符号说明 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
abstract | 第10-11页 |
引言 | 第12-13页 |
1.综述 | 第13-26页 |
1.1 流感病毒的分类和命名 | 第13页 |
1.2 流感病毒的历史及现状 | 第13-15页 |
1.3 流感病毒的分子生物学特征 | 第15-20页 |
1.3.1 流感病毒的形态结构 | 第15页 |
1.3.2 流感病毒的化学组成 | 第15页 |
1.3.3 流感病毒的理化特性 | 第15-16页 |
1.3.4 流感病毒的基因结构及其蛋白功能 | 第16-20页 |
1.4 流感病毒的转录和复制机制 | 第20-22页 |
1.4.1 流感病毒的遗传变异 | 第20-21页 |
1.4.2 流感病毒的跨种传播机制 | 第21-22页 |
1.5 H9N2亚型流感病毒的流行病学概述 | 第22-23页 |
1.6 毛皮动物流感病毒的流行病学概述 | 第23-25页 |
1.6.1 水貂感染流感病毒 | 第23-24页 |
1.6.2 狐狸、貉子感染流感病毒 | 第24-25页 |
1.7 本实验研究的目的和意义 | 第25-26页 |
2.实验材料和方法 | 第26-37页 |
2.1 材料 | 第26页 |
2.1.1 病料 | 第26页 |
2.1.2 血清 | 第26页 |
2.1.3 鸡胚 | 第26页 |
2.2 主要仪器和试剂 | 第26-29页 |
2.2.1 主要试剂 | 第26页 |
2.2.2 主要仪器 | 第26-27页 |
2.2.3 试剂的配制 | 第27-28页 |
2.2.4 引物 | 第28-29页 |
2.3 实验方法 | 第29-37页 |
2.3.1 病料的收集、处理 | 第29页 |
2.3.2 病毒在SPF鸡胚中增殖纯化 | 第29页 |
2.3.3 血清学检测 | 第29-30页 |
2.3.4 八株分离毒株的EID50测定 | 第30页 |
2.3.5 流感病毒基因组RNA的提取 | 第30-31页 |
2.3.6 反转录cDNA的合成 | 第31-32页 |
2.3.7 分离毒株各个基因的PCR扩增 | 第32-33页 |
2.3.8 琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
2.3.9 PCR产物的回收和纯化 | 第33-34页 |
2.3.10 重组载体的构建 | 第34页 |
2.3.11 DH5α感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
2.3.12 重组载体的转化 | 第35页 |
2.3.13 重组质粒的提取 | 第35-36页 |
2.3.14 重组质粒的酶切鉴定 | 第36页 |
2.3.15 分离毒株的基因序列的测序及分析 | 第36-37页 |
3.结果 | 第37-53页 |
3.1 病毒分离 | 第37页 |
3.2 血清学结果 | 第37-38页 |
3.3 貉源和狐源H9N2亚型流感病毒各段基因的RT-PCR扩增结果 | 第38-39页 |
3.4 貉源和狐源H9N2亚型流感病毒各段基因的酶切鉴定结果 | 第39-40页 |
3.5 狐源和貉源分离毒株遗传进化分析 | 第40-49页 |
3.5.1 HA基因系统进化分析 | 第40-42页 |
3.5.2 NA基因系统进化分析 | 第42-43页 |
3.5.3 聚合酶(PA、PB1、PB2)的系统进化分析 | 第43-46页 |
3.5.4 NS、NP、M基因的系统进化分析 | 第46-49页 |
3.6 貉源和狐源H9N2亚型流感病毒序列分析 | 第49-53页 |
3.6.1 貉源和狐源H9N2亚型流感病毒核苷酸序列分析 | 第49页 |
3.6.2 HA基因的氨基酸序列分析 | 第49-50页 |
3.6.3 NA基因的氨基酸序列分析 | 第50-52页 |
3.6.4 M、NP和NS基因的氨基酸序列分析 | 第52页 |
3.6.5 PA、PB1、PB2基因的氨基酸序列分析 | 第52-53页 |
4.讨论 | 第53-56页 |
5.结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-69页 |
发表论文情况 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |