| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语 | 第13-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-37页 |
| 1.1 研究问题的由来 | 第14页 |
| 1.2 玉米转基因研究进展 | 第14-18页 |
| 1.2.1 玉米转基因受体体系研究进展 | 第15-17页 |
| 1.2.2 玉米转基因方法研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 农杆菌介导的玉米转基因研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 农杆菌介导法在玉米转基因中的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3.2 影响农杆菌转化的因素 | 第19-20页 |
| 1.4 玉米转基因筛选标记研究进展 | 第20-26页 |
| 1.4.1 转基因筛选标记研究进展 | 第20-23页 |
| 1.4.2 转基因标记剔除技术研究进展 | 第23-26页 |
| 1.5 玉米突变体库研究进展 | 第26-37页 |
| 1.5.1 植物突变体库构建的意义 | 第26页 |
| 1.5.2 植物突变体库构建的方法 | 第26-33页 |
| 1.5.3 玉米突变体库研究进展 | 第33-37页 |
| 第二章 玉米愈伤组织转基因体系的建立 | 第37-49页 |
| 2.1 研究目的意义 | 第37页 |
| 2.2 实验材料 | 第37-38页 |
| 2.2.1 转基因受体材料 | 第37-38页 |
| 2.2.2 转基因载体 | 第38页 |
| 2.3 实验方法 | 第38-41页 |
| 2.3.1 转化方法筛选 | 第38-39页 |
| 2.3.2 转化受体材料筛选 | 第39-40页 |
| 2.3.3 转cry1C*阳性植株表达验证和抗性鉴定 | 第40页 |
| 2.3.4 农杆菌转化体系的优化 | 第40-41页 |
| 2.4 结果与分析 | 第41-47页 |
| 2.4.1 转基因方法鉴定 | 第41-42页 |
| 2.4.2 农杆菌转化受体材料筛选 | 第42-44页 |
| 2.4.3 阳性转化后代抗性鉴定及表达分析 | 第44-46页 |
| 2.4.4 农杆菌转化体系优化 | 第46-47页 |
| 2.5 讨论 | 第47-49页 |
| 2.5.1 玉米高效转基因体系的建立 | 第47页 |
| 2.5.2 农杆菌介导的胚性愈伤组织转化体系的建立 | 第47-49页 |
| 第三章 新型载体构建与转化验证 | 第49-64页 |
| 3.1 研究目的意义 | 第49页 |
| 3.2 实验材料 | 第49-52页 |
| 3.2.1 转基因受体材料 | 第49-50页 |
| 3.2.2 转基因骨架载体 | 第50页 |
| 3.2.3 实验所用的基因元件 | 第50-52页 |
| 3.2.4 实验所用引物 | 第52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-53页 |
| 3.3.1 新型转化载体的构建 | 第52页 |
| 3.3.2 农杆菌介导的遗传转化与绿色荧光筛选 | 第52-53页 |
| 3.3.3 筛选标记基因剔除与转基因植株再生 | 第53页 |
| 3.4 结果与分析 | 第53-62页 |
| 3.4.1 新型转化载体pHZM1N-Rsc构建 | 第53-55页 |
| 3.4.2 农杆菌介导的遗传转化与绿色荧光筛选 | 第55-57页 |
| 3.4.3 筛选标记基因的剔除与转基因植株再生 | 第57-61页 |
| 3.4.4 基于玉米胚性愈伤组织的高效标记剔除转基因体系的建立 | 第61-62页 |
| 3.5 讨论 | 第62-64页 |
| 3.5.1 绿色荧光筛选标记验证 | 第62-63页 |
| 3.5.2 筛选标记自剔除载体的构建与应用 | 第63-64页 |
| 第四章 玉米激活标签突变体生成系的创建 | 第64-103页 |
| 4.1 引言 | 第64页 |
| 4.2 实验材料 | 第64-66页 |
| 4.2.1 本实验所用玉米材料 | 第64-66页 |
| 4.2.2 骨架载体pHZM1N-Rsc | 第66页 |
| 4.2.3 激活标签载体上添加基因与元件 | 第66页 |
| 4.3 实验方法 | 第66-70页 |
| 4.3.1 激活标签突变体Ds系的构建 | 第66-67页 |
| 4.3.2 含有不移动转座酶的玉米材料获得 | 第67-68页 |
| 4.3.3 激活标签突变体生成系的获得和分析 | 第68-69页 |
| 4.3.4 激活标签突变体初步筛选 | 第69-70页 |
| 4.4 结果与分析 | 第70-93页 |
| 4.4.1 载体pHZM1-Rsc-Activation构建 | 第70-71页 |
| 4.4.2 激活标签转座子载体的转化 | 第71页 |
| 4.4.3 激活标签转座子Ds系的检测 | 第71-73页 |
| 4.4.4 激活标签转座子Ds系的籽粒表型 | 第73-74页 |
| 4.4.5 激活标签突变体Ds系的染色体定位 | 第74-77页 |
| 4.4.6 含有不移动转座酶的玉米材料获得 | 第77-82页 |
| 4.4.7 激活标签突变体生成系的获得及保存 | 第82-84页 |
| 4.4.8 激活标签突变体生成系DT1转座特性和突变体筛选 | 第84-93页 |
| 4.5 讨论 | 第93-103页 |
| 4.5.1 基于人工Ac/Ds转座子的激活标签突变体生成系的构建 | 第93-94页 |
| 4.5.2 基于人工Ac/Ds转座子的激活标签突变体生成系的特点 | 第94-98页 |
| 4.5.3 基于人工Ac/Ds转座子的激活标签突变体生成系繁殖保种 | 第98-99页 |
| 4.5.4 激活标签突变体生成系DT1的特性及突变体筛选 | 第99-101页 |
| 4.5.5 本研究存在的不足及展望 | 第101-103页 |
| 第五章 总结 | 第103-104页 |
| 参考文献 | 第104-129页 |
| 附录I 实验中使用的试剂与培养基 | 第129-132页 |
| 附录II 实验操作流程 | 第132-150页 |
| 附录III 人工转座子DNA序列 | 第150-153页 |
| 附录IV 生成系DT1-DT7插入位点边序 | 第153-161页 |
| 附录V 作者简介与在读期间研究成果 | 第161-162页 |
| 致谢 | 第162-164页 |
