摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
前言 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 聚醚类抗生素 | 第10-12页 |
1.1.1 聚醚类抗生素的结构与应用 | 第10-12页 |
1.1.2 莫能菌素的理化性质 | 第12页 |
1.2 莫能菌素的生物合成 | 第12-16页 |
1.2.1 莫能菌素的生物合成单元 | 第12-13页 |
1.2.2 莫能菌素生物合成基因簇 | 第13-15页 |
1.2.3 莫能菌素生物合成的转录调控基因 | 第15-16页 |
1.3 肉桂地链霉菌的发酵与异源表达 | 第16-18页 |
1.3.1 肉桂地链霉菌的发酵 | 第16-17页 |
1.3.2 肉桂地链霉菌的异源表达 | 第17-18页 |
1.4 本文主要研究内容和研究意义 | 第18-19页 |
1.4.1 主要研究内容 | 第18页 |
1.4.2 研究意义 | 第18-19页 |
第二章 肉桂地链霉菌发酵培养基的改良 | 第19-29页 |
2.1 材料与方法 | 第19-24页 |
2.1.1 菌种 | 第19页 |
2.1.2 实验仪器与实验试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 肉桂地链霉菌的培养 | 第20-21页 |
2.1.4 莫能菌素效价的测定 | 第21-23页 |
2.1.5 莫能菌素发酵液 pH 的测定 | 第23页 |
2.1.6 肉桂地链霉菌生物量的测定 | 第23页 |
2.1.7 肉桂地链霉菌抗性实验 | 第23页 |
2.1.8 肉桂地链霉菌菌种的复壮 | 第23页 |
2.1.9 肉桂地链霉菌发酵培养基成分的选择 | 第23-24页 |
2.2 结果与讨论 | 第24-28页 |
2.2.1 肉桂地链霉菌的抗性 | 第24-25页 |
2.2.2 肉桂地链霉菌发酵特性 | 第25页 |
2.2.3 肉桂地链霉菌高产菌株的筛选 | 第25-26页 |
2.2.4 肉桂地链霉菌发酵培养基的改良 | 第26-28页 |
2.3 本章小结 | 第28-29页 |
第三章 monH 基因功能的研究 | 第29-48页 |
3.1 材料与方法 | 第29-37页 |
3.1.1 菌种与质粒 | 第29页 |
3.1.2 实验仪器与实验试剂 | 第29-31页 |
3.1.3 大肠杆菌的转化 | 第31页 |
3.1.4 大肠杆菌的电转化 | 第31-32页 |
3.1.5 质粒操作 | 第32-33页 |
3.1.6 PCR 操作 | 第33-35页 |
3.1.7 链霉菌基因操作 | 第35-37页 |
3.2 monH 基因敲除载体与过表达载体的构建方法 | 第37-43页 |
3.2.1 monH 敲除载体构建 | 第38-39页 |
3.2.2 monH 过表达载体的构建 | 第39-42页 |
3.2.3 基因敲除菌株的筛选方法 | 第42-43页 |
3.3 结果与讨论 | 第43-47页 |
3.3.1 monH 敲除载体的构建 | 第43-44页 |
3.3.2 monH 敲除菌株 PCR 的验证 | 第44-45页 |
3.3.3 monH 过表达载体的构建 | 第45-46页 |
3.3.4 monH 回补菌株和过表达菌株的发酵 | 第46-47页 |
3.4 本章小结 | 第47-48页 |
第四章 莫能菌素全基因簇与 monRI、monRII 的敲除 | 第48-60页 |
4.1 材料与方法 | 第48-54页 |
4.1.1 菌种和质粒 | 第48页 |
4.1.2 实验仪器与实验材料 | 第48页 |
4.1.3 莫能菌素全基因簇敲除载体构建方法 | 第48-50页 |
4.1.4 monRI 和 monRII 敲除载体构建方法 | 第50-54页 |
4.2 结果与分析 | 第54-59页 |
4.2.1 莫能菌素全基因簇的敲除 | 第54-57页 |
4.2.2 monRI 和 monRII 载体的构建 | 第57-59页 |
4.3 本章小结 | 第59-60页 |
第五章 结论与展望 | 第60-62页 |
5.1 结论 | 第60页 |
5.2 展望 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |