| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-31页 |
| 1.1 细菌 σ 因子研究进展 | 第14-20页 |
| 1.1.1 σ 因子的分类及相关特征 | 第14-20页 |
| 1.2 外胞质功能(ECF)σ 因子家族 | 第20-26页 |
| 1.2.1 ECF-σ 因子的发现及分类 | 第20-21页 |
| 1.2.2 ECF家族的功能 | 第21页 |
| 1.2.3 ECF-σ 因子胁迫响应及调控机制 | 第21-26页 |
| 1.3 耐辐射异常球菌及其 σ 因子研究进展 | 第26-29页 |
| 1.3.1 耐辐射异常球菌的生理特性 | 第26页 |
| 1.3.2 耐辐射异常球菌的极端抗性 | 第26-28页 |
| 1.3.3 耐辐射异常球菌 σ 因子研究进展 | 第28-29页 |
| 1.4 立题依据 | 第29-30页 |
| 1.5 技术路线 | 第30-31页 |
| 第二章 耐辐射异常球菌热胁迫下Sig1转录组分析 | 第31-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第31-38页 |
| 2.1.1 实验菌株与质粒 | 第31页 |
| 2.1.2 试剂盒、酶类及生化试剂 | 第31-32页 |
| 2.1.3 培养基、抗生素及溶液配制 | 第32-33页 |
| 2.1.4 主要仪器及设备 | 第33-34页 |
| 2.1.5 细菌培养及处理 | 第34页 |
| 2.1.6 耐辐射异常球菌及sig1突变株的热激处理 | 第34页 |
| 2.1.7 细菌总RNA的提取及DNA的消化 | 第34-35页 |
| 2.1.8 cDNA的合成 | 第35-36页 |
| 2.1.9 测序方法 | 第36页 |
| 2.1.10 数据分析方法 | 第36页 |
| 2.1.11 实时荧光定量PCR验证 | 第36-38页 |
| 2.2 实验结果与讨论 | 第38-50页 |
| 2.2.1 热胁迫下对sig1突变株生长的影响 | 第38-39页 |
| 2.2.2 转录组数据分析 | 第39-47页 |
| 2.2.3 qPCR验证相关基因的表达 | 第47-48页 |
| 2.2.4 讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 Sig1参与热胁迫反应的调控机制 | 第50-67页 |
| 3.1 材料与方法 | 第50-57页 |
| 3.1.1 实验菌株与质粒 | 第50页 |
| 3.1.2 试剂盒、酶类及实验试剂 | 第50-51页 |
| 3.1.3 培养基、抗生素及溶液配制 | 第51-52页 |
| 3.1.4 主要设备、仪器 | 第52页 |
| 3.1.5 蛋白质三维结构的预测 | 第52页 |
| 3.1.6 细菌基因组提取 | 第52-53页 |
| 3.1.7 基因启动子区引物设计与分析 | 第53-54页 |
| 3.1.8 PCR扩增 | 第54页 |
| 3.1.9 DNA产物回收与纯化 | 第54页 |
| 3.1.10 质粒酶切与产物无缝连接、转化 | 第54-55页 |
| 3.1.11 耐辐射异常球菌感受态的制备与线性转化 | 第55页 |
| 3.1.12 β-半乳糖苷酶活测定 | 第55页 |
| 3.1.13 Sig1蛋白诱导与纯化 | 第55-56页 |
| 3.1.14 凝胶阻滞实验 | 第56-57页 |
| 3.2 实验结果与讨论 | 第57-67页 |
| 3.2.1 Sig1三维结构同源模建 | 第57-59页 |
| 3.2.2 靶基因启动子区预测 | 第59-60页 |
| 3.2.3 靶基因启动子与lacZ融合子的构建 | 第60-61页 |
| 3.2.4 融合蛋白GST-Sig1的表达与纯化 | 第61-62页 |
| 3.2.5 β-半乳糖苷酶活性分析 | 第62-63页 |
| 3.2.6 Sig1与启动子区的相互作用 | 第63-64页 |
| 3.2.7 hsp20突变株构建及其热胁迫表型 | 第64-65页 |
| 3.2.8 讨论 | 第65-67页 |
| 第四章 全文结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简历 | 第75页 |