.3.3 血清学检测第29-30页
        2.3.4 八株分离毒株的EID50测定第30页
        2.3.5 流感病毒基因组RNA的提取第30-31页
        2.3.6 反转录cDNA的合成第31-32页
        2.3.7 分离毒株各个基因的PCR扩增第32-33页
        2.3.8 琼脂糖凝胶电泳第33页
        2.3.9 PCR产物的回收和纯化第33-34页
        2.3.10 重组载体的构建第34页
        2.3.11 DH5α感受态细胞的制备第34-35页
        2.3.12 重组载体的转化第35页
        2.3.13 重组质粒的提取第35-36页
        2.3.14 重组质粒的酶切鉴定第36页
        2.3.15 分离毒株的基因序列的测序及分析第36-37页
3.结果第37-53页
    3.1 病毒分离第37页
    3.2 血清学结果第37-38页
    3.3 貉源和狐源H9N2亚型流感病毒各段基因的RT-PCR扩增结果第38-39页
    3.4 貉源和狐源H9N2亚型流感病毒各段基因的酶切鉴定结果第39-40页
    3.5 狐源和貉源分离毒株遗传进化分析第40-49页
        3.5.1 HA基因系统进化分析第40-42页
        3.5.2 NA基因系统进化分析第42-43页
        3.5.3 聚合酶(PA、PB1、PB2)的系统进化分析第43-46页
        3.5.4 NS、NP、M基因的系统进化分析第46-49页
    3.6 貉源和狐源H9N2亚型流感病毒序列分析第49-53页
        3.6.1 貉源和狐源H9N2亚型流感病毒核苷酸序列分析第49页
        3.6.2 HA基因的氨基酸序列分析第49-50页
        3.6.3 NA基因的氨基酸序列分析第50-52页
        3.6.4 M、NP和NS基因的氨基酸序列分析第52页
        3.6.5 PA、PB1、PB2基因的氨基酸序列分析第52-53页
4.讨论第53-56页
5.结论第56-57页
参考文献第57-69页
发表论文情况第69-70页
致谢第70页

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