摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
缩写词表 | 第7-10页 |
1 引言 | 第10-13页 |
2 材料和方法 | 第13-20页 |
2.1 供试菌株与质粒 | 第13页 |
2.2 试剂与溶液 | 第13页 |
2.3 供试培养基 | 第13页 |
2.4 仪器与设备 | 第13-14页 |
2.5 玉米大斑病菌 StFPS1 基因的 RNAi 重组载体构建 | 第14-15页 |
2.5.1 玉米大斑病菌全基因组 DNA 的提取 | 第14页 |
2.5.2 StFPS1 基因目的条带的 PCR 扩增 | 第14页 |
2.5.3 PCR 扩增产物的回收、连接 | 第14-15页 |
2.5.4 PCR 扩增产物的测序 | 第15页 |
2.5.5 重组载体的构建 | 第15页 |
2.6 玉米大斑病菌 StFPS1 基因 RNAi 转化子的获得 | 第15-17页 |
2.6.1 玉米大斑病菌的原生质体转化 | 第15页 |
2.6.2 RNAi 转化子的筛选 | 第15-16页 |
2.6.3 StFPS1 基因 RNAi 转化子的验证 | 第16-17页 |
2.7 玉米大斑病菌 StFPS1 基因的功能分析 | 第17-20页 |
2.7.1 菌落形态的观察及生长速率的测定 | 第17页 |
2.7.2 菌丝形态的光学显微观察及分生孢子产量的测定 | 第17页 |
2.7.3 转化子对不同物质渗透胁迫的反应 | 第17-18页 |
2.7.4 转化子侵染能力的观察 | 第18页 |
2.7.5 转化子细胞壁形态和完整性分析 | 第18页 |
2.7.6 StFPS1 基因对 HOG 途径和 CWI 途径的影响 | 第18-20页 |
3 结果与分析 | 第20-36页 |
3.1 玉米大斑病菌水甘油通道蛋白 StFPS1 基因 RNAi 载体的构建 | 第20-21页 |
3.1.1 StFPS1 基因正向片段和反向片段的 PCR 扩增 | 第20-21页 |
3.1.2 pSilent-StFPS1 载体的酶切验证 | 第21页 |
3.2 玉米大斑病菌水甘油通道蛋白 StFPS1 基因 RNAi 转化子的获得 | 第21-23页 |
3.2.1 StFPS1 基因 RNAi 转化子的筛选 | 第21页 |
3.2.2 StFPS1 基因 RNAi 转化子的 PCR 验证 | 第21-22页 |
3.2.3 StFPS1 转化子的 RT-PCR 验证 | 第22-23页 |
3.3 玉米大斑病菌 StFPS1 基因对菌丝发育的影响 | 第23-25页 |
3.3.1 StFPS1 基因对菌落形态的影响 | 第23-24页 |
3.3.2 StFPS1 基因对菌落的生长速率的影响 | 第24页 |
3.3.3 StFPS1 基因对菌丝形态的影响 | 第24-25页 |
3.3.4 StFPS1 基因对病菌分生孢子产量的影响 | 第25页 |
3.4 玉米大斑病菌 StFPS1 基因对病菌高渗胁迫反应 | 第25-29页 |
3.4.1 高渗胁迫下转化子菌落形态观察和生长速率测定 | 第25-28页 |
3.4.2 高渗胁迫下转化子菌丝形态观察 | 第28页 |
3.4.3 转化子菌丝中甘油含量的测定 | 第28-29页 |
3.5 玉米大斑病菌 StFPS1 基因对病菌侵入能力的影响 | 第29-31页 |
3.5.1 StFPS1 基因对菌丝穿透能力的影响 | 第29-30页 |
3.5.2 StFPS1 基因对附着胞形成及穿透能力的影响 | 第30页 |
3.5.3 StFPS1 基因对病菌侵染能力的影响 | 第30-31页 |
3.6 玉米大斑病菌 StFPS1 基因对细胞壁发育的影响 | 第31-34页 |
3.6.1 StFPS1 基因对菌丝细胞壁的影响 | 第31-32页 |
3.6.2 StFPS1 基因转化子的细胞壁完整性分析 | 第32-34页 |
3.7 玉米大斑病菌 StFPS1 基因对 HOG 途径、CWI 途径的影响 | 第34-36页 |
4 讨论 | 第36-39页 |
4.1 真菌中水甘油通道蛋白基因的分类及其在适应高渗环境中的作用 | 第36-37页 |
4.2 水甘油通道蛋白基因对菌丝生长发育的影响 | 第37页 |
4.3 水甘油通道蛋白基因对致病性的影响 | 第37-39页 |
5 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
在读期间发表的学术论文 | 第44-45页 |
作者简历 | 第45-47页 |
致谢 | 第47-48页 |