摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
缩醣符号注释 | 第8-13页 |
第1章 引言 | 第13-24页 |
1.1 概述 | 第13-14页 |
1.2 反式脂肪酸国内外研究现状 | 第14-18页 |
1.2.1 TFA来源及居民消费现状 | 第14-15页 |
1.2.2 TFA的生理效应 | 第15-16页 |
1.2.3 TFA与疾病 | 第16-18页 |
1.3 血管内皮细胞 | 第18-23页 |
1.3.1 TFA与内皮功能障碍 | 第18-21页 |
1.3.2 TFA与细胞周期及凋亡 | 第21-23页 |
1.4 课题研究的目的及意义 | 第23-24页 |
1.4.1 课题来源 | 第23页 |
1.4.2 课题研究的价值及意义 | 第23页 |
1.4.3 研究的主要内容及方法 | 第23-24页 |
第2章 反油酸对内皮细胞功能损伤的影响 | 第24-35页 |
2.1 前言 | 第24-25页 |
2.2 试剂材料与设备 | 第25-26页 |
2.2.1 原料 | 第25页 |
2.2.2 试剂 | 第25页 |
2.2.3 实验仪器 | 第25-26页 |
2.3 试验方法 | 第26-27页 |
2.3.1 脐静脉内皮细胞的培养 | 第26页 |
2.3.2 观测反油酸对内皮细胞损伤的影响 | 第26-27页 |
2.4 数据分析及计算 | 第27页 |
2.5 结果与分析 | 第27-33页 |
2.5.1 HUVEC生长曲线及细胞活力 | 第27-28页 |
2.5.2 培养上清液中P-选凝素及sICAM-1的含量变化 | 第28-31页 |
2.5.3 培养上清液中TNF-α、ET-1、TXA-2及PGI2的含量变化 | 第31-33页 |
2.6 讨论 | 第33-34页 |
2.7 小结 | 第34-35页 |
第3章 反油酸对内皮细胞凋亡及周期的影响 | 第35-48页 |
3.1 前言 | 第35-36页 |
3.2 试剂材料与设备 | 第36-37页 |
3.2.1 材料 | 第36页 |
3.2.2 试剂 | 第36-37页 |
3.2.3 实验仪器 | 第37页 |
3.3 试验方法 | 第37-40页 |
3.3.1 反油酸对HUVEC凋亡的影响 | 第38页 |
3.3.2 western blot试剂的配置 | 第38-39页 |
3.3.3 制备HUVEC蛋白样品 | 第39页 |
3.3.4 测定蛋白含量 | 第39页 |
3.3.5 EILSA法检测抗原抗体反应浓度 | 第39页 |
3.3.6 通过western blot测定反油酸作用前后HUVEC蛋白表达变 | 第39-40页 |
3.4 数据分析及计算 | 第40-41页 |
3.5 结果与分析 | 第41-46页 |
3.5.1 反油酸作用下的HUVEC凋亡 | 第41-43页 |
3.5.2 蛋白含量测定 | 第43-44页 |
3.5.3 抗原抗体反应浓度 | 第44-45页 |
3.5.4 反油酸作用前后HUVEC蛋白表达变化 | 第45-46页 |
3.6 讨论 | 第46-47页 |
3.7 小结 | 第47-48页 |
第4章 通过p53介导的反油酸对内皮细胞周期和凋亡的作用机制 | 第48-62页 |
4.1 引言 | 第48页 |
4.2 试剂材料与设备 | 第48-50页 |
4.2.1 原料 | 第48-49页 |
4.2.2 试剂 | 第49页 |
4.2.3 实验仪器 | 第49-50页 |
4.3 试验方法 | 第50-54页 |
4.3.1 HUVEC准备及处理 | 第50页 |
4.3.2 RNA提取 | 第50-51页 |
4.3.3 RNA的反转录及常规PCR | 第51-52页 |
4.3.4 琼脂糖凝胶电泳电泳检测cDNA的完整性 | 第52页 |
4.3.5 RT-PCR检测反油酸作用前后细胞m RNA的表达变化 | 第52-54页 |
4.4 数据分析及计算 | 第54页 |
4.5 结果与分析 | 第54-59页 |
4.5.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第54-55页 |
4.5.2 RT-PCR定量检测CDK4、p21、Bcl-2、p53、CyclinD1、PA28_γ的表达 | 第55-59页 |
4.6 讨论 | 第59-61页 |
4.7 小结 | 第61-62页 |
第5章 结论与展望 | 第62-63页 |
5.1 结论 | 第62-63页 |
5.1.1 反油酸诱导内皮细胞功能障碍 | 第62页 |
5.1.2 反油酸诱导内皮细胞凋亡和周期紊乱 | 第62页 |
5.1.3 反油酸能够使CDK4和PA28_γ蛋白表达下降 | 第62页 |
5.1.4 反油酸通过p53介导的细胞凋亡和周期阻滞通路诱导内皮细胞凋亡 | 第62-63页 |
5.2 进一步工作方向 | 第63页 |
创新之处 | 第63-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-77页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第77页 |