| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14-36页 |
| 1.1 高温胁迫引起的雄性不育概述 | 第14-16页 |
| 1.1.1 棉花简介 | 第14页 |
| 1.1.2 高温胁迫引起的植物雄性不育概述 | 第14-16页 |
| 1.2 植物雄性生殖器官的生长发育及分子基础 | 第16-26页 |
| 1.2.1 棉花雄性器官的形态结构 | 第16-17页 |
| 1.2.2 植物雄性器官的形态建成和发育 | 第17-19页 |
| 1.2.3 植物雄性器官发育的分子基础 | 第19-25页 |
| 1.2.3.1 植物雄蕊的早期发育调控 | 第20-21页 |
| 1.2.3.2 植物雄蕊发育中期绒毡层发育的基因调控 | 第21-24页 |
| 1.2.3.3 植物雄蕊发育后期的基因调控 | 第24-25页 |
| 1.2.4 植物激素在植物雄性生殖器官发育中的作用 | 第25-26页 |
| 1.3 高温影响植物雄性生殖器官的发育 | 第26-31页 |
| 1.3.1 植物对高温的响应 | 第26-31页 |
| 1.3.1.1 植物响应高温的信号转导途径 | 第27-29页 |
| 1.3.1.2 热激蛋白和热激因子在植物耐热性中的作用 | 第29-31页 |
| 1.4 植物micro RNA与花药发育及高温响应相关进展 | 第31-34页 |
| 1.4.1 micro RNA简介 | 第31页 |
| 1.4.2 micro RNA与花药发育 | 第31-33页 |
| 1.4.3 micro RNA参与高温响应 | 第33-34页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第34-36页 |
| 2 实验材料与方法 | 第36-45页 |
| 2.1 实验用植物材料 | 第36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-45页 |
| 2.2.1 植物材料的种植、高温处理及样品准备 | 第36页 |
| 2.2.2 棉花各组织总RNA提取，质量检测及浓度测定 | 第36-37页 |
| 2.2.3 Small RNA文库构建和数据分析 | 第37-39页 |
| 2.2.3.1 Small RNA文库构建 | 第37-38页 |
| 2.2.3.2 Small RNA测序数据分析 | 第38-39页 |
| 2.2.4 降解组测序及信息分析 | 第39-41页 |
| 2.2.5 miRNA及其靶标的qRT-PCR表达验证 | 第41页 |
| 2.2.5.1 miRNA反转录 | 第41页 |
| 2.2.5.2 miRNA及其靶标的qRT-PCR表达检测 | 第41页 |
| 2.2.6 RLM-RACE验证靶标剪切位点 | 第41-42页 |
| 2.2.7 外源生长素喷施处理 | 第42页 |
| 2.2.8 花粉活力染色 | 第42页 |
| 2.2.9 ARFs家族同源性分析 | 第42-43页 |
| 2.2.10 石蜡切片 | 第43-44页 |
| 2.2.11 花药的苯胺蓝染色 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-71页 |
| 3.1 高温条件下棉花花药发育的小分子RNA测序分析 | 第45-51页 |
| 3.1.1 棉花花药发育过程中对高温敏感的时期鉴定 | 第45-46页 |
| 3.1.2 Small RNA测序的基本数据分析 | 第46-48页 |
| 3.1.3 高温响应相关的miRNA筛选 | 第48-50页 |
| 3.1.4 ‘84021’和‘H05’花药中响应高温胁迫的miRNA的表达变化 | 第50-51页 |
| 3.2 降解组测序鉴定小RNA的靶标 | 第51-56页 |
| 3.2.1 降解组测序数据分析 | 第51-55页 |
| 3.2.2 靶标的剪切位点验证 | 第55页 |
| 3.2.3 靶标的表达检测及与miRNA表达丰度的相关性分析 | 第55-56页 |
| 3.3 miRNA参与高温胁迫下棉花花药的发育调控 | 第56-69页 |
| 3.3.1 miR160参与生长素信号调控的棉花高温胁迫雄性不育过程 | 第58-64页 |
| 3.3.1.1 超表达miR160棉花花药对高温更加敏感 | 第58-61页 |
| 3.3.1.2 高温及生长素处理下 ‘84021’和‘H05’中miR160及靶标的表达变化 | 第61-64页 |
| 3.3.2 miR157超表达棉花材料对高温更加敏感 | 第64-69页 |
| 3.3.2.1 miR157超表达植株的表型鉴定 | 第64-66页 |
| 3.3.2.2 miR157超表达棉花材料的花药对高温的响应 | 第66-69页 |
| 3.4 结论 | 第69-71页 |
| 4 讨论 | 第71-75页 |
| 4.1 small RNA参与高温影响棉花花药的发育过程 | 第71-72页 |
| 4.2 生长素信号平衡对棉花花药育性极为关键 | 第72-73页 |
| 4.3 多种mi RNA参与了棉花花药响应高温的过程 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-94页 |
| 附录 | 第94-109页 |
| 攻读学位期间已发表和待发表论文 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-112页 |
