致谢 | 第5-6页 |
中文摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略语表 | 第10-14页 |
第一部分 不动杆菌属菌种鉴定研究 | 第14-44页 |
引言 | 第14-16页 |
1 材料与方法 | 第16-30页 |
1.1 材料 | 第16-18页 |
1.1.1 菌株来源 | 第16-17页 |
1.1.2 试剂和仪器 | 第17-18页 |
1.1.2.1 试剂 | 第17页 |
1.1.2.2 本研究所用试剂配制方法 | 第17-18页 |
1.1.2.3 仪器 | 第18页 |
1.2 研究方法 | 第18-30页 |
1.2.1 VITEK 2细菌全自动鉴定 | 第19页 |
1.2.2 VITEK MS全自动快速微生物质谱检测 | 第19-20页 |
1.2.3 PCR扩增bla_(OXA-51)-like基因及序列分析 | 第20-21页 |
1.2.4 rpoB基因序列鉴定 | 第21-25页 |
1.2.5 16S rRNA序列鉴定 | 第25-29页 |
1.2.6 rpoB基因16S rRNA序列种间差异性和种内差异性的计算 | 第29页 |
1.2.7 体外药物敏感性试验 | 第29-30页 |
2 结果 | 第30-36页 |
2.1 rpoB基因相似性及测序鉴定结果 | 第30-32页 |
2.2 16S RNA基因相似性及测序鉴定结果 | 第32页 |
2.3 VITEK 2和MALDI-TOF MS鉴定结果 | 第32-33页 |
2.4 不同鉴定方法鉴定结果的比较 | 第33-36页 |
2.5 药敏结果 | 第36页 |
2.6 bla_(OXA-51)-like基因假阳性和假阴性率 | 第36页 |
3 讨论 | 第36-39页 |
4 小结 | 第39页 |
参考文献 | 第39-44页 |
第二部分 鲍曼不动杆菌vgrG Ⅵ型分泌系统毒力效应研究 | 第44-95页 |
引言 | 第44-46页 |
1 材料与方法 | 第46-70页 |
1.1 材料 | 第46-52页 |
1.1.1 菌株和质粒来源 | 第46-49页 |
1.1.2 试剂和仪器 | 第49-52页 |
1.2 研究方法 | 第52-70页 |
1.2.1 电转化感受态细胞的制备步骤(甘油法) | 第52-53页 |
1.2.2 细菌质粒提取 | 第53-54页 |
1.2.3 电转化 | 第54页 |
1.2.4 化学转化 | 第54-55页 |
1.2.5 基因敲除 | 第55-61页 |
1.2.6 回补质粒的构建 | 第61-62页 |
1.2.7 荧光质粒的构建 | 第62-65页 |
1.2.8 荧光标记细菌基因敲入 | 第65-66页 |
1.2.9 细胞培养和质粒转染 | 第66-67页 |
1.2.10 E-test条法测定体外药物敏感性 | 第67-68页 |
1.2.11 生长曲线 | 第68页 |
1.2.12 96孔微量板定量检测细菌生物膜的方法步骤 | 第68-69页 |
1.2.13 细胞粘附侵袭实验 | 第69页 |
1.2.14 小鼠血流感染模型 | 第69-70页 |
2 结果 | 第70-84页 |
2.1 基因敲除株及回补株的建立 | 第70-71页 |
2.2 vgrG基因敲除及BFP基因敲入株的建立 | 第71-73页 |
2.3 携带绿色荧光野生株的建立 | 第73-74页 |
2.4 红色荧光质粒转染的BEAS-2B细胞株建立 | 第74-75页 |
2.5 vgrG基因敲除后药敏的变化 | 第75-77页 |
2.6 vgrG基因敲除后生长速率的变化 | 第77-78页 |
2.7 生物被膜形成能力的改变 | 第78-79页 |
2.8 细菌粘附能力的改变 | 第79-83页 |
2.9 对小鼠致死能力的改变 | 第83-84页 |
3 讨论 | 第84-88页 |
4 小结 | 第88页 |
参考文献 | 第88-95页 |
文献综述 不动杆菌属细菌菌种鉴定研究进展 | 第95-118页 |
参考文献 | 第109-118页 |
作者简历及在读期间取得的科研成果 | 第118-119页 |