| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9页 |
| 第一章 前言 | 第10-15页 |
| 1 稻瘟病菌概况 | 第10页 |
| 1.1 稻瘟病菌侵染 | 第10页 |
| 2 Retromer复合体 | 第10-14页 |
| 2.1 Retromer复合体组成 | 第11-12页 |
| 2.2 Retromer复合体功能 | 第12页 |
| 2.3 cargo-selective亚基功能 | 第12-14页 |
| 2.3.1 酵母中的Vps26与Vps29 | 第13页 |
| 2.3.2 植物中的Vps26与Vps29 | 第13-14页 |
| 2.3.3 动物中的Vps26与Vps29 | 第14页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-24页 |
| 2.1 试验材料 | 第15-16页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第15页 |
| 2.1.2 培养基 | 第15页 |
| 2.1.3 抗生素 | 第15页 |
| 2.1.4 生化试剂 | 第15-16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-24页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第16页 |
| 2.2.2 引物设计与PCR扩增 | 第16-17页 |
| 2.2.3 DNA纯化回收 | 第17页 |
| 2.2.4 T-A克隆 | 第17-18页 |
| 2.2.5 稻瘟病菌目的基因敲除载体构建 | 第18-20页 |
| 2.2.6 稻瘟病菌原生质体制备 | 第20页 |
| 2.2.7 稻瘟病菌原生质体转化 | 第20-21页 |
| 2.2.8 转化子DNA粗提取 | 第21页 |
| 2.2.9 转化子PCR验证 | 第21页 |
| 2.2.10 突变体菌丝生长速度测定 | 第21页 |
| 2.2.11 突变体细胞壁敏感性鉴定 | 第21-22页 |
| 2.2.12 突变体产孢量计数与分生孢子形态观察 | 第22页 |
| 2.2.13 孢子萌发以及附着胞形成率观察 | 第22页 |
| 2.2.14 分生孢子对洋葱表皮侵染情况观察 | 第22页 |
| 2.2.15 大麦叶片离体接种实验 | 第22-23页 |
| 2.2.16 水稻活体致病性观察 | 第23页 |
| 2.2.17 含有绿色荧光蛋白互补载体构建 | 第23页 |
| 2.2.18 互补转化子获得与验证 | 第23页 |
| 2.2.19 绿色荧光光蛋白对目的基因的初定位 | 第23-24页 |
| 第三章 结果分析 | 第24-43页 |
| 3.1 VPS29结果及分析 | 第24-33页 |
| 3.1.1 VPS29生物信息分析 | 第24-25页 |
| 3.1.2 VPS29敲除突变体与荧光互补菌株的获得 | 第25-26页 |
| 3.1.3 VPS29突变后对生长速度测定 | 第26-27页 |
| 3.1.4 VPS29敲除突变体细胞壁完整性 | 第27-28页 |
| 3.1.5 VPS29敲除突变体稻瘟病菌产孢与分生孢子状态分析 | 第28-30页 |
| 3.1.8 Vps29突变体致病性分析 | 第30-32页 |
| 3.1.9 Vps29绿色荧光蛋白的亚细胞初定位 | 第32-33页 |
| 3.2 VPS26结果分析 | 第33-43页 |
| 3.2.1 Vps26生物信息分析 | 第33-34页 |
| 3.2.2 VPS26敲除突变体与荧光互补菌株的获得 | 第34-35页 |
| 3.2.3 VPS26敲除突变体生长速度测定 | 第35-36页 |
| 3.2.4 VPS26突变体细胞壁敏感性 | 第36-37页 |
| 3.2.5 VPS26敲除突变体产孢与分生孢子状态分析 | 第37-39页 |
| 3.2.8 VPS26敲除突变体致病性分析 | 第39-41页 |
| 3.2.9 Vps26绿色荧光蛋白的亚细胞初定位 | 第41-43页 |
| 第四章 小结与讨论 | 第43-45页 |
| 4.1 Vps26与Vps29进化上的保守 | 第43页 |
| 4.2 VPS26与VPS29对稻瘟病菌菌丝生长影响 | 第43页 |
| 4.3 VPS26与VPS29影响稻瘟病菌形成分生孢子 | 第43-44页 |
| 4.4 VPS26与VPS29与稻瘟病菌侵染能力关系密切 | 第44页 |
| 4.5 Vps26与Vps29在稻瘟病菌中亚细胞初步定位 | 第44页 |
| 4.6 稻瘟病菌Vps26与Vps29可能形成复合体发挥功能 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-51页 |
| 附录 本研究中所使用的引物 | 第51-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
