| 学位论文数据集 | 第3-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-49页 |
| 1.1 辅酶Q_(10)概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 辅酶Q_(10)的基本理化性质 | 第13-14页 |
| 1.1.2 辅酶Q_(10)的生理、生化作用功能 | 第14-15页 |
| 1.1.3 CoQ_(10)的市场前景与展望 | 第15-16页 |
| 1.2 CoQ的生物合成途径 | 第16-23页 |
| 1.2.1 醌环的生物合成 | 第16-17页 |
| 1.2.2 异戊烯侧链的合成 | 第17页 |
| 1.2.3 环的修饰反应及其所涉及的关键酶基因 | 第17-22页 |
| 1.2.4 多亚基复合物 | 第22-23页 |
| 1.3 微生物生产辅酶Q_(10)的研究 | 第23-30页 |
| 1.3.1 辅酶Q_(10)产生菌种类的研究 | 第23页 |
| 1.3.2 菌种诱变 | 第23-25页 |
| 1.3.3 构建重组大肠杆菌生产辅酶Q_(10) | 第25-28页 |
| 1.3.4 重组大肠杆菌发酵生产辅酶Q_(10) | 第28-29页 |
| 1.3.5 构建重组酿酒酵母菌株 | 第29-30页 |
| 1.3.6 构建重组裂殖酵母菌株 | 第30页 |
| 1.4 辅酶Q_(10)发酵条件的研究 | 第30-32页 |
| 1.4.1 碳氮源 | 第30-31页 |
| 1.4.2 溶解氧 | 第31页 |
| 1.4.3 前体物 | 第31-32页 |
| 1.4.4 培养时间 | 第32页 |
| 1.5 高密度培养技术 | 第32-39页 |
| 1.5.1 重组大肠杆菌高密度发酵 | 第32-37页 |
| 1.5.2 酵母细胞高密度发酵 | 第37-39页 |
| 1.6 本课题的设计思路和研究内容 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-49页 |
| 第二章 大肠杆菌中生产辅酶Q_(10)及其发酵研究 | 第49-89页 |
| 2.1 引言 | 第49页 |
| 2.2 材料和方法 | 第49-62页 |
| 2.2.1 菌种与质粒 | 第49-50页 |
| 2.2.2 试剂和仪器设备 | 第50-51页 |
| 2.2.3 培养基 | 第51-52页 |
| 2.2.4 试验方法 | 第52-59页 |
| 2.2.5 分析方法 | 第59-62页 |
| 2.3 结果和讨论 | 第62-86页 |
| 2.3.1 基因的克隆、测序 | 第62-66页 |
| 2.3.2 ubiA,ubiCA和ubiG基因的克隆、测序及序列分析 | 第66-68页 |
| 2.3.3 重组质粒pET-28(+)-dps-ubiA,pET-28(+)-dps-ubiCA,pET-28(+)-dps-ubiG的构建 | 第68-69页 |
| 2.3.4 含有重组质粒pET-28a-dps转化子的诱导表达 | 第69-73页 |
| 2.3.5 重组质粒pET-28(+)-dps,pET-28(+)-dps-ubiA,pET-28(+)-dps-ubiCA,pET-28(+)-dps-ubiG的表达 | 第73-75页 |
| 2.3.6 重组菌株pET-28(+)-dps-ubiCA的摇瓶培养 | 第75-76页 |
| 2.3.7 重组菌pDPSca的分批补料发酵培养 | 第76-83页 |
| 2.3.8 重组菌pDPSca高密度发酵培养 | 第83-86页 |
| 2.4 小结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-89页 |
| 第三章 高产辅酶Q_(10)裂殖酵母的构建、表型及发酵研究 | 第89-117页 |
| 3.1 引言 | 第89页 |
| 3.2 材料和方法 | 第89-100页 |
| 3.2.1 菌种与质粒 | 第89-90页 |
| 3.2.2 试验试剂及仪器设备 | 第90页 |
| 3.2.3 培养基 | 第90-91页 |
| 3.2.4 试验方法 | 第91-100页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第100-115页 |
| 3.3.1 ppt1基因的克隆、测序及序列分析 | 第100-102页 |
| 3.3.2 uppt1基因的克隆 | 第102-104页 |
| 3.3.3 重组质粒pMTppt1和pERppt1的构建 | 第104-105页 |
| 3.3.4 重组质粒pMTppt1和pERppt1的鉴定 | 第105-106页 |
| 3.3.5 MT-type和ER-type ppt1基因在酵母中的转录分析 | 第106-107页 |
| 3.3.6 重组酵母pMTppt1、pERppt1和pESPM的辅酶Q_(10)含量检测 | 第107-108页 |
| 3.3.7 重组酵母pMTppt1、pERppt1和pESPM的表型检测 | 第108-109页 |
| 3.3.8 重组裂殖酵母发酵生产辅酶Q_(10)过程参数研究 | 第109-115页 |
| 3.4 小结 | 第115页 |
| 参考文献 | 第115-117页 |
| 第四章 在根癌农杆菌中表达各种基因提高辅酶Q_(10)产量 | 第117-135页 |
| 4.1 引言 | 第117页 |
| 4.2 材料和方法 | 第117-121页 |
| 4.2.1 菌种与质粒 | 第117-118页 |
| 4.2.2 试验试剂及仪器设备 | 第118页 |
| 4.2.3 培养基 | 第118页 |
| 4.2.4 试验方法 | 第118-121页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第121-132页 |
| 4.3.1 virA基因启动子鉴定 | 第121-122页 |
| 4.3.2 dps,dps-ubiC-ubiA,ppt1,coq2基因的PCR扩增 | 第122-124页 |
| 4.3.3 重组质粒pBIV-dps,pBIV-dpsq,pBIV-dpsp,pBIV-dpsca的鉴定 | 第124-127页 |
| 4.3.4 摇瓶发酵重组农杆菌生产辅酶Q_(10) | 第127-128页 |
| 4.3.5 重组农杆菌发酵生产辅酶Q_(10)的研究 | 第128-132页 |
| 4.4 小结 | 第132-133页 |
| 参考文献 | 第133-135页 |
| 第五章 结论 | 第135-139页 |
| 1 基因的克隆、表达及对辅酶Q_18合成的影响 | 第135页 |
| 2 重组大肠杆菌pDPSca的摇瓶培养及乳糖作为诱导剂的补料发酵 | 第135-136页 |
| 3 重组大肠杆菌pDPSca的高密度发酵 | 第136页 |
| 4 裂殖酵母jcpr/基因的克隆，定位Pptl到线粒体和内质网重组质粒的构建 | 第136-137页 |
| 5 重组裂殖酵母的高密度发酵 | 第137页 |
| 6 在根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)中表达各种基因提高辅酶Q_10产量 | 第137页 |
| 7 微氧和耗氧条件对各重组农杆菌辅酶Q_10含量的影响 | 第137-139页 |
| 本论文的创新点 | 第139-141页 |
| 问题与建议 | 第141-143页 |
| 附录一 | 第143-147页 |
| 附录二 | 第147-149页 |
| 附录三 | 第149-151页 |
| 附录四 | 第151-153页 |
| 附录五 | 第153-155页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第155-157页 |
| 致谢 | 第157-158页 |
| 附件 | 第158-159页 |
