摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表 | 第7-11页 |
第一章 引言 | 第11-23页 |
1.1 植物性别分化的多样性 | 第11-13页 |
1.1.1 被子植物性型的多样性 | 第11-12页 |
1.1.2 性染色体决定类型 | 第12-13页 |
1.1.3 常染色体决定类型 | 第13页 |
1.2 植物花发育的ABC模型和ABCDE模型 | 第13-14页 |
1.3 环境与激素对植物花发育的影响 | 第14-17页 |
1.3.1 环境是调控植物花发育的重要因子 | 第14-15页 |
1.3.2 激素是植物性别表达调控的重要组成部分 | 第15页 |
1.3.3 乙烯对葫芦科作物性别表达至关重要 | 第15-17页 |
1.4 葫芦科主要作物性别机理研究进展 | 第17-21页 |
1.4.1 黄瓜性别决定机理研究进展 | 第17-19页 |
1.4.2 甜瓜性别决定机理研究进展 | 第19-20页 |
1.4.3 西瓜性别决定机理研究进展 | 第20-21页 |
1.5 研究目的及意义 | 第21-23页 |
第二章 材料与方法 | 第23-42页 |
2.1 植物材料与种植 | 第23页 |
2.2 性型鉴定 | 第23-25页 |
2.2.1 完全花的鉴定标准 | 第23-24页 |
2.2.2 性型鉴定的标准 | 第24-25页 |
2.3 植物材料取样 | 第25-26页 |
2.3.1 DNA提取材料的取样方法 | 第25页 |
2.3.2 RNA提取材料的取样方法 | 第25页 |
2.3.3 RNA原位杂交所用材料及取样方法 | 第25-26页 |
2.4 核酸提取 | 第26-27页 |
2.4.1 DNA提取 | 第26页 |
2.4.2 RNA提取及cDNA第一链合成 | 第26-27页 |
2.4.3 质粒DNA提取 | 第27页 |
2.4.4 BAC-DNA提取 | 第27页 |
2.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳与改良银染法 | 第27-28页 |
2.5.1 聚丙稀酰胺凝胶电泳 | 第27-28页 |
2.5.2 改良银染法检测 | 第28页 |
2.6 性型遗传规律的数据统计分析 | 第28-29页 |
2.6.1 不同季节花器官性别比率的差异显著分析 | 第28页 |
2.6.2 遗传分离群体的统计学分析 | 第28-29页 |
2.7 基因克隆与序列分析 | 第29-33页 |
2.7.1 同源克隆与序列分析 | 第29-32页 |
2.7.2 染色体步移定位与克隆 | 第32-33页 |
2.8 ACS酶活性检测与蛋白结构预测 | 第33-35页 |
2.8.1 cDNA序列克隆及表达载体构建 | 第33-34页 |
2.8.2 菌株活化与诱导 | 第34页 |
2.8.3 酶蛋白提取与纯化 | 第34-35页 |
2.8.4 酶活性的检测 | 第35页 |
2.8.5 酶蛋白结构的预测 | 第35页 |
2.9 qPCR与原位杂交 | 第35-37页 |
2.9.1 qPCR | 第35-36页 |
2.9.2 原位杂交 | 第36-37页 |
2.10 染色体易位分析 | 第37-40页 |
2.10.1 生物信息学分析 | 第37页 |
2.10.2 PCR分析 | 第37-38页 |
2.10.3 FISH验证 | 第38-40页 |
2.11 群体验证 | 第40-42页 |
2.11.1 dCAPs标记的群体验证 | 第40-41页 |
2.11.2 染色体易位的群体验证 | 第41-42页 |
第三章 结果与分析 | 第42-69页 |
3.1 西瓜性型遗传规律 | 第42-50页 |
3.1.1 季节对西瓜性型及花器官性别比率的影响 | 第42-45页 |
3.1.2 不同西瓜性型材料构建的六世代群遗体传规律分析 | 第45-50页 |
3.2 CitACS4保守区域的突变导致西瓜雄花完全花同株性型出现 | 第50-59页 |
3.2.1 西瓜ACS家族成员的系统进化树分析及候选基因发掘 | 第50-52页 |
3.2.2 候选基因的克隆与鉴定 | 第52-53页 |
3.2.3 C364W与西瓜雄花完全花同株性型共分离 | 第53-54页 |
3.2.4 CitACS4蛋白的酶活性检测及结构分析 | 第54-56页 |
3.2.5 CitACS4在雌花和完全花两性期的心皮原基特异表达 | 第56-59页 |
3.3 染色体易位导致西瓜全雌株性型的出现 | 第59-69页 |
3.3.1 gy基因的定位 | 第59-60页 |
3.3.2 西瓜全雌株性型突变体存在Chr.2和Chr.3之间的染色体易位 | 第60-64页 |
3.3.3 候选基因的发掘与克隆 | 第64-66页 |
3.3.4 基因标记的群体验证 | 第66页 |
3.3.5 ClWIP1在雄花两性期的心皮原基特异表达 | 第66-69页 |
第四章 讨论 | 第69-76页 |
4.1 西瓜性型遗传规律 | 第69-70页 |
4.1.1 西瓜性型遗传与甜瓜性型遗传模式更相似 | 第69页 |
4.1.2 tm基因与环境变化紧密相关 | 第69-70页 |
4.2 CitACS4保守区域的突变导致西瓜雄花完全花同株性型出现 | 第70-73页 |
4.2.1 葫芦科作物完全花的分子发育机制高度保守 | 第70页 |
4.2.2 葫芦科ACS家族成员在性别决定路径中作用不同 | 第70-71页 |
4.2.3 外源乙烯抑制内源乙烯生成在西瓜促雄过程中起重要作用 | 第71-72页 |
4.2.4 分子标记辅助选择与环境调控相结合能最大限度降低完全花数量 | 第72-73页 |
4.3 染色体易位导致西瓜全雌株性型的出现 | 第73-76页 |
4.3.1 染色体易位是生物进化的重要方式 | 第73页 |
4.3.2 葫芦科作物性别决定系统高度保守 | 第73页 |
4.3.3 西瓜性别决定路径的初步判断 | 第73-74页 |
4.3.4 在植株生长中期喷洒外源乙烯可减少西瓜全雌株性型植株的畸形雌花 | 第74-75页 |
4.3.5 ClWIP1基因标记的开发将促进西瓜制种业发展 | 第75-76页 |
第五章 结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |
附录 | 第85-99页 |
致谢 | 第99-101页 |
作者简历 | 第101页 |