| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 引言 | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-17页 |
| 1.1 植物miRNA的产生及作用机制 | 第8-9页 |
| 1.1.1 植物miRNA的产生 | 第8页 |
| 1.1.2 植物miRNA的作用机制 | 第8-9页 |
| 1.2 植物miRNA的功能 | 第9-12页 |
| 1.2.1 miRNA对植物生长发育的调控 | 第9页 |
| 1.2.2 miRNA参与生物胁迫 | 第9-10页 |
| 1.2.3 miRNA参与非生物胁迫 | 第10-11页 |
| 1.2.4 植物miR482的功能 | 第11-12页 |
| 1.3 沉默植物miRNA的技术 | 第12-15页 |
| 1.3.1 T-DNA或转座子插入敲除技术 | 第12-13页 |
| 1.3.2 Short Tandem Target Mimic技术 | 第13-14页 |
| 1.3.3 Anti-artificial-mi RNA技术 | 第14-15页 |
| 1.4 番茄晚疫病及盐、旱胁迫 | 第15-16页 |
| 1.4.1 番茄晚疫病及防治策略 | 第15页 |
| 1.4.2 番茄盐、旱胁迫概述 | 第15-16页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 2 miR482a的生物信息学及表达特性分析 | 第17-29页 |
| 2.1 实验材料及仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.1 实验数据库 | 第17页 |
| 2.1.2 生物信息学分析软件 | 第17页 |
| 2.1.3 生物材料 | 第17-18页 |
| 2.1.4 试剂及仪器 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-22页 |
| 2.2.1 miR482a的生物信息学分析 | 第18页 |
| 2.2.2 番茄与病原菌的培养 | 第18-19页 |
| 2.2.3 miR482a及其靶基因的表达特性分析 | 第19-21页 |
| 2.2.4 数据统计分析 | 第21-22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-27页 |
| 2.3.1 番茄miR482a上游启动子元件预测 | 第22-23页 |
| 2.3.2 番茄miR482a靶基因预测 | 第23-24页 |
| 2.3.3 miR482a的组织特异性 | 第24页 |
| 2.3.4 病原菌处理下miR482a及其靶基因的表达特性 | 第24-25页 |
| 2.3.5 SA处理下miR482a及其靶基因的表达特性 | 第25-26页 |
| 2.3.6 高盐处理下miR482a及其靶基因的表达特性 | 第26页 |
| 2.3.7 干旱处理下miR482a及其靶基因的表达特性 | 第26-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27-28页 |
| 2.5 小结 | 第28-29页 |
| 3 沉默miR482a增强番茄对晚疫病的抗性 | 第29-43页 |
| 3.1 实验材料及仪器 | 第29-30页 |
| 3.1.1 材料 | 第29页 |
| 3.1.2 试剂 | 第29页 |
| 3.1.3 仪器 | 第29-30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-35页 |
| 3.2.1 根癌农杆菌渗透法瞬时转化番茄叶片 | 第30-31页 |
| 3.2.2 根癌农杆菌介导的番茄遗传转化 | 第31-32页 |
| 3.2.3 番茄再生植株的分子检测 | 第32-34页 |
| 3.2.4 稳定沉默miR482a的抗病性检测 | 第34页 |
| 3.2.5 数据统计分析 | 第34-35页 |
| 3.3 结果与分析 | 第35-42页 |
| 3.3.1 miR482a及其靶基因的瞬时表达特性分析 | 第35-36页 |
| 3.3.2 瞬时沉默miR482a增强番茄叶片的抗病能力 | 第36-37页 |
| 3.3.3 转基因阳性植株的获得 | 第37页 |
| 3.3.4 番茄再生植株的分子检测 | 第37-38页 |
| 3.3.5 转基因番茄植株的抗病性分析 | 第38-40页 |
| 3.3.6 沉默植株中miR482a及其靶基因在病原菌处理下的表达特性 | 第40-42页 |
| 3.4 讨论 | 第42页 |
| 3.5 小结 | 第42-43页 |
| 4 沉默miR482a增强番茄对盐和旱的抗性 | 第43-55页 |
| 4.1 实验材料及仪器 | 第43页 |
| 4.1.1 试剂 | 第43页 |
| 4.1.2 仪器 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-48页 |
| 4.2.1 转基因番茄的抗逆性鉴定 | 第43-44页 |
| 4.2.2 组织化学染色 | 第44页 |
| 4.2.3 转基因植株生理指标的测定 | 第44-47页 |
| 4.2.4 数据统计分析 | 第47-48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-53页 |
| 4.3.1 转基因番茄植株的耐盐性分析 | 第48-51页 |
| 4.3.2 转基因番茄植株的抗旱性分析 | 第51-53页 |
| 4.4 讨论 | 第53-54页 |
| 4.5 小结 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录A 培养基配方 | 第61-62页 |
| 附录B 论文中所用沉默载体图谱 | 第62-63页 |
| 攻读硕士学位期间专利申请情况 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-66页 |
