摘要 | 第3-4页 |
abstract | 第4页 |
第1章 引言 | 第8-16页 |
1.1 骨骼肌概述 | 第8-10页 |
1.1.1 骨骼肌胚胎起源 | 第8-9页 |
1.1.2 成年骨骼肌损伤修复 | 第9-10页 |
1.2 长链非编码RNA概述 | 第10-11页 |
1.2.1 LncRNA种类 | 第11页 |
1.2.2 LncRNA功能 | 第11页 |
1.3 LncRNA调控骨骼肌发育的作用 | 第11-14页 |
1.3.1 LncRNA在转录水平上调控骨骼肌发育 | 第12-13页 |
1.3.2 LncRNA作为诱饵分子调控骨骼肌分化 | 第13页 |
1.3.3 LncRNA作为支架分子调控骨骼肌分化 | 第13-14页 |
1.4 LncRNA与肌肉疾病 | 第14-15页 |
1.4.1 LncRNA与杜氏肌营养不良症 | 第14页 |
1.4.2 LncRNA与面肩肱肌营养不良症 | 第14-15页 |
1.5 研究目的与意义 | 第15-16页 |
第2章 实验材料 | 第16-19页 |
2.1 实验动物与细胞 | 第16页 |
2.2 主要仪器与设备 | 第16-17页 |
2.3 主要试剂与耗材 | 第17-18页 |
2.4 实验引物信息 | 第18页 |
2.5 实验抗体信息 | 第18页 |
2.6 主要生物学软件与数据库 | 第18-19页 |
第3章 实验方法 | 第19-32页 |
3.1 细胞培养 | 第19-20页 |
3.1.1 主要试剂 | 第19页 |
3.1.2 细胞复苏 | 第19-20页 |
3.1.3 细胞传代 | 第20页 |
3.1.4 细胞冻存 | 第20页 |
3.2 细胞病毒感染 | 第20-24页 |
3.2.1 主要试剂 | 第20-21页 |
3.2.2 慢病毒载体 | 第21-22页 |
3.2.3 siRNA信息 | 第22页 |
3.2.4 感染预实验步骤 | 第22-23页 |
3.2.5 感染正式实验步骤 | 第23-24页 |
3.3 基因表达量的分析 | 第24-27页 |
3.3.1 主要试剂 | 第24页 |
3.3.2 组织与细胞总RNA的提取 | 第24-25页 |
3.3.3 RNA反转录 | 第25-26页 |
3.3.4 普通PCR反应 | 第26页 |
3.3.5 qPCR反应 | 第26-27页 |
3.4 蛋白表达量的分析 | 第27-31页 |
3.4.1 主要试剂 | 第27页 |
3.4.2 细胞总蛋白的提取 | 第27-28页 |
3.4.3 蛋白浓度测定 | 第28页 |
3.4.4 Western Blot实验步骤 | 第28-31页 |
3.5 细胞免疫染色 | 第31-32页 |
3.5.1 主要试剂 | 第31页 |
3.5.2 免疫染色步骤 | 第31-32页 |
第4章 实验结果 | 第32-54页 |
4.1 Lnc247与Foxk1的关系 | 第32-34页 |
4.1.1 Lnc247序列信息 | 第32-33页 |
4.1.2 Lnc247与Foxk1序列对比结果 | 第33-34页 |
4.2 Lnc247与Foxk1在小鼠各组织中的表达差异 | 第34-35页 |
4.3 Lnc247与Foxk1在成肌分化中的表达变化 | 第35-41页 |
4.3.1 C2C12成肌细胞的增殖与分化 | 第35-37页 |
4.3.2 C2C12成肌细胞总RNA的提取 | 第37页 |
4.3.3 C2C12成肌细胞反转录及检测结果分析 | 第37-38页 |
4.3.4 相关基因定量引物的检测结果分析 | 第38-39页 |
4.3.5 Lnc247在C2C12成肌细胞分化过程中表达结果分析 | 第39-41页 |
4.4 Lnc247过表达与敲低转染效率的检测 | 第41-49页 |
4.4.1 病毒感染预实验结果 | 第41-44页 |
4.4.2 病毒正式感染实验结果 | 第44-45页 |
4.4.3 qPCR检测Lnc247表达量变化对Foxk1的影响 | 第45-47页 |
4.4.4 Western Blot检测Lnc247表达量变化对Foxk1的影响 | 第47-49页 |
4.5 Lnc247对C2C12成肌细胞分化的影响 | 第49-54页 |
4.5.1 qPCR检测lnc247对C2C12成肌细胞分化的影响 | 第49-50页 |
4.5.2 Western Blot检测lnc247表达量变化对Foxk1的影响 | 第50-52页 |
4.5.3 细胞免疫染色检测lnc247对C2C12成肌细胞分化的影响 | 第52-54页 |
第5章 结论与展望 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |